Olbaltumvielas urīnā - normas noteikšanas metodes un robežas (problēmas pašreizējais stāvoklis). Olbaltumvielu noteikšana urīnā ar Brandberga-Roberta-Stolņikova metodi

52. lapa no 76

urīnā vesels bērns olbaltumvielas ir nelielā daudzumā, un parastie kvalitatīvie paraugi to nenosaka. Olbaltumvielu daudzums urīnā (proteinūrija) palielinās ar nieru slimībām, toksikozi, leikēmiju, kaitīgu anēmiju, sastrēgumiem nierēs, pēc nieru palpācijas (palpācijas albumīnūrija) un fiziska pārslodze, ar emocionālu pārslodzi, drudzi, hipotermiju un citiem stāvokļiem. .
Olbaltumvielu kvalitatīva noteikšana urīnā. Olbaltumvielu kvalitatīvai noteikšanai urīnā visplašāk izmanto testu ar sulfosalicilskābi, Helera testu ar slāpekļskābi, viršanas testu uc Izmantojot paraugus, kuru pamatā ir olbaltumvielu nogulsnēšanās, ir svarīgi ievērot dažus vispārīgus noteikumus. lai izvairītos no kļūdām.

Urīnam jābūt skābam. Ja testa urīns ir sārmains, to nedaudz paskābina, pievienojot etiķskābi. Tomēr skābes daudzums nedrīkst būt liels, lai neizraisītu albumīna izšķīšanu.
Urīnam jābūt skaidram. Ja ir duļķainums, tas jānoņem, neizraisot olbaltumvielu nogulsnēšanos.
Paraugs jāizgatavo divās mēģenēs – eksperimentālajā un kontroles. Ja nav kontroles, jūs varat nepamanīt nelielu urīna duļķainību eksperimentālajā mēģenē.

Sulosalicilskābes tests ir viens no visjutīgākajiem pret olbaltumvielu klātbūtni urīnā. Mēģenē ielej 3-5 ml urīna un pievieno 20% sulfosacilskābes šķīdumu ar ātrumu 2 pilieni uz 1 ml urīna.
Citā modifikācijā parauga iestatīšanai mēģenē ielej 1 ml urīna un pievieno 3 ml 1% sulfosalicilskābes šķīduma.

Pirmajā un otrajā gadījumā, ja urīnā ir olbaltumvielas, pēc sulfosalicilskābes pievienošanas parādās duļķainība. Rezultātu ņem vērā duļķainības intensitāte: vāji pozitīvu reakciju (opalescenci) norāda (īss +), pozitīvu (+), strauji pozitīvu.
Helera testu veic šādi: vairākus mililitrus urīna uzmanīgi (nejaucot) uzklāj uz 1-2 ml 30% slāpekļskābes šķīduma ar relatīvo blīvumu 1,20. Ja urīnā olbaltumvielu ir 0,033 g/l vai vairāk, uz abu šķidrumu robežas veidojas balts gredzens, kas tiek novērtēts kā pozitīvs tests. Ar lielu urātu daudzumu urīnā var veidoties arī balts gredzens, bet tas atrodas tieši virs robežas starp šķidrumiem. Ar nelielu karsēšanu urātu gredzens pazūd.
Viršanas tests dod ticamus rezultātus, bet tikai tad, ja urīna pH ir 5,6. Šo testu vislabāk var veikt Ruperta modifikācijā ar Banges acetāta buferšķīdumu, kurā ietilpst 56,5 ml ledus etiķskābes, 118 g kristāliskā nātrija acetāta, kas izšķīdināts 1 litrā ūdens. Pievienojiet 5 ml urīna 1-2 ml Banges buferšķīduma un vāriet 1/2 min. Olbaltumvielu klātbūtnē urīnā veidojas duļķainība.
Olbaltumvielu kvantitatīvā noteikšana urīnā. Proteīna kvantitatīvai noteikšanai urīnā visbiežāk izmanto Esbaha metodi, Brandberga-Roberta-Stolņikova metodi, Sols biureta metodi utt.
Brandberga - Roberta - Stolnikova metode ir balstīta uz kvalitatīvu Gellera testu un ļauj noteikt olbaltumvielu klātbūtni urīnā no 0,033 g / l un vairāk. Tiek gatavotas vairākas mēģenes. Urīnu, kas satur olbaltumvielas, atšķaida ar fizioloģisko šķīdumu vai ūdeni, līdz pie šķidrumu (Roberta-Stolņikova reaģenta un urīna) robežas pārstāj veidoties balts gredzens. Gredzens pie divu šķidrumu robežas starp otro un trešo minūti parādās pie olbaltumvielu satura 0,033 g/l. Ja gredzens parādās agrāk nekā pēc dažām minūtēm, urīnu atšķaida ar ūdeni. Lielākais urīna atšķaidījums, kurā veidojas gredzens, satur 0,033 g/l proteīna. Urīna atšķaidīšanas pakāpi pēdējā mēģenē reizina ar 0,033 g/l un iegūst proteīna koncentrāciju veselā urīnā.

Proteīnūrija. Nieru slimības gadījumā tas ir saistīts ar paaugstinātu nieru filtra caurlaidību. Olbaltumvielas urīnā var nokļūt citā veidā (no urīnceļu, maksts, prostatas uc gļotādām) - ekstrarenāla proteīnūrija. Nieru proteīnūrija ir sadalīta organiskā un funkcionālā. Organiskā proteīnūrija ir saistīta ar nieru parenhīmas bojājumiem, funkcionāla - ar vazomotoriem traucējumiem. Viens no funkcionālās proteīnūrijas veidiem ir ortostatiskā (lordotiskā, intermitējošā, posturālā, cikliskā) albumīnūrija. Tiek pieņemts, ka ar izteiktu lordozi tiek izveidota pozīcija, kurā apakšējā dobā vēna tiek nospiesta pret mugurkaulu ar aknām, un tas noved pie stagnācijas nieru vēnās un sastrēguma albumīnūrijas. Elektronu mikroskopiskie pētījumi atklāja, ka ortostatiskajai albumīnūrijai ir morfoloģiskas iekaisuma procesa pazīmes nieru glomerulos.

Mūsu ilggadējie novērojumi liecina, ka ortostatisko albumīnūriju bieži izraisa nieru anomālijas vai to patoloģiska atrašanās vieta.Šajā sakarā kā skrīninga testu iesakām izmantot ortostatisko testu. Pēc ortostatiskās albuminūrijas noteikšanas ar šo testu mēs parasti veicam ekskrēcijas urrogrāfiju, lai izslēgtu urīnceļu sistēmas attīstības novirzes.
Ortostatiskais tests. Pārbaudes priekšvakarā, vakarā, apmēram stundu pirms gulētiešanas, bērnam ir jāiztukšo urīnpūslis. No rīta, izkāpjot no gultas, viņš uzreiz urinē, un šis urīns tiek savākts atsevišķā bļodā, atzīmējot to kā porciju pirms slodzes. Pēc tam bērnam tiek piedāvāts mesties ceļos uz pusmīksta krēsla ar nūju aiz muguras, satverot to ar elkoņiem. Šajā stāvoklī bērnam jābūt 15-20 minūtēm, pēc tam viņš iztukšo urīnpūsli un savāktais urīns atzīmēta kā pēcslodzes daļa. Olbaltumvielas tiek pārbaudītas urīna daļās, kas iegūtas pirms un pēc treniņa. Olbaltumvielu satura noteikšana vai palielinājums 2-3 vai vairāk reizes otrajā porcijā (kas iegūts pēc slodzes), salīdzinot ar pirmo porciju, tiek novērtēts kā pozitīvs ortostatiskais tests.
Olbaltumvielu frakciju noteikšana urīnā. Tiek veikti zīmētie elementi. Ar glomerulonefrītu, tuberkulozi, policistisku nieru slimību, nieru audzējiem, hemorāģisko vaskulītu, kolagenozēm, urīnpūšļa iekaisumu un citām sarkano asins šūnu slimībām urīnā var būt ievērojams daudzums. Ir makro- un mikrohematūrija. Ar rupju hematūriju jau var makroskopiski atzīmēt, ka urīna krāsa ir mainījusies. Tā kā urīnā ir liels skaits sarkano asins šūnu, tas kļūst sarkans vai "gaļas nogāzes krāsa". Ar mikrohematūriju eritrocīti tiek atklāti tikai ar nogulumu mikroskopiju.
Eritrocītu iekļūšana urīnā glomerulonefrīta, intoksikācijas laikā ir saistīta ar palielinātu glomerulāro kapilāru caurlaidību un to plīsumiem. Urīnceļu iekaisuma slimību gadījumā no bojātām gļotādām urīnā nokļūst iegurņa, urīnvada, urīnpūšļa akmeņi, eritrocīti. Savācot urīnu porcijās (divu un trīs stiklu paraugi) vienas urinēšanas laikā, ar lielu varbūtību ir iespējams noskaidrot, no kura urīnceļu sistēmas segmenta nāk hematūrija. Tātad ar hematūriju no urīnizvadkanāla pirmajā urīna daļā var būt asins recekļi. Ja hematūriju izraisa akūts gļotādas iekaisums, akmeņi vai cita urīnpūšļa slimība, pēdējā urīna plūsmā tiks izliets vairāk asiņu. Ar hematūriju, kas saistīta ar urīnvada bojājumu, dažkārt tiek konstatēti fibrīna ģipsi, kas pēc formas atbilst urīnvada lūmenam. Difūzās nieru slimības gadījumā hematūrija vienmērīgi krāso izdalīto urīnu.
Leikocīti. Vesela bērna urīnā tie var būt vieni redzes laukā. 5-7 leikocītu noteikšana katrā redzes laukā norāda uz iekaisuma procesu urīnceļos. Tomēr vienmēr ir jāizslēdz leikocītu iekļūšana urīnā no ārējiem dzimumorgāniem, kas notiek ar fimozi, balanītu un balanopostītu zēniem un vulvovaginītu meitenēm. Divu un trīs stiklu paraugus plaši izmanto leikocitūrijai.
cilindri. Urīnā tie var būt hialīna, granulu, epitēlija un vaska veidā. Tos visus var veidot patoloģiski apstākļi nierēs. Cilindri veselu bērnu urīnā ir reti. Bieži vien tie ir atrodami urīna nogulumu izpētes kvantitatīvajās metodēs. Parasti tie ir hialīna cilindri, kas ir olbaltumvielas, kas koagulējas kanāliņu lūmenā. Epitēlija ģipsi norāda uz nieru parenhīmas bojājumu un sastāv no pielipušām nieru kanāliņu epitēlija šūnām. Ar izteiktāku distrofisku procesu nierēs parādās granulēti un vaskveida cilindri. Tie ir cauruļveida epitēlija saplēstu šūnu lējumi, kuriem ir veikta taukainā deģenerācija. Turklāt urīna nogulumos var atrast cilindrus, kas veidoti no veidotiem elementiem, hemoglobīna, asins methemoglobīna. Šādu cilindru pamatā parasti ir olbaltumvielas, uz kurām ir uzlikti citi elementi.
Cilindroidi ir hialīna cilindriem līdzīgi veidojumi, kas sastāv no amonija urātu sāļu kristāliem, gļotām, leikocītiem, baktērijām. Cilinderoīdi tiek konstatēti akūta glomerulonefrīta atveseļošanās fāzē. No hialīna cilindriem tie atšķiras ar to struktūras neviendabīgumu.
neorganiskās nogulsnes. Neorganiskajos nogulumos bērniem biežāk sastopami urāti, oksalāti, fosfāti un urīnskābes kristāli. Pārmērīga to izdalīšanās ar urīnu var izraisīt akmeņu veidošanos urīnceļos.
Uratūrija - palielināta urīnskābes sāļu izdalīšanās ar urīnu. To novēro jaundzimušo pirmajās dzīves dienās. Ņemot vērā ievērojamo urātu daudzumu, jaundzimušo urīnam var būt ķieģeļu sarkana krāsa. Liela šūnu elementu sadalīšanās jaundzimušajiem bieži izraisa urīnskābes infarkta veidošanos, kas izzūd līdz pirmās dzīves nedēļas beigām, jo urātu sāļi tiek noņemti, palielinoties diurēzei. Uratūrija vecākiem bērniem var būt saistīta ar lielu gaļas daudzumu ēšanu, muskuļu nogurumu, drudža stāvokli. Hiperuratūriju var izraisīt iedzimta hiperurikēmija, kas ir īpaši izteikta Leša-Nīhana sindroma gadījumā.
Oksalatūrija - palielināta kalcija oksalāta izdalīšanās ar urīnu, var būt saistīta ar skābeņskābi bagātu pārtikas produktu ēšanu. Šāda veida produkti ir skābenes, spināti, tomāti, zaļie zirnīši, pupiņas, redīsi, tēja, kafija uc Oksaltūrijas cēlonis ir arī patoloģisks process bērna ķermenī, ko pavada audu sabrukšana (distrofija, tuberkuloze, diabēts, bronhektāzes). , leikēmija utt.). Oksalatūrija ir pazīstama arī kā iedzimta slimība, ko bieži sarežģī nefrolitiāze un hronisks pielonefrīts. Smagas oksalatūrijas gadījumā oksalātu saturs ikdienas urīnā ir 3-4 reizes vai vairāk lielāks par pieļaujamo vērtību (norma ir 8-10 mg%).
Fosfaturija - palielināta fosfātu sāļu izdalīšanās ar urīnu, kas izgulsnējas sārmainā urīnā. To novēro, ēdot augu izcelsmes produktus (dārzeņus, augļus u.c.), kā arī urīnceļu gļotādas iekaisuma procesa laikā, kad notiek baktēriju fermentācija un urīna sārmināšana. Fosfaturija var izraisīt urīnpūšļa akmeņu veidošanos.

Satura rādītājs [Rādīt]

Vesels cilvēks dienā izdala 1,0–1,5 litrus urīna. Olbaltumvielu saturs 8–10 mg/dl tajā ir fizioloģiska parādība. Proteīna dienas norma urīnā 100-150 mg nedrīkst radīt aizdomas. Globulīns, mukoproteīns un albumīns – no kā sastāv kopējais proteīns urīnā. Liela albumīna aizplūšana norāda uz filtrācijas procesa pārkāpumu nierēs, un to sauc par proteīnūriju vai albuminūriju.

Katrai vielai urīnā tiek piešķirta “veselīga” norma, un, ja proteīna indekss svārstās, tas var norādīt uz nieru patoloģiju.

Vispārēja urīna analīze nozīmē vai nu pirmās (rīta) porcijas lietošanu, vai arī ikdienas parauga ņemšanu. Pēdējais ir vēlams, lai novērtētu proteīnūrijas līmeni, jo olbaltumvielu saturam ir izteiktas ikdienas svārstības. Urīns dienas laikā tiek savākts vienā traukā, tiek mērīts kopējais tilpums. Laboratorijai, kas analizē urīna olbaltumvielas, pietiek ar standarta paraugu (50 līdz 100 ml) no šī konteinera, pārējais nav nepieciešams. Par iegūšanu Papildus informācija papildus tiek veikts Zimnitska tests, kas parāda, vai urīna rādītāji dienā ir normāli.

Proteīna noteikšanas metodes urīnā
Skatīt	Pasugas			Īpatnības
kvalitāti	Gellera tests			Urīna izpēte olbaltumvielu klātbūtnei
	Sulfosalicilskābes tests
	Vāra analīze
kvantitatīvi		Duļķains	Proteīns no urīna mijiedarbojas ar reaģentu, kā rezultātā samazinās tā šķīdība. Kā reaģenti tiek izmantotas sulfosicilskābes un trihloretiķskābes, benzetonija hlorīds.
		Kolorimetrisks	Ar dažām vielām urīna proteīns maina krāsu. Tas ir biureta reakcijas un Lowry metodes pamatā. Tiek izmantoti arī citi reaģenti - briljantzils, pirogalolsarkans.
daļēji kvantitatīvs			Sniedziet relatīvu priekšstatu par olbaltumvielu daudzumu, rezultāts tiek interpretēts pēc parauga krāsas maiņas. Daļēji kvantitatīvās metodes ietver testa strēmeles un Brandberg-Roberts-Stolnikov metodi.

Atpakaļ uz indeksu

Olbaltumvielu saturs urīnā ir normāls pieaugušajam nedrīkst pārsniegt 0,033 g / l. Kurā dienas likme ne augstāka par 0,05 g/l. Grūtniecēm olbaltumvielu norma ikdienas urīnā ir lielāka - 0,3 g / l, un rīta urīnā tas pats - 0,033 g / l. Olbaltumvielu normas vispārējā urīna analīzē un bērniem atšķiras: 0,036 g / l rīta porcijai un 0,06 g / l dienā. Visbiežāk laboratorijās analīzes tiek veiktas ar divām metodēm, kas parāda, cik daudz olbaltumvielu frakcijas ir urīnā. Iepriekš minētās normas ir derīgas analīzēm, kas veiktas ar sulfosalicilskābi. Ja tika izmantota pirogalola sarkanā krāsa, vērtības atšķirsies trīs reizes.

Atpakaļ uz indeksu

filtrēšana nieru glomerulos notiek nepareizā virzienā;
ir traucēta olbaltumvielu uzsūkšanās kanāliņos;
dažas slimības uzliek smagu slogu nierēm - kad proteīna līmenis asinīs ir paaugstināts, nierēm vienkārši “nav laika” to filtrēt.

Pārējie cēloņi netiek uzskatīti par nierēm. Tādā veidā attīstās funkcionālā albumīnūrija. Proteīns urīnā parādās alerģisku reakciju, epilepsijas, sirds mazspējas, leikēmijas, saindēšanās, mielomas, ķīmijterapijas un sistēmisku slimību gadījumā. Visbiežāk tieši šis rādītājs pacienta analīzēs būs pirmais hipertensijas zvans.

Proteīna palielināšanās urīnā var būt saistīta ar nepatoloģiskiem faktoriem, tāpēc būs jāveic papildu testi.

Kvantitatīvās metodes proteīna noteikšanai urīnā rada kļūdas, tāpēc ieteicams veikt vairākas analīzes un pēc tam izmantot formulu, lai aprēķinātu pareizo vērtību. Olbaltumvielu saturu urīnā mēra g/l vai mg/l. Šīs olbaltumvielu vērtības ļauj noteikt proteīnūrijas līmeni, ieteikt cēloni, novērtēt prognozi un pieņemt lēmumu par stratēģiju.

Atpakaļ uz indeksu

Lai nodrošinātu pareizu ķermeņa darbību, tas ir nepieciešams pastāvīga apmaiņa starp asinīm un audiem. Tas ir iespējams tikai tad, ja asinsvados ir noteikts osmotiskais spiediens. Asins plazmas olbaltumvielas tikai uztur tādu spiediena līmeni, kad mazmolekulārās vielas viegli pāriet no vides ar augstu to koncentrāciju uz vidi ar zemāku. Olbaltumvielu molekulu zudums izraisa asiņu izdalīšanos no tā kanāla audos, kas ir pilns ar smagu tūsku. Tā izpaužas mērena un smaga proteīnūrija.

Sākotnējās albuminūrijas stadijas ir asimptomātiskas. Pacients pievērš uzmanību tikai pamatslimības izpausmēm, kas ir olbaltumvielu cēlonis urīnā.

Proteīnūriju sauc par olbaltumvielu līmeņa paaugstināšanos urīnā noteiktu pārtikas produktu lietošanas dēļ.

Urīnu analīzei savāc tīrā, beztauku traukā. Pirms savākšanas tiek parādīta starpenes tualete, kas jānomazgā ar ziepēm. Sievietēm ieteicams segt maksts ar vates gabalu vai tamponu, lai maksts izdalījumi neietekmētu rezultātu. Priekšvakarā labāk nelietot alkoholu, minerālūdeni, kafiju, asus, sāļus un urīnam krāsu piešķirošus ēdienus (mellenes, bietes). Spēcīgas fiziskās aktivitātes, ilgas pastaigas, stress, drudzis un svīšana, pārmērīgs proteīna pārtikas vai narkotiku patēriņš pirms urinēšanas izraisa olbaltumvielu parādīšanos pilnīgi vesela cilvēka urīna analīzē. Šo pieļaujamo parādību sauc par proteīnūriju.

Atpakaļ uz indeksu

Nieru slimība, kas izraisa olbaltumvielu zudumu:

Amiloidoze. Normālās šūnas nierēs tiek aizstātas ar amiloīdiem (olbaltumvielu-saharīdu kompleksu), kas neļauj orgānam normāli darboties. Proteīnuriskajā stadijā amiloīdi tiek nogulsnēti nieru audos, iznīcinot nefronu un līdz ar to arī nieru filtru. Tādā veidā olbaltumvielas no asinīm nonāk urīnā. Šis posms var ilgt vairāk nekā 10 gadus.
diabētiskā nefropātija. Nepareizas ogļhidrātu un lipīdu metabolisma dēļ nierēs notiek asinsvadu, glomerulu un kanāliņu iznīcināšana. Olbaltumvielas urīnā ir pirmā paredzamās komplikācijas pazīme cukura diabēts.
Iekaisīgas izcelsmes slimības - nefrīts. Visbiežāk bojājumi skar asinsvadus, glomerulus un iegurņa sistēmas, izjaucot normālu filtrācijas sistēmas gaitu.
Glomerulonefrīts vairumā gadījumu ir autoimūns raksturs. Pacients sūdzas par urīna daudzuma samazināšanos, muguras sāpēm un paaugstinātu spiedienu. Glomerulonefrīta ārstēšanai ieteicama diēta, shēma un zāļu terapija.
Pielonefrīts. Akūtā periodā tas turpinās ar bakteriālas infekcijas simptomiem: drebuļiem, sliktu dūšu, galvassāpēm. Šī ir infekcijas slimība.
Policistiskā nieru slimība.

Veselā organismā olbaltumvielu molekulas (un tās ir diezgan lielas) nespēj iziet cauri nieru filtrācijas sistēmai. Tāpēc urīnā nedrīkst būt olbaltumvielu. Šis rādītājs ir vienāds gan vīriešiem, gan sievietēm. Ja analīze liecina par proteīnūriju, ir svarīgi konsultēties ar ārstu, lai noskaidrotu iemeslus. Speciālists izvērtēs, cik paaugstināts ir olbaltumvielu līmenis, vai nav blakus patoloģijas, kā atjaunot normālu organisma darbību. Saskaņā ar statistiku sievietei ir lielāks risks saslimt ar urīnceļu infekciju nekā vīrietim.

Metodes princips balstās uz olbaltumvielu koagulāciju urīnā slāpekļskābes (vai 20% sulfosicilskābes) klātbūtnē.

Progress: 1-2 pilienus slāpekļskābes (vai sulfosalicilskābes) pievieno 5 pilieniem urīna. Ja urīnā ir olbaltumvielas, parādās duļķainība.

Tabula. Urīna patoloģisko komponentu noteikšana .

Piezīme: ja testa urīnā ir glikoze un proteīns, nosaka to kvantitatīvo saturu.

Metodes princips : proteīnam mijiedarbojoties ar pirogalolsarkano un nātrija molibdātu, veidojas krāsains komplekss, kura krāsas intensitāte ir proporcionāla proteīna koncentrācijai paraugā.

Reaģenti: Darba reaģents - pirogalola sarkanais šķīdums sukcināta buferšķīdumā, proteīna kalibrēšanas šķīdums ar koncentrāciju 0,50 g/l

Progress:

Sajauc paraugus, turiet 10 minūtes. istabas temperatūrā (18-25ºС). Izmēra eksperimentālā (Dop) un kalibrēšanas parauga (Dk) optisko blīvumu pret kontroles paraugu pie λ=598 (578-610) nm. Krāsa ir stabila 1 stundu.

Aprēķins: olbaltumvielu koncentrācija urīnā (С) g/l, lai aprēķinātu pēc formulas:

С= Dop/Dk×0,50

kur: Dop \u003d Dk \u003d C \u003d g / l.

Normālās vērtības: līdz 0,094 g/l (0,141 g/dienā)

Secinājums:

Metodes princips : Kad D-glikoze tiek oksidēta ar atmosfēras skābekli glikozes oksidāzes iedarbībā, veidojas ekvimolārs ūdeņraža peroksīda daudzums. Peroksidāzes iedarbībā ūdeņraža peroksīds oksidē hromogēnos substrātus (fenola un 4 aminoantipirīna maisījumu - 4AAP), veidojot krāsainu produktu. Krāsas intensitāte ir proporcionāla glikozes saturam.

glikozes oksidāze

Glikoze + O2 + H2O glikonolaktons + H2O2

peroksidāze

2H2O2 + fenols + 4AAP krāsains savienojums + 4H2O

Progress: divās mēģenēs pievienojiet 1 ml darba šķīduma un 0,5 ml fosfāta buferšķīduma. Pirmajā mēģenē pievieno 0,02 ml urīna, otrajā mēģenē pievieno 0,02 ml kalibratora (kalibrēšana, standarta glikozes šķīdums, 10 mmol/l). Paraugus sajauc, tur 15 minūtes 370C temperatūrā termostatā un mēra eksperimentālo (Dop) un kalibrēšanas (Dc) paraugu optisko blīvumu pret darba reaģentu pie viļņa garuma 500-546 nm.

Aprēķins: С = Dop/Dk  10 mmol/l Dop= Dk =

Secinājums:

Piezīme. Ja cukura saturs urīnā pārsniedz 1%, tas ir jāatšķaida.

Pašlaik bioķīmiskās laboratorijas izmanto vienotu ekspresmetodi urīna glikozes noteikšanai, izmantojot reaktīvo papīru glikozes noteikšanai Glucotest vai kombinētās testa strēmeles pH, olbaltumvielu, glikozes, ketonvielu un asiņu noteikšanai. Testa strēmeles uz 1 sekundi tiek nolaistas traukā ar urīnu. un salīdziniet krāsu skalu.

Olbaltumvielu noteikšana, izmantojot pirogalola sarkano indikatoru

Metodes princips ir balstīts uz optiskā blīvuma fotometrisku mērījumu krāsainā kompleksa šķīdumam, kas veidojas proteīnu molekulām mijiedarbojoties ar Pyrogallol Red-Molybdate kompleksa krāsvielu kompleksa molekulām skābā vidē. Šķīduma krāsas intensitāte ir proporcionāla proteīna saturam testa materiālā. Mazgāšanas līdzekļu klātbūtne reaģentā nodrošina līdzvērtīgu dažāda rakstura un struktūras proteīnu noteikšanu.

Reaģenti. 1) 1,5 mmol/l pirogalolsarkanā (PGD) šķīdums: 60 mg PGA izšķīdina 100 ml metanola. Uzglabāt 0–5 °C temperatūrā; 2) 50 mmol/l sukcināta buferšķīdums pH 2,5: 5,9 g dzintarskābes (HOOC-CH2-CH2-COOH); 0,14 g nātrija oksalāta (Na2C2O4) un 0,5 g nātrija benzoāta (C6H5COONa) izšķīdina 900 ml destilēta ūdens; 3) 10 mmol/l nātrija molibdāta kristālhidrāta šķīdums (Na2MoO4 × 2H2O): 240 mg nātrija molibdāta izšķīdina 100 ml destilēta ūdens; 4) Darba reaģents: 40 ml PGA šķīduma un 4 ml nātrija molibdāta šķīduma pievieno 900 ml sukcināta buferšķīduma. Šķīduma pH tiek noregulēts uz 2,5 ar 0,1 mol/l sālsskābes (HCl) šķīdumu, un tilpumu noregulē līdz 1 litram. Reaģents šādā formā ir gatavs lietošanai un ir stabils, uzglabājot no gaismas aizsargātā vietā 2–25 °C temperatūrā 6 mēnešus; 5) 0,5 g/l albumīna standartšķīdums.

Definīcijas progress. Pirmajā mēģenē pievieno 0,05 ml testa urīna, otrajā mēģenē pievieno 0,05 ml albumīna standartšķīduma un trešajā mēģenē (kontrolparaugs) pievieno 0,05 ml destilēta ūdens, pēc tam 3 ml darba mēģenē. šīm mēģenēm pievieno reaģentu. Cauruļu saturu sajauc un pēc 10 minūtēm paraugu un standartu fotometrē pret kontroles paraugu pie viļņa garuma 596 nm kivetē ar optiskā ceļa garumu 10 mm.

Proteīna koncentrācijas aprēķinu testa urīna paraugā veic pēc formulas:

kur C ir proteīna koncentrācija testa urīna paraugā, g/l; Apr un Ast - pētāmā urīna parauga un albumīna standartšķīduma ekstincija, g/l; 0,5 - albumīna standartšķīduma koncentrācija, g/l.

Piezīmes:

šķīduma krāsa (krāsu komplekss) ir stabila vienu stundu;
tieši proporcionālā attiecība starp proteīna koncentrāciju analizējamā paraugā un šķīduma absorbciju ir atkarīga no fotometra veida;
ja olbaltumvielu saturs urīnā ir virs 3 g/l, paraugu atšķaida ar izotonisku nātrija hlorīda šķīdumu (9 g/l) un noteikšanu atkārto. Nosakot olbaltumvielu koncentrāciju, ņem vērā atšķaidījuma pakāpi.

Skatīt arī:

Olbaltumvielu noteikšana urīnā
Standartizēts tests ar sulfosalicilskābi
Vienotā Brandberga–Roberta–Stoļņikova metode
Olbaltumvielu daudzuma noteikšana urīnā, reaģējot ar sulfosalicilskābi
Biureta metode
Bence-Jones proteīna noteikšana urīnā

Proteīnūrija ir parādība, kurā urīnā tiek noteikts proteīns, kas norāda uz nieru bojājumu iespējamību, kalpo kā faktors sirds, asins un limfātisko asinsvadu slimību attīstībā.

Olbaltumvielu noteikšana urīnā ne vienmēr norāda uz slimību. Šī parādība ir raksturīga pat absolūti veseliem cilvēkiem, kura urīnā var noteikt proteīnu. Hipotermija, fiziskās aktivitātes, olbaltumvielu pārtikas lietošana izraisa olbaltumvielu parādīšanos urīnā, kas pazūd bez jebkādas ārstēšanas.

Skrīninga laikā proteīns tiek atklāts 17% šķietami veselu cilvēku, bet tikai 2% no šī cilvēku skaita pozitīvs testa rezultāts liecina par nieru slimību.

Olbaltumvielu molekulas nedrīkst iekļūt asinīs. Tie ir vitāli svarīgi ķermenim celtniecības materiālsšūnām piedalīties reakcijās kā koenzīmi, hormoni, antivielas. Gan vīriešiem, gan sievietēm norma ir pilnīgs olbaltumvielu trūkums urīnā.

Funkciju neļaut organismam zaudēt olbaltumvielu molekulas veic nieres.

Ir divas nieru sistēmas, kas filtrē urīnu:

nieru glomerulos - nelaiž cauri lielas molekulas, bet nesaglabā albumīnus, globulīnus - nelielu olbaltumvielu molekulu daļu;
nieru kanāliņi - adsorbē glomerulos filtrētos proteīnus, atgriežas asinsrites sistēmā.

Albumīni (apmēram 49%), mukoproteīni, globulīni ir atrodami urīnā, no kuriem imūnglobulīni veido aptuveni 20%.

Globulīni ir augstas molekulmasas sūkalu proteīni, ko ražo imūnsistēma un aknas. Lielāko daļu no tiem sintezē imūnsistēma, attiecas uz imūnglobulīniem vai antivielām.

Albumīni ir tā olbaltumvielu daļa, kas urīnā parādās pirmās, jau ar nelieliem nieru bojājumiem. Noteikts albumīna daudzums ir arī veselā urīnā, taču tas ir tik nenozīmīgs, ka to nenosaka, izmantojot laboratorijas diagnostika.

Apakšējais slieksnis, ko var noteikt, izmantojot laboratorijas diagnostiku, ir 0,033 g / l. Ja dienā tiek zaudēts vairāk nekā 150 mg olbaltumvielu, tad viņi runā par proteīnūriju.

Galvenie fakti par olbaltumvielām urīnā

Slimība ar vieglu proteīnūrijas pakāpi ir asimptomātiska. Vizuāli urīnu, kas nesatur proteīnu, nevar atšķirt no urīna, kas satur nelielu daudzumu olbaltumvielu. Nedaudz putojošs urīns kļūst jau plkst augsta pakāpe proteīnūrija.

Var pieņemt, ka proteīns tiek izvadīts ar urīnu, tikai pēc pacienta parādīšanās ar mērenu vai smagu slimības pakāpi, parādoties ekstremitāšu, sejas un vēdera tūskai.

Uz agrīnās stadijas slimības netiešās proteīnūrijas pazīmes var kalpot kā simptomi:

urīna krāsas izmaiņas;
pieaugošs vājums;
apetītes trūkums;
slikta dūša, vemšana;
kaulu sāpes;
miegainība, reibonis;
paaugstināta temperatūra.

Šādu pazīmju parādīšanos nevajadzētu ignorēt, īpaši grūtniecības laikā. Tas var nozīmēt nelielu novirzi no normas un var būt preeklampsijas, preeklampsijas attīstības simptoms.

Proteīna zuduma kvantitatīva noteikšana nav viegls uzdevums, tiek izmantoti vairāki laboratorijas testi, lai iegūtu pilnīgāku priekšstatu par pacienta stāvokli.

Grūtības, izvēloties metodi liekā proteīna noteikšanai urīnā, ir izskaidrojamas ar:

zema olbaltumvielu koncentrācija, kuras atpazīšanai nepieciešami augstas precizitātes instrumenti;
urīna sastāvs, kas sarežģī uzdevumu, jo satur vielas, kas izkropļo rezultātu.

Vislielāko informāciju var iegūt, analizējot pirmo rīta urīna porciju, kas tiek savākta pēc pamošanās.

Analīzes priekšvakarā ir jāievēro šādi nosacījumi:

nelietojiet asu, ceptu, olbaltumvielu pārtiku, alkoholu;
izvairieties no diurētisko līdzekļu lietošanas 48 stundas;
ierobežot fiziskās aktivitātes;
rūpīgi ievērojiet personīgās higiēnas noteikumus.

Rīta urīns ir visinformatīvākais, jo tas ilgstoši paliek urīnpūslī un mazākā mērā ir atkarīgs no uzņemtā ēdiena.

Proteīna daudzumu urīnā ir iespējams analizēt ar nejaušu porciju, kas tiek ņemta jebkurā laikā, taču šāda analīze ir mazāk informatīva, un kļūdas iespējamība ir lielāka.

Lai noteiktu ikdienas olbaltumvielu zudumu, tiek veikta kopējā ikdienas urīna analīze. Lai to izdarītu, 24 stundu laikā viss dienas laikā izdalītais urīns tiek savākts īpašā plastmasas traukā. Jūs varat sākt vākt jebkurā laikā. Galvenais nosacījums ir tieši viena savākšanas diena.

Proteīnūrijas kvalitatīvā definīcija balstās uz proteīna īpašību denaturēties fizikālu vai ķīmisku faktoru ietekmē. Kvalitatīvas metodes ir skrīninga metodes, kas ļauj noteikt olbaltumvielu klātbūtni urīnā, bet neļauj precīzi novērtēt proteīnūrijas pakāpi.

Izmantotie paraugi:

ar vārīšanu;
sulfosalicilskābe;
slāpekļskābe, Larionovas reaģents ar Hellera gredzena testu.

Testu ar sulfosalicilskābi veic, salīdzinot kontroles urīna paraugu ar eksperimentālo, kurā urīnam pievieno 7-8 pilienus 20% sulfosicilskābes. Secinājumu par proteīna klātbūtni izdara opalescējošā duļķainuma intensitāte, kas reakcijas laikā parādās mēģenē.

Biežāk Gellera testu izmanto, izmantojot 50% slāpekļskābi. Metodes jutība ir 0,033 g/l. Pie šādas proteīna koncentrācijas mēģenē ar urīna paraugu un reaģentu 2-3 minūtes pēc eksperimenta sākuma parādās pavedienam līdzīgs gredzens. balta krāsa, kuras veidošanās liecina par proteīna klātbūtni.

Gellera tests

Daļēji kvantitatīvās metodes ietver:

metode olbaltumvielu noteikšanai urīnā ar testa strēmelēm;
Brandberga-Roberta-Stoļņikova metode.

Brandberga-Roberta-Stoļņikova noteikšanas metode ir balstīta uz Gellera gredzena metodi, bet ļauj precīzāk novērtēt olbaltumvielu daudzumu. Veicot testu saskaņā ar šo metodi, vairāki urīna atšķaidījumi nodrošina pavedienveida proteīna gredzena parādīšanos laika intervālā starp 2-3 minūtēm no testēšanas sākuma.

Praksē tiek izmantota testa strēmeļu metode ar uzklātu krāsvielu bromfenolzilu kā indikatoru. Teststrēmeles trūkums ir selektīva jutība pret albumīnu, kas izraisa rezultāta izkropļojumus, ja urīnā palielinās globulīnu vai citu olbaltumvielu koncentrācija.

Metodes trūkumi ietver arī salīdzinoši zemo testa jutību pret olbaltumvielām. Testa strēmeles sāk reaģēt uz olbaltumvielu klātbūtni urīnā, ja olbaltumvielu koncentrācija pārsniedz 0,15 g / l.

Kvantitatīvās noteikšanas metodes nosacīti var iedalīt:

duļķains;
kolorimetrisks.

Metodes ir balstītas uz proteīnu īpašību samazināt šķīdību saistvielas iedarbībā, veidojot slikti šķīstošu savienojumu.

Olbaltumvielu saistvielas var būt:

sulfosalicilskābe;
trihloretiķskābe;
benzetonija hlorīds.

Pārbaužu rezultāti tiek secināti, pamatojoties uz gaismas plūsmas vājināšanās pakāpi suspensijas paraugā salīdzinājumā ar kontroli. Šīs metodes rezultātus ne vienmēr var attiecināt uz uzticamiem, jo atšķiras izpildes nosacījumi: reaģentu sajaukšanas ātrums, temperatūra, barotnes skābums.

Ietekmēt zāļu lietošanas novērtējumu iepriekšējā dienā, pirms testu veikšanas, izmantojot šīs metodes, jūs nevarat lietot:

antibiotikas;
sulfonamīdi;
joda preparāti.

Metode ir pieejama par pieņemamu cenu, kas ļauj to plaši izmantot skrīningam. Bet precīzākus rezultātus var iegūt, izmantojot dārgākas kolorimetriskas metodes.

Kolorimetriskās metodes ir viena no jutīgajām metodēm, lai precīzi noteiktu olbaltumvielu koncentrāciju urīnā.

Lai to izdarītu ar augstu precizitāti, ļaujiet:

biureta reakcija;
Lourija tehnika;
krāsošanas metodes, kurās izmanto krāsvielas, kas veido kompleksus ar urīna proteīniem, kas vizuāli atšķiras no parauga.

Kolorimetriskās metodes olbaltumvielu noteikšanai urīnā

Metode ir uzticama, ļoti jutīga, ļauj noteikt albumīnu, globulīnus, paraproteīnus urīnā. To izmanto kā galveno veidu, lai noskaidrotu strīdīgos testu rezultātus, kā arī ikdienas olbaltumvielas urīnā pacientiem ar slimnīcu nefroloģijas nodaļām.

Vēl precīzākus rezultātus var sasniegt ar Lowry metodi, kuras pamatā ir biureta reakcija, kā arī ar Folina reakciju, kas atpazīst triptofānu un tirozīnu olbaltumvielu molekulās.

Lai novērstu iespējamās kļūdas, urīna paraugu attīra ar dialīzi no aminoskābēm, urīnskābes. Lietojot salicilātus, tetraciklīnus, hlorpromazīnu, ir iespējamas kļūdas.

Visprecīzākais proteīna noteikšanas veids ir balstīts uz tā spēju saistīties ar krāsvielām, no kurām izmanto:

ponceau;
coumasi izcili zils;
pirogāls sarkans.

Dienas laikā mainās olbaltumvielu daudzums, kas izdalās ar urīnu. Lai objektīvāk novērtētu olbaltumvielu zudumu urīnā, tiek ieviests ikdienas olbaltumvielu jēdziens urīnā. Šo vērtību mēra g/dienā.

Lai ātri novērtētu ikdienas olbaltumvielu daudzumu urīnā, olbaltumvielu un kreatinīna daudzums tiek noteikts vienā urīna porcijā, pēc tam tiek izmantota proteīna/kreatinīna attiecība, lai izdarītu secinājumu par olbaltumvielu zudumu dienā.

Metodes pamatā ir fakts, ka kreatinīna izdalīšanās ātrums ar urīnu ir nemainīgs, dienas laikā nemainās. Veselam cilvēkam normālā olbaltumvielu un kreatinīna attiecība urīnā ir 0,2.

Šī metode novērš iespējamās kļūdas, kas var rasties, savācot ikdienas urīnu.

Kvalitatīvie paraugi biežāk nekā kvantitatīvie testi dod viltus pozitīvus vai viltus negatīvus rezultātus. Kļūdas rodas saistībā ar medikamentu lietošanu, ēšanas paradumiem, fiziskām aktivitātēm pārbaudes priekšvakarā.

Šī kvalitatīvā testa interpretācija tiek sniegta, vizuāli novērtējot duļķainību mēģenē, salīdzinot testa rezultātu ar kontroli:

vāji pozitīva reakcija tiek novērtēta kā +;
pozitīvs ++;
asi pozitīvi +++.

Hellera gredzena tests ir precīzāks, lai novērtētu olbaltumvielu klātbūtni urīnā, bet nenosaka olbaltumvielu daudzumu urīnā. Tāpat kā sulfosalicilskābes tests, arī Hellera tests sniedz tikai aptuvenu priekšstatu par olbaltumvielu daudzumu urīnā.

Metode ļauj kvantitatīvi noteikt proteīnūrijas pakāpi, taču tā ir pārāk darbietilpīga, neprecīza, jo ar spēcīgu atšķaidījumu novērtējuma precizitāte samazinās.

Lai aprēķinātu proteīnu, urīna atšķaidīšanas pakāpe jāreizina ar 0,033 g / l:

1	1	1: 2	0,066
1	2	1: 3	0,099
1	3	1: 4	0,132
1	4	1: 5	0,165
1	5	1: 6	0,198
1	6	1: 7	0,231
1	7	1: 8	0,264
1	8	1: 9	0,297
1	9	1: 10	0,33

Pārbaudei nav nepieciešami īpaši nosacījumi, šo procedūru ir viegli veikt mājās. Lai to izdarītu, teststrēmele 2 minūtes jānolaiž urīnā.

Rezultāti tiks izteikti ar plusu skaitu uz sloksnes, kuru dekodēšana ir ietverta tabulā:

Testa rezultāti, kas atbilst vērtībām līdz 30 mg/100 ml, atbilst fizioloģiskajai proteīnūrijai.
Teststrēmeles vērtības 1+ un 2++ norāda uz nozīmīgu proteīnūriju.
Vērtības 3+++, 4++++ tiek novērotas patoloģiskajā proteīnūrijā, ko izraisa nieru slimība.

Teststrēmeles var tikai aptuveni noteikt palielināto olbaltumvielu daudzumu urīnā. Tos neizmanto precīzai diagnostikai, un vēl jo vairāk viņi nevar pateikt, ko tas nozīmē.

Neļaujiet testa strēmelēm adekvāti novērtēt olbaltumvielu daudzumu grūtnieču urīnā. Drošāka novērtēšanas metode ir olbaltumvielu noteikšana ikdienas urīnā.

Olbaltumvielu noteikšana urīnā, izmantojot testa strēmeli:

Ikdienas olbaltumvielas urīnā kalpo vairāk precīza diagnoze nieru funkcionālā stāvokļa novērtējums. Lai to izdarītu, dienā jāsavāc viss urīns, kas izdalās caur nierēm.

Pieņemamās olbaltumvielu / kreatinīna attiecības vērtības ir tabulā norādītie dati:

Ja jūs zaudējat vairāk nekā 3,5 g olbaltumvielu dienā, stāvokli sauc par masīvu proteīnūriju.

Ja urīnā ir daudz olbaltumvielu, pēc 1 mēneša ir jāveic otrs izmeklējums, tad pēc 3 mēnešiem, pēc kura rezultātiem tiek konstatēts, kāpēc tiek pārsniegta norma.

Cēloņi paaugstināts proteīna līmenis urīnā ir tā palielināta ražošana organismā un nieru darbības traucējumi, izšķir proteīnūriju:

fizioloģiska - tiek radītas nelielas novirzes no normas fizioloģiskie procesi, atrisināt spontāni;
patoloģiska - izmaiņas rodas patoloģiska procesa rezultātā nierēs vai citos ķermeņa orgānos, progresē bez ārstēšanas.

Nelielu olbaltumvielu pieaugumu var novērot ar bagātīgu olbaltumvielu uzturu, mehāniskiem apdegumiem, ievainojumiem, ko papildina imūnglobulīnu ražošanas palielināšanās.

Vieglas pakāpes proteīnūriju var izraisīt fiziskas aktivitātes, psihoemocionāls stress un noteiktu medikamentu lietošana.

Fizioloģiskā proteīnūrija attiecas uz olbaltumvielu palielināšanos urīnā bērniem pirmajās dienās pēc dzimšanas. Bet jau pēc dzīves nedēļas proteīna saturs bērna urīnā tiek uzskatīts par novirzi no normas un norāda uz patoloģijas attīstību.

Nieru slimības, infekcijas slimības dažreiz pavada arī olbaltumvielu parādīšanās urīnā.

Šādi stāvokļi parasti atbilst vieglai proteīnūrijas pakāpei, ir pārejošas parādības, ātri izzūd paši, neprasot īpašu ārstēšanu.

Smagāki stāvokļi, smaga proteīnūrija tiek novērota šādos gadījumos:

glomerulonefrīts;
cukura diabēts
sirds slimība;
urīnpūšļa vēzis;
multiplā mieloma;
infekcija, zāļu izraisīts ievainojums, policistiska nieru slimība;
augsts asinsspiediens;
sistēmiskā sarkanā vilkēde;
Goodpasture sindroms.

Zarnu aizsprostojums, sirds mazspēja, hipertireoze var izraisīt olbaltumvielu pēdas urīnā.

Proteīnūrijas šķirnes tiek klasificētas vairākos veidos. Olbaltumvielu kvalitatīvam novērtējumam varat izmantot Jaroševska klasifikāciju.

Saskaņā ar Jaroševska sistemātiku, kas izveidota 1971. gadā, tiek izdalīta proteīnūrija:

nieres - kas ietver glomerulārās filtrācijas pārkāpumu, cauruļveida proteīna izdalīšanos, nepietiekamu olbaltumvielu resorbciju kanāliņos;
prerenāls - notiek ārpus nierēm, izdalās hemoglobīns, olbaltumvielas, kas rodas pārpalikumā asinīs multiplās mielomas rezultātā;
postrenāls - rodas urīnceļu rajonā pēc nierēm, olbaltumvielu izdalīšanās urīnceļu orgānu iznīcināšanas laikā.

Lai kvantitatīvi noteiktu notiekošo, proteīnūrijas pakāpe ir nosacīti izolēta. Jāatceras, ka bez ārstēšanas tie var viegli kļūt smagāki.

Smagākā proteīnūrijas stadija attīstās, kad dienā tiek zaudēts vairāk nekā 3 g olbaltumvielu. Olbaltumvielu zudums no 30 mg līdz 300 mg dienā atbilst mērenai stadijai jeb mikroalbumnūrijai. Līdz 30 mg olbaltumvielu ikdienas urīnā nozīmē viegla pakāpe proteīnūrija.

Cik daudz olbaltumvielu urīnā?

Parasti urīnā praktiski nav olbaltumvielu (mazāk par 0,002 g / l). Tomēr noteiktos apstākļos neliels daudzums olbaltumvielas var parādīties urīnā veseliem indivīdiem pēc liela daudzuma proteīna pārtikas uzņemšanas atdzišanas, emocionāla stresa, ilgstošas fiziskās aktivitātes (tā sauktā soļojošā proteīnūrija) rezultātā.
Ievērojama daudzuma olbaltumvielu parādīšanās urīnā (proteīnūrija) ir patoloģija. Proteīnūriju var izraisīt nieru (akūts un hronisks glomerulonefrīts, pielonefrīts, grūtniecības nefropātija u.c.) vai urīnceļu (pūšļa, prostatas, urīnvadu iekaisums) slimības. Nieru proteīnūrija var būt organiska (glomerulāra, tubulāra un pārmērīga) un funkcionāla (drudža proteīnūrija, ortostatiska pusaudžiem ar pārmērīgu barošanu). zīdaiņiem, jaundzimušajiem). Funkcionālā proteīnūrija nav saistīta ar nieru patoloģiju. Dienas olbaltumvielu daudzums pacientiem svārstās no 0,1 līdz 3,0 g vai vairāk. Urīna olbaltumvielu sastāvu nosaka ar elektroforēzi. Bence-Jones proteīna parādīšanās urīnā ir raksturīga multiplās mielomas un Valdenstrēma makroglobulinēmijai, #223;2 mikroglobulīns nieru kanāliņu bojājumu gadījumā.
Parasti urīnā praktiski nav olbaltumvielu (mazāk par 0,002 g/l).
Galvenās slimības pazīmes, kas konstatētas urīna izpētē.
SG Īpatnējais svars. Īpatnējā smaguma samazināšanās norāda uz nieru spējas samazināšanos koncentrēt urīnu un izvadīt toksīnus no organisma, kas notiek ar nieru mazspēju. Īpatnējā smaguma palielināšanās ir saistīta ar liels daudzums urīnā cukura, sāļu. Jāpiebilst, ka novērtējums īpaša gravitāte nav iespējams veikt tikai vienu urīna testu, var būt nejaušas izmaiņas, nepieciešams atkārtot urīna analīzi 1-2 reizes.

Proteīns Proteīns urīnā - proteīnūrija. Proteīnūrijas cēlonis var būt pašu nieru bojājums ar nefrītu, amiloidozi, indēm. Olbaltumvielas urīnā var parādīties arī urīnceļu slimību dēļ (pielonefrīts, cistīts, prostatīts).

Glikoze Glikoze (cukurs) urīnā – glikozūrija – visbiežāk izraisa diabētu. Retāks iemesls ir nieru kanāliņu bojājumi. Tas ir ļoti satraucoši, ja ketonu ķermeņi tiek noteikti kopā ar cukuru urīnā. Tas notiek smaga, nepareizi regulēta cukura diabēta gadījumā un ir visnopietnākās diabēta komplikācijas – diabētiskās komas – priekšvēstnesis.

Bilirubīns, urobilinogēns Bilirubīns un urobilīns tiek noteikts urīnā dažādu dzeltes formu gadījumā.

Eritrocīti Eritrocīti urīnā - hematūrija. Tas notiek vai nu ar pašu nieru bojājumiem, visbiežāk ar to iekaisumu, vai arī pacientiem ar urīnceļu slimībām. Ja, piemēram, pa tiem pārvietojas akmens, tas var traumēt gļotādu, urīnā būs sarkanās asins šūnas. Sairstošs nieru audzējs var izraisīt arī hematūriju.

Leikocīti Leikocīti urīnā - leikocitūrija, visbiežāk urīnceļu iekaisuma izmaiņu sekas pacientiem ar pielonefrītu, cistītu. Leikocītus bieži nosaka ar sieviešu ārējo dzimumorgānu iekaisumu, vīriešiem - ar prostatas dziedzera iekaisumu.

Cilindri Cilindri ir savdabīgi mikroskopiski veidojumi. Hialīna cilindri 1-2 daudzumā var būt veselam cilvēkam. Tie veidojas nieru kanāliņos, tās ir proteīna daļiņas, kas salīmētas kopā. Bet to skaita palielināšanās, cita veida cilindri (granulēti, eritrocīti, tauki) vienmēr norāda uz pašu nieru audu bojājumiem. Ir cilindri nieru iekaisuma slimībās, vielmaiņas bojājumos, piemēram, cukura diabēta gadījumā.

Metodes informativitāte un tās robežas. informatīvs vispārīga analīze urīnā, lai noteiktu specifiskas nieru slimības, ir maz, parasti ir nepieciešami papildu, precīzāki pētījumi. Bet šis pētījums ir ļoti svarīgs, jo īpaši veicot profilaktiskus pētījumus, jo tas ļauj identificēt agrīnas pazīmes nieru slimības. Zināms arī tas, ka nereti nieru slimības tiek slēptas, un tikai urīna analīze ļauj par tām aizdomāties un veikt turpmākos nepieciešamos izmeklējumus.
Lielākajā daļā laboratoriju, pārbaudot urīnā olbaltumvielas, vispirms tiek izmantotas kvalitatīvas reakcijas, kas nekonstatē olbaltumvielas veselīga cilvēka urīnā. Ja olbaltumvielas urīnā nosaka ar kvalitatīvām reakcijām, veic kvantitatīvu (vai daļēji kvantitatīvu) noteikšanu. Tajā pašā laikā svarīgas ir izmantoto metožu iezīmes, kas aptver dažādu uroproteīnu spektru. Tādējādi, nosakot proteīnu, izmantojot 3% sulfosalicilskābi, olbaltumvielu daudzums līdz 0,03 g/l tiek uzskatīts par normālu, savukārt, izmantojot pirogalola metodi, normālu olbaltumvielu vērtību robeža paaugstinās līdz 0,1 g/l. Šajā sakarā analīzes veidlapā ir jānorāda normālā vērtība olbaltumvielas laboratorijas izmantotajai metodei.
Nosakot minimālo olbaltumvielu daudzumu, ieteicams atkārtot analīzi, šaubīgos gadījumos jānosaka ikdienas olbaltumvielu zudums urīnā. Normāls ikdienas urīns satur proteīnu nelielos daudzumos. Fizioloģiskos apstākļos filtrēto proteīnu gandrīz pilnībā uzsūc proksimālo kanāliņu epitēlijs, un tā saturs ikdienas urīna daudzumā atkarībā no dažādiem autoriem atšķiras no pēdām līdz 20-50, 80-100 mg un pat līdz 150-200. mg. Daži autori uzskata, ka ikdienas olbaltumvielu izvadīšana 30-50 mg/dienā ir pieauguša cilvēka fizioloģiska norma. Citi norāda, ka olbaltumvielu izdalīšanās ar urīnu nedrīkst pārsniegt 60 mg/m2 ķermeņa virsmas dienā, izņemot pirmo dzīves mēnesi, kad fizioloģiskā proteīnūrija var būt četras reizes lielāka par norādīto vērtību.

Vispārējais nosacījums olbaltumvielu parādīšanās veselīga cilvēka urīnā ir to pietiekami augsta koncentrācija asinīs un molekulmasa ne vairāk kā 100-200 kDa.
tā nav norma, ar tavu diagnozi tas ir iespējams, cita lieta, ka nefrotiskajam sindromam tas īstenībā ir mazs rādītājs.. paskaties klīnikā - pietūkums, spiediens utt turpini lietot nozīmēto ārstēšanu.
un tomēr es teikšu: tas NEDRĪKST būt normāli!

Instrukcija

Kvalitatīvas metodes proteīna noteikšanai urīns: Helera metode, 20% sulfosalicilskābes tests, viršanas tests utt. Puskvantitatīvās metodes: diagnostikas testa strēmeļu izmantošana olbaltumvielu noteikšanai urīns, Brandberga-Roberta-Stoļņikova metode. Kvantitatīvās metodes: turbidimetriskā un kolorimetriskā.

Olbaltumvielu noteikšana ikdienā urīns koncentrācijā 0,033 g/litrā vai vairāk ir patoloģija. Parasti rīta urīna daļā olbaltumvielu koncentrācija nepārsniedz 0,002 g / l un dienā. urīns olbaltumvielu koncentrācija nav lielāka par 50-150 mg proteīna.

Avoti:

olbaltumvielu noteikšana urīnā

Urīns ir cilvēka metabolisma produkts. Tas veidojas asiņu filtrācijas laikā nierēs, tāpēc urīna sastāvs sniedz skaidru aprakstu par cilvēka ķermeņa stāvokli.

Urīns ir vairāk nekā 150 savienojumu komplekss šķīdums. Dažas specifiskas vielas, piemēram, acetons, žultsskābes, olbaltumvielas, glikoze, var būt tikai noteiktām slimībām.

Lai kontrolētu cilvēka veselību, pirmkārt, ir jānosaka urīna daudzums. Norma ir 1-1,8 litru urīna veidošanās dienā. Ja izdalās vairāk nekā 2 litri urīna, tā ir zīme iespējamais pārkāpums nieru darbā, diabēts un vairākas citas slimības. Ja dienā veidojas mazāk par 0,5 litriem urīna, ir urīnvada vai urīnpūšļa nosprostojums.

urīna krāsa

Izdalītā urīna krāsa ir atkarīga no daudziem faktoriem, tāpēc tā var atšķirties no gaiši dzeltenas līdz oranžai. Atsevišķu toņu klātbūtni var ietekmēt atsevišķi pārtikas produkti, kā arī cilvēka lietotie medikamenti.

Pēc medikamentu lietošanas urīns var iekrāsoties un iegūt sarkanīgu nokrāsu. Ja cilvēks aktīvi kustas, kamēr viņš izdala lielu daudzumu sviedru, urīns būs intensīvs dzeltens, kā arī lietojot līdzekļus, piemēram, Nitroxoline vai Biomycin.

Ja cilvēks nav lietojis krāsojošus pārtikas produktus un medikamentus, bet viņa urīna krāsa atšķiras no ierastās, var būt aizdomas par kādas slimības klātbūtni organismā. Piemēram, aknu slimību gadījumā urīnam būs tumši dzeltena vai zaļgana krāsa.

Asins klātbūtne izdalītajā urīnā skaidri norāda uz akmeņu klātbūtni vai nieru asiņošanu, ja tiek novērotas arī sāpes.

Ja urinēšana ir apgrūtināta, tas var norādīt uz iekaisuma procesu, ko izraisa urīnpūšļa infekcija. Bet netīrs un duļķains urīns norāda nopietnas slimības nieres.

Olbaltumvielas urīnā

Cilvēka asinīs nav olbaltumvielu vai arī to daudzums ir tik mazs, ka to nevar noteikt ar laboratorijas testiem. Ja urīnā tiek konstatēts proteīns, ir jāveic atkārtotas pārbaudes, jo tas var būt, kad cilvēks pamostas no rīta, kā arī pēc smaga fiziska darba vai sportistiem.

Vizuāli noteikt, vai urīnā ir vai nav olbaltumvielu, ir 100% neiespējami. Var tikai minēt, kad urīnā ir liels daudzums bālganu pārslu.

Ja olbaltumvielas urīnā tiek konstatētas atkārtoti, tas norāda uz kāda veida nieru slimību. Iekaisuma procesi kas tajos rodas, provocē nelielu olbaltumvielu daudzuma palielināšanos. Ja ar urīnu izdalās vairāk nekā 2 grami, tas ir trauksmes signāls.

Pielonefrīts ir iekaisuma slimība, kas ietekmē nieru iegurni, kausiņus un parenhīmu. Vairumā gadījumu iekaisumu izraisa bakteriāla infekcija. Pilnīga atveseļošanās iespējama tikai ar savlaicīgu diagnostiku, tādēļ, parādoties simptomiem, nepieciešama rūpīga izmeklēšana.

Normāli rādītāji: olbaltumvielas urīnā parasti atrod minimālos daudzumos, ko nevar noteikt ar parastajām kvalitatīvajām reakcijām. Proteīna normas augšējā robeža urīnā ir 0,033 g / l. Ja olbaltumvielu saturs ir lielāks par šo vērtību, tad proteīna kvalitatīvie testi kļūst pozitīvi.

Definīcijas klīniskā nozīme:

Olbaltumvielu parādīšanos urīnā sauc par proteīnūriju. Proteīnūrija var būt viltus un nieru. Ārpusnieru proteīnūrija var būt olbaltumvielu izcelsmes piemaisījumu klātbūtnē no dzimumorgāniem (vaginīts, uretrīts utt.), savukārt olbaltumvielu daudzums ir nenozīmīgs - līdz 0,01 g / l. Nieru proteīnūrija var būt funkcionāla (ar hipotermiju, fizisku slodzi, drudzi) un organiska - ar glomerulonefrītu, pielonefrītu, nefrītu, nefrozi, nieru mazspēju. Ar nieru proteīnūriju olbaltumvielu saturs var būt no 0,033 līdz 10 - 15 g / l, dažreiz lielāks.

kvalitātes definīcija.

Metodes princips: pamatojoties uz to, ka proteīns neorganisko skābju iedarbībā koagulējas (kļūst redzams). Duļķainības pakāpe ir atkarīga no olbaltumvielu daudzuma.

Olbaltumvielu noteikšana urīnā ar 20% sulfosalicilskābi.

Reaģenti: 20% sulfosalicilskābes šķīdums. Aprīkojums: tumšs fons.

Pētījuma progress:

2. Ielejiet 2 ml sagatavotā urīna 2 vienāda diametra mēģenēs. 1 caurule - kontrole, 2 - eksperiments. Mēģenē pievieno 4 pilienus 20% sulfosalicilskābes.

3. Rezultāts tiek atzīmēts uz tumša fona.

4. Olbaltumvielu klātbūtnē urīns mēģenē kļūst duļķains.

Olbaltumvielu kvalitatīva noteikšana urīna testā - strēmeles.

Proteīnūrijas noteikšanai tiek izmantoti dažādi monotesti - sloksnes: Albufan, Albustiks, Biofan E un politesti: Triscan, Nonafan utt.

Kvantitatīvā noteikšana.

Olbaltumvielu noteikšana urīnā ar Robertsa-Stolņikova metodi.

Metodes princips: pamatojoties uz to, ka proteīns neorganisko skābju iedarbībā koagulējas (kļūst redzams). Duļķainības pakāpe ir atkarīga no olbaltumvielu daudzuma (t.i., Helera gredzena tests). Ja olbaltumvielu koncentrācija urīnā ir 0,033 g/l, 3 minūšu beigās pēc urīna noslāņošanās parādās plāns, pavedienveida balts gredzens.

Reaģenti: 50% slāpekļskābes šķīdums vai Robertsa reaģents (98 daļas piesātināta šķīduma galda sāls un 2 daļas koncentrētas sālsskābes) vai Larionovas reaģentu (98 daļas piesātināta galda sāls šķīduma un 2 daļas koncentrētas slāpekļskābes).

Aprīkojums: tumšs fons.

Pētījuma progress:

1. Prasības urīnam: urīnam jābūt skābam (vai nedaudz skābam) pH, jābūt caurspīdīgam, šim urīnam centrifugē. Sārmains urīns tiek paskābināts līdz viegli skābai barotnes reakcijai, kontrolei izmantojot indikatorpapīru.

2. Ielejiet mēģenē 2 ml 50% slāpekļskābes šķīduma vai kādu no reaģentiem, pēc tam ar pipeti uzmanīgi noslāņojiet tādu pašu sagatavotā urīna daudzumu gar mēģenes sieniņu.

3. Paraugu atstāj uz 3 minūtēm

4. Pēc 3 minūtēm ziņojiet par rezultātu. Rezultāts tiek atzīmēts uz tumša fona caurlaidīgā gaismā. Ja gredzens ir plats, kompakts, urīnu atšķaida ar destilētu ūdeni un atkal uzklāj uz reaģenta.

5. Urīnu atšķaida, līdz pēc 3 minūtēm izveidojas plāns pavedienam līdzīgs gredzens.

C \u003d 0,033 g / l x atšķaidījuma pakāpe.

Neliels olbaltumvielu daudzums ir atrodams veselu cilvēku ikdienas urīnā. Tomēr šādas nelielas koncentrācijas nevar noteikt, izmantojot parastās pētniecības metodes. Lielāka daudzuma olbaltumvielu izvadīšanu, kad parastie kvalitatīvie proteīna testi urīnā kļūst pozitīvi, sauc par proteīnūriju. Ir nieru (patiesa) un ārpusnieru (viltus) proteīnūrija. Nieru proteīnūrijas gadījumā olbaltumvielas urīnā nonāk tieši no asinīm, jo palielinās tā filtrācija ar nieru glomeruliem vai samazinās tubulārā reabsorbcija.

Nieru (īstā) proteīnūrija

Nieru (īstā) proteīnūrija ir funkcionāla un organiska. Starp funkcionālo nieru proteīnūriju visbiežāk tiek novēroti šādi veidi:

Jaundzimušo fizioloģiskā proteīnūrija, kas izzūd 4. - 10. dienā pēc piedzimšanas, un priekšlaicīgi dzimušiem zīdaiņiem nedaudz vēlāk;
- ortostatiskā albumīnūrija, kas raksturīga bērniem vecumā no 7 līdz 18 gadiem un parādās tikai vertikālā pozīcijaķermenis;
- pārejoša (insults) albuminūrija, ko var izraisīt dažādas gremošanas sistēmas slimības, smaga anēmija, apdegumi, traumas vai fizioloģiski faktori: smaga izmantot stresu, hipotermija, spēcīgas emocijas, bagātīgs, olbaltumvielām bagāts ēdiens utt.

Organiskā (nieru) proteīnūrija tiek novērota sakarā ar olbaltumvielu pāreju no asinīm caur bojātām nieru glomerulu endotēlija zonām nieru slimību (glomerulonefrīts, nefroze, nefroskleroze, amiloidoze, grūtniecības nefropātija), nieru hemodinamikas traucējumi (nieru vēnu) gadījumā. hipertensija, hipoksija), trofiska un toksiska (tostarp medicīniska) ietekme uz glomerulāro kapilāru sienām.

Ārpusnieru (viltus) proteīnūrija

Ekstrarenāla (viltus) proteīnūrija, kurā olbaltumvielu avots urīnā ir leikocītu, eritrocītu, baktēriju, urotēlija šūnu maisījums. novērota uroloģisko slimību gadījumā ( urolitiāzes slimība, nieru tuberkuloze, nieru un urīnceļu audzēji utt.).

Olbaltumvielu noteikšana urīnā

Lielākā daļa kvalitatīvo un kvantitatīvo metožu olbaltumvielu noteikšanai urīnā ir balstītas uz tā koagulāciju urīna tilpumā vai barotņu (urīna un skābes) saskarnē.

Starp kvalitatīvajām metodēm bedkas noteikšanai urīnā visplašāk tiek izmantots vienotais tests ar sulfosalicilskābi un Hellera gredzena tests.

Standartizētu paraugu ar sulfasalicilskābi ņem šādi. 3 ml filtrēta urīna ielej 2 mēģenēs. Vienā no tiem pievieno 6-8 pilienus 20% sulfasalicilskābes šķīduma. Abas caurules tiek salīdzinātas uz tumša fona. Urīna duļķainība mēģenē ar sulfasalicilskābi norāda uz olbaltumvielu klātbūtni. Pirms pētījuma ir jānosaka urīna reakcija, un, ja tas ir sārmains, tad paskābina ar 2-3 pilieniem 10% etiķskābes šķīduma.

Gellera tests ir balstīts uz faktu, ka olbaltumvielu klātbūtnē urīnā uz slāpekļskābes un urīna robežas tas koagulējas un parādās balts gredzens. Mēģenē ielej 1-2 ml 30% slāpekļskābes šķīduma un gar mēģenes sieniņu rūpīgi izklāj tieši tādu pašu daudzumu filtrētā urīna. Balta gredzena parādīšanās saskarnē starp diviem šķidrumiem norāda uz olbaltumvielu klātbūtni urīnā. Jāatceras, ka dažreiz liela urātu daudzuma klātbūtnē veidojas balts gredzens, taču atšķirībā no proteīna gredzena tas parādās nedaudz virs divu šķidrumu robežas un karsējot izšķīst [Pletneva N.G., 1987].

Visbiežāk izmantotās kvantitatīvās metodes ir:

1) vienotā Brandberga-Roberta-Stoļņikova metode, kuras pamatā ir Hellera gredzena tests;
2) fotoelektrokolorimetriskā metode olbaltumvielu kvantitatīvai noteikšanai urīnā pēc duļķainības, kas veidojas, pievienojot sulfasalicilskābi;
3) biureta metode.

Vienkāršota olbaltumvielu noteikšana urīnā paātrināta metode tiek veikta ar kolorimetrisko metodi, izmantojot indikatorpapīru, ko ražo Lachema (Slovākija), Albuphan, Ames (Anglija), Albustix, Boehringer (Vācija), Comburtest uc Metode sastāv no īpašas ar tetrabromfenolu piesūcinātas papīra sloksnes iegremdēšanas urīnā. zils un citrāta buferšķīdums, kas maina savu krāsu no dzeltenas uz zilu atkarībā no olbaltumvielu satura urīnā. Provizoriski proteīna koncentrāciju testa urīnā nosaka, izmantojot standarta skalu. Lai iegūtu pareizus rezultātus, jums jāievēro šādiem nosacījumiem. urīna pH jābūt diapazonā no 3,0 līdz 3,5; tiks iegūts pārāk sārmains urīns (pH 6,5). viltus pozitīvs rezultāts, un ar pārāk skābu urīnu (pH 3,0) - viltus negatīvs.

Papīram jābūt saskarē ar testa urīnu ne ilgāk, kā norādīts instrukcijās citādi tests sniegs kļūdaini pozitīvu reakciju. Pēdējais tiek novērots arī tad, ja urīnā ir liels daudzums gļotu. Jutīgums dažāda veida un papīra sērijas var atšķirties, tāpēc kvantitatīvs olbaltumvielu novērtējums urīnā ar šo metodi jāizturas piesardzīgi. Nav iespējams noteikt tā daudzumu ikdienas urīnā, izmantojot indikatorpapīru [Pletneva N.G., 1987]

Dienas proteīnūrijas definīcija

Ir vairāki veidi, kā noteikt olbaltumvielu daudzumu, kas izdalās ar urīnu dienā. Vienkāršākā ir Brandberga-Roberta-Stoļņikova metode.

Metodoloģija. Mēģenē ielej 5-10 ml rūpīgi sajaukta dienas urīna un gar tās sieniņām uzmanīgi pievieno 30% slāpekļskābes šķīdumu. Ja urīnā ir 0,033% olbaltumvielu (t.i., 33 mg uz 1 litru urīna), pēc 2-3 minūtēm parādās plāns, bet skaidri redzams balts gredzens. Pie zemākas koncentrācijas tests ir negatīvs. Ar lielāku olbaltumvielu saturu urīnā tā daudzumu nosaka, atkārtoti atšķaidot urīnu ar destilētu ūdeni, līdz gredzens pārtrauc veidoties. Pēdējā mēģenē, kurā gredzens joprojām ir redzams, olbaltumvielu koncentrācija būs 0,033%. Reizinot 0,033 ar urīna atšķaidīšanas pakāpi, nosaka olbaltumvielu saturu 1 litrā neatšķaidīta urīna gramos. Pēc tam olbaltumvielu saturu ikdienas urīnā aprēķina pēc formulas:

K \u003d (x V) / 1000

kur K ir olbaltumvielu daudzums ikdienas urīnā (g); x ir olbaltumvielu daudzums 1 litrā urīna (g); V ir dienā izdalītā urīna daudzums (ml).

Parasti dienas laikā ar urīnu izdalās no 27 līdz 150 mg (vidēji 40-80 mg) olbaltumvielu.

Šis tests ļauj urīnā noteikt tikai smalkās olbaltumvielas (albumīnu). Precīzākas kvantitatīvās metodes (kolorimetriskā Kjeldāla metode u.c.) ir diezgan sarežģītas un prasa īpašu aprīkojumu.

Nieru proteīnūrijas gadījumā ar urīnu izdalās ne tikai albumīni, bet arī citi proteīnu veidi. Normālai proteinogrammai (saskaņā ar Seitz et al., 1953) ir šāds procentuālais daudzums: albumīni - 20%, α 1 -globulīni - 12%, α 2 -globulīni - 17%, γ-globulīni - 43% un β-globulīni - 8 %. Albumīnu un globulīnu attiecība mainās ar dažādām nieru slimībām, t.i. kvantitatīvā attiecība starp olbaltumvielu frakcijām ir izjaukta.

Visizplatītākās uroproteīnu frakcionēšanas metodes ir šādas: izsālīšana ar neitrāliem sāļiem, elektroforētiskā frakcionēšana, imunoloģiskās metodes (radiālā imūndifūzijas reakcija pēc Mančīni, imūnelektroforētiskā analīze, izgulsnēšanās imūnelektroforēze), hromatogrāfija, gēla filtrēšana un ultracentrifugēšana.

Saistībā ar uroproteīnu frakcionēšanas metožu ieviešanu, pamatojoties uz elektroforētiskās mobilitātes, molekulmasas mainīguma, uroproteīna molekulu lieluma un formas izpēti, radās iespēja izolēt konkrētai slimībai raksturīgos proteīnūrijas veidus, pētīt klīrensu. atsevišķi plazmas proteīni. Līdz šim urīnā ir identificēti vairāk nekā 40 plazmas proteīni, tostarp normāls urīns 31 plazmas proteīns.

Selektīva proteīnūrija

AT pēdējie gadi parādījās proteīnūrijas selektivitātes jēdziens. 1955. gadā Hārdviks un Skvairs formulēja "selektīvas" un "neselektīvas" proteīnūrijas jēdzienu, konstatējot, ka plazmas proteīnu filtrēšana urīnā notiek pēc noteiktas shēmas: jo lielāka ir ar urīnu izdalītā proteīna molekulmasa, jo mazāks tā klīrenss un jo zemāka koncentrācija urīnā.galīgais urīns. Proteīnūrija, kas atbilst šim modelim, ir selektīva, atšķirībā no neselektīvas, kurai raksturīga atvasinātā modeļa perversija.

Olbaltumvielu ar salīdzinoši lielu molekulmasu noteikšana urīnā norāda uz nieru filtra selektivitātes neesamību un tā izteiktiem bojājumiem. Šajos gadījumos runā par zemu proteīnūrijas selektivitāti. Tāpēc šobrīd plaši izplatīta ir urīna proteīnu frakciju noteikšana, izmantojot elektroforēzes metodes cietes un poliakrilamīda gēlos. Pamatojoties uz šo pētījumu metožu rezultātiem, var spriest par proteīnūrijas selektivitāti.

Pēc V.S.Mahlinas (1975) domām, visattaisnotākā ir proteīnūrijas selektivitātes noteikšana, salīdzinot 6-7 atsevišķu asins plazmas olbaltumvielu (albumīna, traneferīna, α 2 - makroglobulīna, IgA, IgG, IgM) klīrensus, izmantojot precīzus un specifiskas kvantitatīvās imunoloģiskās radiālās imūndifūzijas reakcijas metodes pēc Mančīni, imūnelektroforētiskā analīze un nokrišņu imūnelektroforēze. Proteīnūrijas selektivitātes pakāpi nosaka selektivitātes indekss, kas ir salīdzināmo un atsauces proteīnu (albumīna) attiecība.

Atsevišķu plazmas proteīnu klīrensu izpēte ļauj iegūt ticamu informāciju par nieru glomerulu filtrācijas bazālo membrānu stāvokli. Saikne starp urīnā izdalīto olbaltumvielu raksturu un izmaiņām glomerulu bazālo membrānu ir tik izteikta un nemainīga, ka uroproteinogramma var netieši spriest par patofizioloģiskām izmaiņām nieru glomerulos. Parasti glomerulārās bazālās membrānas vidējais poru izmērs ir 2,9-4 A ° NM, kas var izvadīt olbaltumvielas ar molekulmasu līdz 10 4 (mioglobulīns, skābe α 1 - glikoproteīns, imūnglobulīna vieglās ķēdes, Fc un Fab - IgG fragmenti, albumīns un transferīns).

Ar glomerulonefrītu, nefrotisko sindromu palielinās poru izmēri glomerulu bazālās membrānās, un tāpēc bazālā membrāna kļūst caurlaidīga liela izmēra un masas olbaltumvielu molekulām (ceruloplazmīns, haptoglobīns, IgG, IgA utt.). Ar ārkārtēju nieru glomerulu bojājumu pakāpi urīnā parādās milzīgas asins plazmas olbaltumvielu molekulas (α 2 -makroglobulīns, IgM un β 2 -lipoproteīns).

Nosakot urīna olbaltumvielu spektru, var secināt, ka pārsvarā tiek ietekmētas noteiktas nefrona daļas. Glomerulonefrīta gadījumā ar dominējošu glomerulāro bazālo membrānu bojājumu ir raksturīga liela un vidēja molekulmasa olbaltumvielu klātbūtne urīnā. Pielonefrītam ar dominējošu kanāliņu bazālo membrānu bojājumu raksturīgs lielu molekulāro proteīnu trūkums un palielināts vidējas un zemas molekulmasas olbaltumvielu daudzums.

β2 -mikroglobulīns

Papildus labi zināmiem proteīniem, piemēram, albumīnam, imūnglobulīniem, lipoproteīniem. fibrinogēns, transferīns, urīns satur plazmas mikroproteīnu proteīnus, starp kuriem klīniski nozīmīgs ir 1968. gadā Berggarda un Bērna atklātais β 2 -mikroglobulīns, kas ar zemu molekulmasu (relatīvā molekulmasa 1800) brīvi iziet cauri nieru glomeruliem. un reabsorbēts proksimālajās kanāliņos. Tas ļauj izmantot kvantitatīvā noteikšanaβ 2 -mikroglobulīns asinīs un urīnā, lai noteiktu glomerulāro filtrāciju un nieru spēju resorbēt proteīnus proksimālajos kanāliņos.

Šī proteīna koncentrāciju asins plazmā un urīnā nosaka ar radioimūno testu, izmantojot standarta komplektu "Phade-bas β 2 -mikroiest" (Pharmacia, Zviedrija). Veselu cilvēku asins serums satur vidēji 1,7 mg / l (diapazonā no 0,6 līdz 3 mg / l), urīnā - vidēji 81 μg / l (maksimums 250 μg / l) β 2 -mikroglobulīnu. Tā pārpalikums urīnā virs 1000 mkg/l ir patoloģiska parādība. β 2 -mikroglobulīna saturs asinīs palielinās slimību gadījumā, ko pavada glomerulārās filtrācijas traucējumi, īpaši akūtu un hronisku glomerulonefrītu, policistisku nieru slimību, nefrosklerozi, diabētisko nefropātiju, akūtu nieru mazspēju.

β 2 -mikroglobulīna koncentrācija urīnā palielinās ar slimībām, ko pavada kanāliņu reabsorbcijas funkcijas pārkāpums, kas izraisa tā izdalīšanos urīnā 10-50 reizes, īpaši ar pielonefrītu, hronisku nieru slimību. neveiksme, strutojoša intoksikācija utt. Raksturīgi, ka ar cistītu atšķirībā no pielonefrīta nepalielinās β 2 -mikroglobulīna koncentrācija urīnā, ko var izmantot, lai diferenciāldiagnozešīs slimības. Tomēr, interpretējot pētījuma rezultātus, jāņem vērā, ka jebkura temperatūras paaugstināšanās vienmēr ir saistīta ar palielinātu β 2 -mikroglobulīna izdalīšanos ar urīnu.

Vidējās asins un urīna molekulas

Vidējās molekulas (SM), ko citādi sauc par olbaltumvielu toksīniem, ir vielas, kuru molekulmasa ir 500-5000 daltonu. To fiziskā struktūra nav zināma. SM sastāvā ir vismaz 30 peptīdi: oksitocīns, vazopresīns, angiotenzīns, glikagons, adrenokortikotropais hormons (AKTH) u.c. Pārmērīga SM uzkrāšanās tiek novērota ar nieru darbības samazināšanos un lielu daudzumu deformētu proteīnu un to metabolītu. asinis. Tiem piemīt dažāda bioloģiska iedarbība un tie ir neirotoksiski, izraisa sekundāru imūnsupresiju, sekundāru anēmiju, kavē proteīnu biosintēzi un eritropoēzi, kavē daudzu enzīmu darbību un izjauc iekaisuma procesa fāzes.

SM līmeni asinīs un urīnā nosaka ar skrīninga testu, kā arī ar spektrofotometriju ultravioletajā zonā pie viļņa garuma 254 un 280 mm uz DI-8B spektrofotometra, kā arī dinamisko spektrofotometriju ar datora apstrādi viļņa garumā. diapazonā no 220 līdz 335 nm uz tā paša Bekmena spektrometra. SM saturs asinīs tiek uzskatīts par normu, kas vienāds ar 0,24 ± 0,02 arb. vienības un urīnā - 0,312 ± 0,09 arb. vienības
Tā kā tie ir normāli ķermeņa atkritumi, tie parasti tiek izvadīti no tā naktī ar glomerulārās filtrācijas palīdzību par 0,5%; 5% no tiem tiek iznīcināti citā veidā. Visas SM frakcijas tiek pakļautas cauruļveida reabsorbcijai.

Neplazmas (audu) uroproteīni

Papildus asins plazmas olbaltumvielām urīnā var būt arī neplazmas (audu) proteīni. Saskaņā ar Buxbaum un Franklin (1970) neplazmas olbaltumvielas veido aptuveni 2/3 no visiem urīna biokoloīdiem un ievērojamu daļu uroproteīnu patoloģiskas proteīnūrijas gadījumā. Audu proteīni iekļūst urīnā tieši no nierēm vai orgāniem, kas anatomiski saistīti ar urīnceļu, vai arī nokļūst asinīs no citiem orgāniem un audiem, un no tā caur nieru glomerulu bazālo membrānu nonāk urīnā. Pēdējā gadījumā audu proteīnu izdalīšanās urīnā notiek līdzīgi kā dažādu molekulmasu plazmas proteīnu izdalīšanās. Neplazmas uroproteīnu sastāvs ir ārkārtīgi daudzveidīgs. Starp tiem ir glikoproteīni, hormoni, antigēni, fermenti (enzīmi).

Audu proteīnus urīnā nosaka, izmantojot tradicionālās proteīnu ķīmijas metodes (ultracentrifugēšana, gēla hromatogrāfija, dažāda veida elektroforēze), specifiskas reakcijas uz fermentiem un hormoniem, kā arī imunoloģiskās metodes. Pēdējie arī ļauj noteikt neplazmas uroproteīna koncentrāciju urīnā un dažos gadījumos noteikt audu struktūras, kas kļuvušas par tā parādīšanās avotu. Galvenā metode neplazmas proteīna noteikšanai urīnā ir imūndifūzijas analīze ar antiserumu, ko iegūst, imunizējot eksperimentālos dzīvniekus ar cilvēka urīnu un pēc tam noārda (adsorbē) ar asins plazmas olbaltumvielām.

Fermentu pārbaude asinīs un urīnā

Patoloģiskajā procesā tiek novēroti dziļi šūnu dzīvībai svarīgās aktivitātes traucējumi, ko papildina intracelulāro enzīmu izdalīšanās ķermeņa šķidrā vidē. Enzimodiagnostika balstās uz vairāku enzīmu noteikšanu, kas izdalās no skarto orgānu šūnām un nav raksturīgi asins serumam.
Cilvēka un dzīvnieku nefrona pētījumi ir parādījuši, ka tā atsevišķās daļās ir augsta fermentatīvā diferenciācija, kas ir cieši saistīta ar katras nodaļas funkcijām. Nieru glomerulos ir salīdzinoši neliels daudzums dažādu enzīmu.

Nieru kanāliņu šūnas, īpaši proksimālās, satur maksimālo fermentu daudzumu. To augstā aktivitāte tiek novērota Henles cilpā, tiešajos kanāliņos un savākšanas kanālos. Atsevišķu enzīmu aktivitātes izmaiņas dažādu nieru slimību gadījumā ir atkarīgas no procesa rakstura, smaguma pakāpes un lokalizācijas. Tie tiek novēroti pirms morfoloģisko izmaiņu parādīšanās nierēs. Tā kā dažādu enzīmu saturs ir skaidri lokalizēts nefronā, viena vai otra enzīma noteikšana urīnā var veicināt nieru patoloģiskā procesa (glomerulos, kanāliņos, garozā vai smadzenēs) lokālu diagnostiku, diferenciāldiagnozi. nieru slimības un procesa dinamikas (vājināšanās un saasināšanās) noteikšana nieru parenhīmā.

Uroģenitālās sistēmas slimību diferenciāldiagnozei tiek izmantota šādu enzīmu aktivitātes noteikšana asinīs un urīnā: laktāta dehidrogenāze (LDH), leicīna aminopeptidāze (LAP), skābā fosfatāze (AP), sārmainās fosfatāzes (AP) , β-glikuronidāze, glutamīna-oksaloetiķa transamināze (GST) , aldolāze, transamidināze uc Fermentu aktivitāti asins serumā un urīnā nosaka, izmantojot bioķīmisko, spektrofotometrisko, hromatogrāfisko, fluorimetrisko un hemiluminiscences metodes.

Enzimūrija nieru slimību gadījumā ir izteiktāka un regulārāka nekā fermentēmija. Tas ir īpaši izteikts slimības akūtā stadijā (akūts pielonefrīts, trauma, audzēja sabrukšana, nieru infarkts utt.). Šajās slimībās tiek konstatēta augsta transamidināzes, LDH, sārmainās fosfatāzes un CP, hialuronidāzes, LAP, kā arī tādu nespecifisku enzīmu kā GST, katalāzes aktivitāte [Polyantseva LR, 1972].

Selektīva enzīmu lokalizācija nefronā, konstatējot LAP un sārmainās fosfatāzes urīnā, ļauj ar pārliecību runāt par akūtām un hroniskām nieru slimībām (akūtu nieru mazspēju, nieru kanāliņu nekrozi, hronisku glomerulonefrītu) [Shemetov V.D., 1968]. Saskaņā ar A. A. Karelin un L. R. Polyantseva (1965) datiem transamidināze ir atrodama tikai divos orgānos - nierēs un aizkuņģa dziedzerī. Tas ir mitohondriju enzīms nierēs, un tā parasti nav asinīs un urīnā. Ar dažādām nieru slimībām transamidināze parādās asinīs un urīnā, un ar aizkuņģa dziedzera bojājumiem - tikai asinīs.

Diferenciālais tests glomerulonefrīta un pielonefrīta diagnostikā Krotkiewski (1963) ņem vērā sārmainās fosfatāzes aktivitāti urīnā, kuras palielināšanās vairāk raksturīga pielonefrītam un diabētiskajai glomerulosklerozei nekā akūtam un hroniskam nefrītam. Amilasēmijas dinamikas palielināšanās ar vienlaicīgu amilazūrijas samazināšanos var liecināt par nefrosklerozi un nieru grumbu veidošanos, LAP ir vissvarīgākā patoloģiskām izmaiņām nieru glomerulos un vītņotajos kanāliņos, jo tā saturs šajās nefrona daļās ir lielāks [Shepotinovsky V.P. et al., 1980]. Lupus nefrīta diagnosticēšanai ieteicams noteikt β-glikuronidāzi un CF [Privalenko M.N. et al., 1974].

Novērtējot enzīmurijas lomu nieru slimību diagnostikā, jāņem vērā šādi nosacījumi. Fermenti, kas pēc savas būtības ir olbaltumvielas, ar mazu molekulmasu var iziet cauri veseliem glomeruliem, nosakot tā saukto fizioloģisko fermentu. Starp šiem fermentiem urīnā pastāvīgi tiek konstatēta α-amilāze (relatīvā molekulmasa 45 000) un uropepsīns (relatīvais molekulmasa 38 000).

Līdzās mazmolekulāriem enzīmiem veselu indivīdu urīnā nelielā koncentrācijā var atrast arī citus enzīmus: LDH, aspartāta un alanīna aminotransferāzes, sārmainās fosfatāzes un CP, maltāzi, aldolāzi, lipāzi, dažādas proteāzes un peptidāzes, sulfatāzi, katalāzi, ribonukleāze, peroksidāze.

Augstmolekulārie enzīmi, kuru relatīvā molekulmasa ir lielāka par 70 000-100 000, saskaņā ar Rihteriha (1958) un Hesa (1962) datiem, var iekļūt urīnā tikai tad, ja ir traucēta glomerulārā filtra caurlaidība. Normālais enzīmu saturs urīnā neļauj izslēgt patoloģisks process nierēs ar urīnvada oklūziju. Ar epimūriju enzīmu izdalīšanās ir iespējama ne tikai no pašām nierēm, bet arī no citiem parenhīmas orgāniem, urīnceļu gļotādu šūnām, prostatas dziedzeriem, kā arī veidotiem urīna elementiem ar hematūriju vai leikocitūriju.

Lielākā daļa enzīmu nav specifiski nierēm, tāpēc ir grūti noteikt, no kurienes nāk veselu un slimu cilvēku urīnā atrodamie fermenti. Tomēr enzīmurijas pakāpe, pat nespecifiskiem enzīmiem nieru bojājuma gadījumā, ir augstāka nekā parasti vai citu orgānu slimību gadījumā. Vērtīgāku informāciju var sniegt visaptverošs vairāku enzīmu, īpaši orgānu specifisko, piemēram, transamināžu, dinamikas pētījums.

Risinot jautājumu par enzīma nieru izcelsmi urīnā, izoenzīmu izpēte palīdz identificēt pētāmajam orgānam raksturīgās frakcijas. Izoenzīmi ir fermenti, kas savā darbībā ir izogēni (katalizē vienu un to pašu reakciju), bet ķīmiskās struktūras un citu īpašību ziņā ir neviendabīgi. Katram audam ir savs izoenzīmu spektrs. Vērtīgas izoenzīmu atdalīšanas metodes ir elektroforēze cietes un poliakrilamīda gēlos, kā arī jonu apmaiņas hromatogrāfija.

Bence Jones proteīns

Ar multiplo mielomu un Valdenstrēma makroglobulinēmiju Bensa-Džounsa proteīns tiek konstatēts urīnā. Metode šī proteīna noteikšanai urīnā ir balstīta uz termoprecipitācijas reakciju. Iepriekš izmantotās metodes, kas novērtē šī proteīna izšķīšanu 100 ° C temperatūrā un atkārtotu nogulsnēšanos pēc turpmākas atdzesēšanas, nav uzticamas, jo ne visiem Bences-Jones proteīnu ķermeņiem ir atbilstošas īpašības.

Drošāka šī paraproteīna noteikšana ar tā nogulsnēšanos 40-60 °C temperatūrā. Tomēr pat šādos apstākļos nokrišņi var nenotikt pārāk skābā (pH< 3,0—3,5) или слишком щелочной (рН >6,5) urīns ar zemu OPM un zemu Bence-Jones proteīna koncentrāciju. Vislabvēlīgākos apstākļus tā izgulsnēšanai nodrošina Patnem piedāvātā metode: 4 ml filtrēta urīna sajauc ar 1 ml 2 M acetāta buferšķīduma pH 4,9 un karsē 15 minūtes ūdens vannā 56 °C temperatūrā. Bence-Jones proteīna klātbūtnē pirmajās 2 minūtēs parādās izteiktas nogulsnes.

Ja Bence-Jones proteīna koncentrācija ir mazāka par 3 g / l, tests var būt negatīvs, taču praksē tas notiek ārkārtīgi reti, jo tā koncentrācija urīnā parasti ir nozīmīgāka. Uz vārīšanās paraugiem nevar pilnībā paļauties. Ar pilnīgu pārliecību to var noteikt urīnā ar imūnelektroforēzes metodi, izmantojot specifiskus serumus pret smagajām un vieglajām imūnglobulīnu ķēdēm.