การหาปริมาณโปรตีน (การหาปริมาณ) การหาโปรตีนในปัสสาวะด้วยวิธี Brandberg-Roberts-Stolnikov
การทดสอบเชิงคุณภาพสำหรับการหาโปรตีนในปัสสาวะ
มีการเสนอปฏิกิริยามากกว่า 100 ปฏิกิริยาสำหรับการกำหนดคุณภาพของโปรตีนในปัสสาวะ ส่วนใหญ่ขึ้นอยู่กับการตกตะกอนของโปรตีนโดยวิธีทางกายภาพ (ความร้อน) หรือทางเคมี การปรากฏตัวของโปรตีนได้รับการพิสูจน์โดยการปรากฏตัวของความขุ่น
ตัวอย่างแบบแห้งด้วยสีก็น่าสนใจเช่นกัน
เฉพาะตัวอย่างที่สำคัญที่สุดสำหรับการฝึกปฏิบัติเท่านั้นที่จะอธิบายไว้ด้านล่าง
ตัวอย่างด้วยกรดซัลโฟซาลิไซลิก. ในปัสสาวะหลายมิลลิลิตร ให้เติมสารละลายกรดซัลโฟซาลิไซลิก 20% ลงไป 2-4 หยด ด้วยปฏิกิริยาเชิงบวก ความขุ่นจะปรากฏขึ้น ผลลัพธ์จะแสดงด้วยเงื่อนไข: opalescence, ปฏิกิริยาบวกเล็กน้อย, ปฏิกิริยาบวกหรือบวกอย่างรุนแรง การทดสอบกรดซัลโฟซาลิไซลิกเป็นหนึ่งในการทดสอบที่มีความละเอียดอ่อนที่สุดในการตรวจหาโปรตีนในปัสสาวะ ตรวจพบแม้กระทั่งการเพิ่มขึ้นของโปรตีนในปัสสาวะที่ไม่มีนัยสำคัญทางพยาธิวิทยา ด้วยเทคนิคง่ายๆ การทดสอบนี้พบว่ามีการใช้งานที่หลากหลาย
การทดสอบ Aseptol. Aseptol เป็นสารทดแทนกรดซัลโฟซาลิไซลิก สามารถเตรียมได้จากวัสดุที่มีอยู่ในห้องปฏิบัติการใดๆ (กรดฟีนอลและกรดซัลฟิวริก) ใช้สารละลาย aseptol 20% เป็นรีเอเจนต์ การทดสอบดำเนินการดังนี้: ในหลอดทดลองที่มีปัสสาวะ 2-3 มล. เติมสารละลาย aseptol 0.5-1 มล. ที่ด้านล่าง หากวงแหวนสีขาวของโปรตีนจับตัวเป็นก้อนที่ส่วนต่อประสานระหว่างของเหลวทั้งสอง การทดสอบจะเป็นบวก
การทดสอบเกลเลอร์. ภายใต้ปัสสาวะไม่กี่มิลลิลิตร ให้เติมกรดไนตริก 30% 1-2 มิลลิลิตร (sp. น้ำหนัก 1.20) หากวงแหวนสีขาวปรากฏขึ้นที่ส่วนต่อประสานของของเหลวทั้งสอง แสดงว่าตัวอย่างมีค่าเป็นบวก ปฏิกิริยาจะกลายเป็นบวกถ้าโปรตีนมากกว่า 3.3 มก.% บางครั้งได้แหวนสีขาวเมื่อมียูเรตจำนวนมาก ไม่เหมือนกับวงแหวนโปรตีน วงแหวนยูเรตไม่ปรากฏที่ขอบระหว่างของเหลวทั้งสอง แต่สูงกว่าเล็กน้อย Larionova เสนอให้ใช้สารละลายกรดไนตริก 1% ในสารละลายอิ่มตัวแทนกรดไนตริก 30% เป็นรีเอเจนต์ เกลือแกง; สิ่งนี้ช่วยประหยัดกรดไนตริกได้มาก
ทดสอบด้วยโพแทสเซียมเฟอร์รูจินัสและกรดอะซิติก. ปฏิกิริยานี้ทำให้สามารถแยกแยะโปรตีนในซีรัมออกจากนิวคลีโออัลบูมินได้
เทปัสสาวะในปริมาณเท่ากันลงในหลอดทดลองสองหลอด สารละลาย 30% สองสามหยดถูกเติมลงในหนึ่งในนั้น กรดน้ำส้ม. หากมีหมอกควันเมื่อเทียบกับหลอดควบคุม แสดงว่าปัสสาวะมีนิวคลีโออัลบูมิน หากไม่ปรากฏความขุ่น เนื้อหาของทั้งสองหลอดจะถูกผสมและแบ่งออกเป็นสองส่วนอีกครั้ง ในหลอดทดลองหนึ่งในสองหลอด ให้หยดสารละลาย 10% ของเกลือเลือดสีเหลือง (โพแทสเซียมเฟอริไซยาไนด์ที่มากเกินไปจะทำให้ตัวอย่างที่เป็นบวกกลายเป็นลบ) หยด (ส่วนเกินสามารถเปลี่ยนตัวอย่างที่เป็นบวกให้กลายเป็นลบได้) เมื่อมีเวย์โปรตีน ความขุ่นจะได้รับ
สำหรับปัสสาวะเข้มข้นที่มีกรดยูริกและกรดยูริกในปริมาณมาก ควรทำการทดสอบด้วยโพแทสเซียมเฟอริไซยาไนด์และกรดอะซิติกหลังการเจือจางเบื้องต้น (2-3 ครั้ง) ของปัสสาวะด้วยน้ำ ที่ มิฉะนั้นความขุ่นอาจเกิดขึ้นเนื่องจากกรดยูริกที่ตกตะกอน
นี่เป็นสิ่งสำคัญอย่างยิ่งเมื่อตรวจปัสสาวะ ทารกที่มีกรดยูริกและกรดยูริกมาก
จากการทดสอบเชิงคุณภาพอื่น ๆ สำหรับโปรตีนในปัสสาวะตามการตกตะกอนของโปรตีน การทดสอบการเดือด การทดสอบของ Esbach, Purdy, Roberts, Almen, Balloni, Buro, Claudius, Corso, Dome, Goodmann -Suzanne, Jollet, Exton, Kamlet, Kobuladze , Liliendal-Petersen, Polacci, Pons, Spiegler, Tanre, Thiele, Brown, Tsushiya เป็นต้น
เมื่อผลิตตัวอย่างโปรตีนในปัสสาวะที่มีคุณภาพตามการตกตะกอนของโปรตีน ควรสังเกตสิ่งต่อไปนี้: กฎทั่วไปการละเมิดซึ่งนำไปสู่ข้อผิดพลาดที่สำคัญในการศึกษา
1. ปัสสาวะที่จะทดสอบต้องเป็นกรด ในปฏิกิริยาอัลคาไลน์ ปัสสาวะจะถูกทำให้เป็นกรดเล็กน้อยด้วยกรดอะซิติก การผลิตตัวอย่างปัสสาวะที่เป็นด่างเมื่อใช้กรดเป็นรีเอเจนต์อาจส่งผลให้กรดเป็นกลางและมีผลลบหากเป็นบวก นี่เป็นเรื่องจริงโดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับตัวอย่างกรดซัลโฟซาลิไซลิก เนื่องจากกรดถูกเติมในปริมาณที่น้อยมากและสามารถถูกทำให้เป็นกลางได้ง่าย
2. ปัสสาวะที่จะตรวจต้องใส
3. ตัวอย่างสำหรับการตรวจหาโปรตีนในปัสสาวะควรทำในหลอดทดลองสองหลอดซึ่งหลอดหนึ่งทำหน้าที่เป็นตัวควบคุม หากไม่มีท่อควบคุม คุณอาจไม่สังเกตเห็นความขุ่นเล็กน้อยในปฏิกิริยา
4. ปริมาณกรดที่เติมในตัวอย่างไม่ควรมากเกินไป กรดจำนวนมากสามารถนำไปสู่การก่อตัวของกรดอัลบูมินที่ละลายน้ำได้และการเปลี่ยนแปลงของตัวอย่างที่เป็นบวกเป็นค่าลบ
สมควรได้รับความสนใจอย่างยิ่ง เนื่องจากเทคนิคง่ายๆ ของตัวอย่างแห้งแบบใช้สี การทดสอบเหล่านี้ใช้อิทธิพลที่โปรตีนมีต่อสีของตัวบ่งชี้ในสารละลายบัฟเฟอร์ (ข้อผิดพลาดของโปรตีนตัวบ่งชี้ที่เรียกว่า) แถบกระดาษกรองที่ชุบด้วยบัฟเฟอร์ซิเตรตที่เป็นกรดและโบรโมฟีนอลสีน้ำเงินเป็นตัวบ่งชี้ จุ่มลงในปัสสาวะเป็นเวลาสั้นๆ การทดสอบเป็นบวกหากได้สีเขียวแกมน้ำเงิน เมื่อเปรียบเทียบความเข้มของสีกับมาตรฐานกระดาษสีแล้ว ยังสามารถสรุปผลเบื้องต้นและเชิงปริมาณได้ กระดาษตัวบ่งชี้มีจำหน่ายในรีมที่มีมาตรฐานสีที่เหมาะสม คล้ายกับกระดาษตัวบ่งชี้สากล
วิธีการหาปริมาณโปรตีนในปัสสาวะ
มีการเสนอวิธีการหลายวิธีในการกำหนดปริมาณโปรตีนในปัสสาวะ วิธีการเชิงปริมาณที่แม่นยำสำหรับการกำหนดโปรตีนในวัสดุชีวภาพยังไม่พบว่ามีการใช้กันอย่างแพร่หลายในการกำหนดโปรตีนในปัสสาวะ เนื่องจากเทคนิคที่ซับซ้อนและใช้เวลานาน วิธีการเชิงปริมาตร โดยเฉพาะวิธี Esbach มีการใช้กันอย่างแพร่หลาย พวกมันเรียบง่ายมาก แต่น่าเสียดายที่มันไม่ถูกต้องนัก วิธีการของกลุ่ม Brandberg-Stolnikov ยังสะดวกสำหรับคลินิก โดยให้ผลลัพธ์ที่แม่นยำกว่าวิธีการวัดปริมาตรด้วยเทคนิคที่ค่อนข้างง่าย ในที่ที่มีโฟโตมิเตอร์หรือเครื่องวัดค่าเนเฟโลมิเตอร์นั้น วิธีนีเฟโลเมตริกก็สะดวกเช่นกัน
วิธี Esbach. มันถูกเสนอโดยแพทย์ชาวปารีส Esbach ในปี 1874 ปัสสาวะและน้ำยาถูกเทลงในหลอดทดลองพิเศษ (อัลบูมิโนมิเตอร์ของ Esbach) หลอดทดลองปิดด้วยจุกยาง กวนให้ทั่ว (โดยไม่ตี!) และทิ้งไว้ในแนวตั้งจนกระทั่ง วันรุ่งขึ้น. พวกเขารายงานการแบ่งซึ่งคอลัมน์ของตะกอนโปรตีนถึง ตัวเลขที่พบแสดงปริมาณโปรตีน เป็นสิ่งสำคัญมากกับวิธี Esbach ที่ปัสสาวะเป็นกรด ปัสสาวะอัลคาไลน์สามารถทำให้องค์ประกอบที่เป็นกรดเป็นกลางของรีเอเจนต์และป้องกันการตกตะกอนของโปรตีน
ข้อดีของวิธีการ: มันง่ายและสะดวกในทางปฏิบัติ
ข้อเสีย: วิธีการนี้ไม่ถูกต้อง ผลลัพธ์จะได้รับหลังจาก 24 - 48 ชั่วโมง
วิธี Brandberg-Stolnikov. มันขึ้นอยู่กับการทดสอบเกลเลอร์เชิงคุณภาพ การทดสอบ Geller สามารถใช้สำหรับการหาปริมาณได้ตามที่ให้ ผลบวกเมื่อปริมาณโปรตีนสูงกว่า 3.3 มก.% นี่คือการจำกัดความเข้มข้นของโปรตีนด้านล่างซึ่งตัวอย่างจะกลายเป็นลบ
การดัดแปลง Erlich และ Althausen. นักวิทยาศาสตร์โซเวียต S. L. Erlikh และ A. Ya. Althausen ได้ปรับเปลี่ยนวิธีการของ Brandberg-Stolnikov ซึ่งบ่งชี้ถึงความเป็นไปได้ในการทำให้การศึกษาง่ายขึ้นและประหยัดเวลาในการผลิต
การทำให้เข้าใจง่ายครั้งแรกเกี่ยวข้องกับเวลาที่ปรากฏของแหวน เวลาที่แน่นอนของการปรากฏตัวของมันถูกกำหนดโดยไม่จำเป็นต้องปฏิบัติตามนาทีที่ 2 และ 3
การทำให้เข้าใจง่ายครั้งที่สองทำให้สามารถระบุได้ว่าควรทำการเจือจางแบบใด ผู้เขียนได้พิสูจน์แล้วว่าการเจือจางที่ต้องการนั้นสามารถกำหนดได้โดยประมาณตามประเภทของวงแหวนที่ได้ พวกเขาแยกแยะ filiform กว้าง
และแหวนขนาดกะทัดรัด
ของวิธีการนีฟีโลเมทริกนั้นควรค่าแก่การสังเกต วิธี Kingsberry และ Clark. เทปัสสาวะที่กรองแล้ว 2.5 มล. ลงในกระบอกเล็ก ๆ เติมด้วยสารละลายกรดซัลโฟซาลิไซลิก 3% ถึง 10 มล. ผัดให้ละเอียดและหลังจากผ่านไป 5 นาทีโฟโตมิเตอร์ในคิวเวตต์ขนาด 1 ซม. ด้วยตัวกรองสีเหลือง โดยใช้น้ำเป็นของเหลวชดเชย ด้วยโฟโตมิเตอร์ Pulfrich พบการสูญพันธุ์ คูณ 2.5 ให้ปริมาณโปรตีนเป็น %o ในกรณีที่ดัชนีการสูญพันธุ์สูงกว่า 1.0 ปัสสาวะจะเจือจางล่วงหน้า 2 เท่า 4 เท่า หรือมากกว่านั้น
เพื่อให้มีความคิดที่ชัดเจนเกี่ยวกับปริมาณโปรตีนที่ขับออกมาในปัสสาวะ จำเป็นต้องพิจารณาไม่เพียงแต่ความเข้มข้นของโปรตีนในส่วนที่แยกจากกันของปัสสาวะ แต่ยังรวมถึงปริมาณรวมในแต่ละวันด้วย ในการทำเช่นนี้ เก็บปัสสาวะของผู้ป่วยเป็นเวลา 24 ชั่วโมง วัดปริมาตรเป็นมิลลิลิตร และกำหนดความเข้มข้นของโปรตีนในส่วนของปัสสาวะทุกวันเป็น g% ปริมาณโปรตีนที่ขับออกทางปัสสาวะใน 24 ชั่วโมงขึ้นอยู่กับปริมาณปัสสาวะในแต่ละวันเป็นกรัม
ความสำคัญทางคลินิกของโปรตีนในปัสสาวะ
โดยปกติแล้ว ปัสสาวะของมนุษย์จะมีโปรตีนในปริมาณเล็กน้อย ซึ่งไม่สามารถระบุได้โดยการทดสอบโปรตีนในปัสสาวะเชิงคุณภาพเป็นประจำ การขับโปรตีนจำนวนมากออกไป ซึ่งการทดสอบคุณภาพตามปกติสำหรับโปรตีนในปัสสาวะกลายเป็นผลบวก เป็นปรากฏการณ์ที่ผิดปกติที่เรียกว่าโปรตีนในปัสสาวะ โปรตีนในปัสสาวะมีผลทางสรีรวิทยาในทารกแรกเกิดเท่านั้นใน 4-10 วันแรกหลังคลอด ชื่ออัลบูมินูเรียที่ใช้กันทั่วไปนั้นไม่ถูกต้อง เพราะไม่เพียงแต่อัลบูมินเท่านั้น แต่ยังมีโปรตีนประเภทอื่นๆ (โกลบูลิน ฯลฯ) ถูกขับออกทางปัสสาวะด้วยโปรตีนในปัสสาวะเป็นอาการในการวินิจฉัยถูกค้นพบในปี ค.ศ. 1770 โดย Cotugno
โปรตีนในไตที่ทำหน้าที่ที่สำคัญที่สุดในเด็กมีดังนี้:
1. โปรตีนในปัสสาวะทางสรีรวิทยาของทารกแรกเกิด. มันเกิดขึ้นในทารกแรกเกิดส่วนใหญ่และไม่มีนัยสำคัญที่ไม่พึงประสงค์ อธิบายโดยตัวกรองไตที่อ่อนแอ ความเสียหายที่เกิด หรือการสูญเสียของเหลวในวันแรกของชีวิต โปรตีนในปัสสาวะจะหายไปในวันที่ 4-10 หลังคลอด (in ทารกคลอดก่อนกำหนดภายหลัง). ปริมาณโปรตีนมีน้อย มันคือนิวคลีโออัลบูมิน
ภาวะอัลบูมินูเรียในทารกแรกเกิดในระยะยาวอาจเป็นอาการของความผิดปกติแต่กำเนิด
2. โรคหลอดเลือดสมองตีบอัลบูมินูเรีย. สิ่งเหล่านี้เกิดจากการเกินเกณฑ์ของความหงุดหงิดตามปกติของตัวกรองไตโดยการระคายเคืองทางกล ความร้อน สารเคมี จิตใจและอื่น ๆ อย่างมีนัยสำคัญ - การสูญเสียของเหลวในทารก (โปรตีนในปัสสาวะขาดน้ำ) การอาบน้ำเย็น อาหารที่อุดมด้วยโปรตีน (โปรตีนในทางเดินอาหาร) , การคลำของไต (อัลบูมินูเรียคลำ), การทำงานหนักเกินไปทางร่างกาย, ความกลัว ฯลฯ
โรคหลอดเลือดสมองตีบอัลบูมินูเรียปรากฏในเด็กได้ง่ายขึ้นใน อายุยังน้อยมากกว่าในเด็กและผู้ใหญ่เนื่องจากไตของหน้าอกและ เด็กน้อยระคายเคืองได้ง่ายขึ้น อัลบูมินูเรียที่ขาดน้ำ (ภาวะทุพโภชนาการ, ความสามารถในการย่อยได้, เป็นพิษ, ท้องร่วง, อาเจียน) มักพบในทารก
โรคหลอดเลือดสมองตีบอัลบูมินูเรียนั้นไม่เป็นพิษเป็นภัย จะหายไปทันทีหลังจากกำจัดสาเหตุที่ทำให้เกิด ในเงินฝากบางครั้งมีเม็ดเลือดขาว กระบอก และเม็ดเลือดแดงเดี่ยว โปรตีนส่วนใหญ่มักเป็นนิวคลีโออัลบูมิน
3. โปรตีนในปัสสาวะ. ภาวะนี้เป็นเรื่องปกติสำหรับเด็กก่อนวัยเรียนและวัยเรียน มันเกิดขึ้นบนพื้นฐานของความผิดปกติของ vasomotor ของเลือดไปเลี้ยงไต โดยทั่วไปสำหรับอัลบูมินูเรียที่มีพยาธิสภาพ (ด้วยเหตุนี้ชื่อ) คือมันจะปรากฏขึ้นเฉพาะเมื่อเด็กยืนอยู่เมื่อกระดูกสันหลังอยู่ในตำแหน่ง lordotic ในตำแหน่งหงายจะหายไป นิวคลีโออัลบูมินถูกปล่อยออกมา ในกรณีที่น่าสงสัยคุณสามารถใช้ประสบการณ์ที่มีพยาธิสภาพซึ่งมีดังนี้: ในตอนเย็นหนึ่งชั่วโมงก่อนเข้านอนเด็กจะล้างกระเพาะปัสสาวะ ในตอนเช้าลุกจากเตียงเขาปัสสาวะอีกครั้ง ปัสสาวะนี้ไม่มีโปรตีน จากนั้นให้เด็กคุกเข่าเป็นเวลา 15-30 นาทีโดยให้ไม้เท้าอยู่ด้านหลังระหว่างข้อศอกงอของมือทั้งสองข้าง ตำแหน่ง lordosis ถูกสร้างขึ้นซึ่งนำไปสู่การปลดปล่อยโปรตีนโดยไม่มีการเปลี่ยนแปลงของตะกอน
ด้วยอัลบูมินูเรียที่มีพยาธิสภาพสามารถหลั่งโปรตีนได้ 8-10 กรัมต่อวัน
ความสำคัญทางคลินิกที่สำคัญที่สุดในบรรดาโปรตีนในปัสสาวะทั้งหมดคือโปรตีนในไตอินทรีย์ เกิดจากโรคอินทรีย์ของไต (ไตอักเสบ, โรคไต, โรคไตอักเสบ) โปรตีนในปัสสาวะเป็นหนึ่งในอาการที่สำคัญและเป็นที่รู้จักมากที่สุดของโรคไตอินทรีย์
1. ในโรคไตอักเสบเฉียบพลันและเรื้อรัง โปรตีนในปัสสาวะเกิดขึ้นเป็นประจำ ปริมาณโปรตีนอยู่ในระดับปานกลาง และไม่มีความเท่าเทียมกันระหว่างระดับของโปรตีนในปัสสาวะกับความรุนแรงของโรค ในทางตรงกันข้าม โรคไตอักเสบเรื้อรังและรุนแรงกว่ามักเกิดขึ้นโดยมีโปรตีนน้อยกว่าแบบเฉียบพลัน หลังจากไตอักเสบเฉียบพลันบางครั้งเป็นเวลานาน (ปี) โปรตีนจำนวนเล็กน้อยในปัสสาวะถูกสร้างขึ้นซึ่งไม่มี ความสำคัญทางพยาธิวิทยา("อัลบูมินูเรียตกค้าง") เราไม่ควรลืมว่า "โรคไตอักเสบที่ไม่มีโปรตีนในปัสสาวะ" อาจเกิดขึ้นได้เช่นกัน บางครั้งโปรตีนจะพบในปัสสาวะส่วนหนึ่ง แต่ไม่พบในส่วนอื่น อัตราส่วนของอัลบูมินต่อโกลบูลินในโรคไตอักเสบเฉียบพลันต่ำและในโรคไตอักเสบเรื้อรังจะสูงกว่า
2. ด้วยภาวะไตเสื่อม ปริมาณโปรตีนในปัสสาวะมีน้อยมาก มักมีรูปแบบของโรคที่ไม่มีโปรตีนในปัสสาวะ
3. จากโรคไตทั้งหมด โรคไตเกิดขึ้นพร้อมกับโปรตีนในปัสสาวะที่เด่นชัดที่สุด
4. ในสภาวะติดเชื้อและเป็นพิษจะเรียกว่ามีไข้และโปรตีนที่เป็นพิษ เหล่านี้เป็นภาวะไตวายเฉียบพลันซึ่งมีปริมาณโปรตีนน้อย กลุ่มนี้ยังรวมถึงโปรตีนในปัสสาวะในภาวะชัก (ชัก), hyperthyroidism, ดีซ่าน, ลำไส้กลืนกัน, enterocolitis, แผลไฟไหม้, โรคโลหิตจางรุนแรง ฯลฯ อัลบูมินูเรียเหล่านี้ไม่เป็นพิษเป็นภัยและผ่านไปอย่างรวดเร็ว (อัลบูมินูเรียชั่วคราว)
5. ด้วยความเมื่อยล้าของเลือดในไตที่เรียกว่า albuminuria congestive ซึ่งเป็นลักษณะของผู้ป่วยโรคหัวใจในระยะ decompensation นอกจากนี้ยังพบในท้องมานและเนื้องอกในช่องท้อง
ด้วยอัลบูมินูเรียที่เป็นไข้ เป็นพิษ และมีอาการคัดจมูก การซึมผ่านที่เพิ่มขึ้นของตัวกรองไตนั้นเด่นชัดเป็นพิเศษ ผู้เขียนบางคนกล่าวว่าโปรตีนในปัสสาวะจำนวนมากเกิดขึ้นโดยไม่มีความเสียหายทางอินทรีย์ต่อเนื้อเยื่อของไต
อัลบูมินูเรียนอกไตมักเกิดจากสิ่งเจือปนของโปรตีน (การหลั่ง เซลล์ที่เน่าเปื่อย) ซึ่งถูกขับออกจากทางเดินปัสสาวะที่เป็นโรคและอวัยวะสืบพันธุ์ ภาวะอัลบูมินูเรียจากภายนอกไตพบได้บ่อยกว่าเนื่องจากโรคกระเพาะปัสสาวะอักเสบ (pyuria) ซึ่งมักเกิดขึ้นน้อยกว่าเนื่องจากช่องคลอดอักเสบ นิ่ว และเนื้องอกในทางเดินปัสสาวะ
ด้วยอัลบูมินูเรียนอกไตจะพบเม็ดเลือดขาวและแบคทีเรียจำนวนมากในตะกอน แทบไม่เคยพบองค์ประกอบของไต ปริมาณโปรตีนมีน้อย ปัสสาวะที่ผ่านการกรองหรือปั่นแยกมักจะไม่ทดสอบผลบวกต่อโปรตีน
ในผู้ที่ฟื้นตัวจาก pyelitis อัลบูมินูเรียจะหายไปหลังจากแบคทีเรียในปัสสาวะและ pyuria
ควรเน้นย้ำว่าเป็นปรากฏการณ์ลักษณะเฉพาะที่ในช่วงต้น วัยเด็กโรคไตอินทรีย์หายากมาก ดังนั้นโปรตีนในปัสสาวะอินทรีย์ก็หายากเช่นกัน ในจำนวนนี้มีไข้และเป็นพิษเป็นส่วนใหญ่ ตรงกันข้ามกับโปรตีนในปัสสาวะอินทรีย์ ภาวะอัลบูมินูเรียในหลอดเลือดสมองพบได้บ่อยในเด็กตั้งแต่อายุยังน้อย
ในเด็กโต โปรตีนในปัสสาวะอินทรีย์มักทำงานได้ดีกว่า โดยทั่วไป เมื่ออายุมากขึ้น โปรตีนจากการทำงานจะพบได้น้อย และมักพบสารอินทรีย์บ่อยขึ้น
การศึกษาโปรตีนในปัสสาวะด้วยไฟฟ้า
ผู้เขียนหลายคนใช้วิธีอิเล็กโตรโฟเรติกเพื่อศึกษาโปรตีนในปัสสาวะ (uroproteins) จะเห็นได้จากอิเล็กโตรโฟเรแกรมที่ได้รับว่ามีองค์ประกอบเชิงคุณภาพเหมือนกันกับโปรตีนในพลาสมา สิ่งนี้บ่งชี้ว่าโปรตีนในปัสสาวะนั้นได้มาจากโปรตีนในพลาสมาองค์ประกอบของสถานที่ทำงานสำหรับการตรวจวัดโปรตีนในปัสสาวะประกอบด้วยองค์ประกอบต่อไปนี้:
- หลอดทดลองเคมีเกาะติดกัน
- ชุดปิเปตสำเร็จการศึกษา
- ปิเปตที่มีปลายดึงแคบ
- ตะเกียงแอลกอฮอล์หรือเตาแก๊ส
- กระดาษดำ.
- กรดอะซิติกน้ำแข็ง
- กรดซัลโฟซาลิไซลิก
- กรดไนตริกเข้มข้น
- น้ำกลั่น.
วิธีการกำหนดโปรตีนในปัสสาวะ
วิธีการทั้งหมดที่ใช้ในการกำหนดคุณภาพของโปรตีนในปัสสาวะจะขึ้นอยู่กับการแข็งตัวของโปรตีน การแข็งตัวของโปรตีนแสดงออกโดยความขุ่นที่แสดงออกถึงระดับที่แตกต่างกัน
การกำหนดคุณภาพของโปรตีนในปัสสาวะสามารถทำได้ด้วยวิธีใดวิธีหนึ่งดังต่อไปนี้:
- เดือดด้วยสารละลายกรดอะซิติก 10%
- ปฏิกิริยากับสารละลาย 20% ของกรดซัลโฟซาลิไซลิก
- ปฏิกิริยากับสารละลายกรดไนตริก 50% (การทดสอบเกลเลอร์);
- ทำปฏิกิริยากับสารละลายกรดไนตริก 1% ในสารละลายอิ่มตัวของเกลือทั่วไป (ทดสอบ Geller ดัดแปลงตาม Larionova)
ก่อนการกำหนดคุณภาพของโปรตีนในปัสสาวะ การเตรียมการดังต่อไปนี้:
1. ปัสสาวะขุ่นกรองผ่านกระดาษกรอง หากไม่สามารถกรองแบบใสได้ ให้กรองซ้ำโดยใช้แผ่นกรองเดิมหรือผสมปัสสาวะ ปริมาณมากดินเบาหรือแป้งโรยตัวหลังจากนั้นจะถูกกรอง
2. หากปัสสาวะมีปฏิกิริยาเป็นด่าง จะทำให้เป็นกรดด้วยสารละลายกรดอะซิติก 10% ให้เกิดปฏิกิริยาเป็นกรดเล็กน้อยภายใต้การควบคุมของสารสีน้ำเงินหรือกระดาษบ่งชี้สากล
3. มีปริมาณเกลือต่ำ (ปัสสาวะสีเหลืองอ่อนหรือสีเหลืองซีดที่มีความถ่วงจำเพาะต่ำ) ให้แต่ละ
เติมสารละลายโซเดียมคลอไรด์อิ่มตัวสองสามหยดลงในตัวอย่าง เนื่องจากการขาดเกลือจะทำให้โปรตีนจับตัวเป็นก้อน
4. สังเกตระดับความขุ่นโดยใช้พื้นหลังสีดำ พื้นหลังเป็นกระดาษแข็งสีดำหรือกระดาษสีดำที่ใช้ในการถ่ายภาพ การบัญชีสำหรับปฏิกิริยาบนพื้นหลังสีดำช่วยให้คุณระบุระดับความขุ่นที่น้อยที่สุดได้
หลอดทดลองที่มีหมายเลขจะอยู่ในชั้นวางแยกต่างหาก พวกมันสร้างปฏิกิริยาอย่างใดอย่างหนึ่งต่อไปนี้
1. การทดสอบการเดือดด้วยสารละลายกรดอะซิติก 10% การทดสอบนี้ต้องใช้สารละลายกรดอะซิติก 10% ซึ่งเตรียมดังนี้: ใส่กรดอะซิติกน้ำแข็ง 10 มล. ลงในกระบอกสูบและเติมน้ำกลั่นจนถึงเครื่องหมาย 100 มล.
เทคนิคการตรวจวัดโปรตีน ปัสสาวะที่กรองแล้วซึ่งมีปฏิกิริยาเป็นกรดเล็กน้อย 10-12 มล. วางลงในหลอดทดลองทางเคมี แล้ว ส่วนบนหลอดทดลองที่มีปัสสาวะถูกทำให้ร้อนอย่างระมัดระวังจนเดือดและเติมสารละลายกรดอะซิติก 10% ลงไป 8-10 หยด หลอดทดลองที่มีปัสสาวะถูกมองบนพื้นหลังสีดำในแสงที่ส่องผ่าน เมื่อมีโปรตีนในปัสสาวะ ความขุ่นในระดับต่างๆ จะปรากฏขึ้น (ตั้งแต่สีเหลือบไปจนถึงความขุ่นมาก) หรือสะเก็ดหลุดออกมา ส่วนควบคุมคือส่วนล่างของหลอดทดลอง ไม่ได้รับความร้อน การทดสอบนี้จะตรวจหาปริมาณโปรตีนตั้งแต่ 0.015% o (% o - promille)
2. ปฏิกิริยากับสารละลายกรดซัลโฟซาลิไซลิก 20% เตรียมสารละลายกรดซัลโฟซาลิไซลิก 20% ดังนี้: กรดซัลโฟซาลิไซลิก 20 กรัมละลายในน้ำกลั่น 70-80 มล. ถ่ายโอนไปยังถังขนาด 100 มล. และเติมน้ำกลั่นจนสุด รีเอเจนต์ที่เตรียมไว้จะถูกเก็บไว้ในภาชนะแก้วสีเข้ม
เทคนิคการตรวจวัดโปรตีน ในหลอดสองหลอดที่มีเส้นผ่านศูนย์กลางเท่ากันจะใส่ปัสสาวะที่กรองแล้ว 2-3 มล. ของปฏิกิริยากรดอ่อน ๆ 3-4 หยดสารละลายกรดซัลโฟซาลิไซลิก 20% ลงในหลอดหนึ่งหลอดอีกหลอดหนึ่งทำหน้าที่เป็นตัวควบคุม . หากมีโปรตีนอยู่ในหลอดรีเอเจนต์ ความขุ่นหรือเกล็ดของโปรตีนที่จับตัวเป็นก้อนจะปรากฏขึ้น ในหลอดควบคุม ของเหลวยังคงใส กรดซัลโฟซาลิไซลิกพร้อมกับโปรตีนในซีรัมจะตกตะกอนอัลบูโมส (เปปไทด์) ซึ่งเป็นผลิตภัณฑ์จากการสลายโปรตีน เพื่อชี้แจงสาเหตุของปัสสาวะขุ่น หลอดทดลองที่มีปัสสาวะจะถูกทำให้ร้อน ความขุ่นที่เกิดจากโปรตีนในซีรัมจะเพิ่มขึ้น ในขณะที่ความขุ่นเนื่องจากการปรากฏตัวของอัลบูโมสจะหายไป การทดสอบนี้มีความไวเช่นเดียวกับการทดสอบก่อนหน้านี้
3. ปฏิกิริยากับสารละลายกรดไนตริก 50% (การทดสอบเกลเลอร์) เตรียมสารละลายกรดไนตริก 50% ดังนี้ น้ำกลั่น 50 มล. (เจือจาง 1:1) เติมกรดไนตริก 50 มล. ด้วยความถ่วงจำเพาะ 1.2-1.4
เทคนิคการตรวจวัดโปรตีน เทกรดไนตริก 50% 1 มล. ลงในหลอดทดลองขนาดเล็กแคบ ๆ (ตะกอนเกาะติดกัน) ปัสสาวะทดสอบที่กรองแล้ว 1 มล. จะถูกรวบรวมในปิเปตที่มีปลายดึงแคบ วางบนรีเอเจนต์และท่อจะถูกถ่ายโอนไปยัง ตำแหน่งแนวตั้ง. ในที่ที่มีโปรตีน จะมีวงแหวนสีขาวปรากฏขึ้นที่ส่วนต่อประสานของของเหลว เวลาของการปรากฏตัวของแหวน คุณสมบัติของมันขึ้นอยู่กับปริมาณของโปรตีน: ถ้าโปรตีนต่ำ วงแหวนจะไม่ปรากฏขึ้นทันที ดังนั้น ลักษณะที่ปรากฏของมันจะถูกตรวจสอบเป็นเวลา 2.5-3 นาที ปริมาณโปรตีนขั้นต่ำที่กำหนดโดยวิธีนี้คือ 0.033°/oo ด้วยปริมาณโปรตีนที่ต่ำกว่าในปัสสาวะ วงแหวนจึงไม่ก่อตัว การบัญชีสำหรับผลของปฏิกิริยาที่เกิดขึ้นบนพื้นหลังสีดำในแสงที่ส่องผ่าน
4. ปฏิกิริยากับสารละลายกรดไนตริก 1% ในสารละลายอิ่มตัวของเกลือทั่วไปคือการทดสอบ Geller ที่ได้รับการดัดแปลง (อ้างอิงจาก Larionova)สำหรับการทดสอบจะใช้สารละลายกรดไนตริก 1% ซึ่งเตรียมในสารละลายอิ่มตัวของเกลือทั่วไป (รีเอเจนต์ของ Larionova) เกลือทั่วไป 35 กรัมละลายในน้ำกลั่น 100 มล. สารละลายถูกกรอง 99 มล. ของสารละลายโซเดียมคลอไรด์อิ่มตัวที่เตรียมไว้จะถูกเติมลงในกรดไนตริกเข้มข้น 1 มล. โดยมีความถ่วงจำเพาะ 1.2-1.4
เทคนิคการหาโปรตีน เช่นเดียวกับในปฏิกิริยาด้วยสารละลายกรดไนตริก 50% (การทดสอบของเกลเลอร์) แต่แทนที่จะเป็น 1 มล. ของสารละลายกรดไนตริก 50% รีเอเจนต์ของ Larionova 1 มล. จะถูกเทลงในหลอดทดลองและปัสสาวะ 1 มล. ชั้นบนมัน การปรากฏตัวของวงแหวนสีขาวที่ขอบของของเหลวบ่งชี้ว่ามีโปรตีนในปัสสาวะทดสอบ การทดสอบ Larionova นั้นละเอียดอ่อนพอๆ กับการทดสอบของ Heller
5. การทดสอบด้วยสี (แห้ง) สำหรับการกำหนดคุณภาพของโปรตีน การทดสอบด้วยสี (แบบแห้ง) สำหรับการกำหนดคุณภาพของโปรตีนในปัสสาวะนั้นขึ้นอยู่กับผลกระทบของโปรตีนที่มีต่อสีของตัวบ่งชี้ในสารละลายบัฟเฟอร์
เทคนิคการตรวจวัดโปรตีน กระดาษตัวบ่งชี้ที่ออกแบบมาเพื่อระบุโปรตีนถูกแช่ในปัสสาวะเป็นเวลาสั้น ๆ ตัวอย่างจะถือเป็นค่าบวกหากกระดาษเปลี่ยนเป็นสีน้ำเงินอมเขียว
การหาปริมาณโปรตีนในปัสสาวะ
การกำหนดปริมาณของโปรตีนในปัสสาวะนั้นขึ้นอยู่กับความจริงที่ว่าเมื่อปัสสาวะที่มีโปรตีนเป็นชั้นบนสารละลาย 50% ของกรดไนตริกหรือรีเอเจนต์ของ Larionova วงแหวนสีขาวจะก่อตัวขึ้นที่ขอบของของเหลวสองชนิด และหากมีวงแหวนสีขาวใสปรากฏขึ้น ภายใน 3 นาที ปริมาณโปรตีนเท่ากับ 0.033% ประมาณหรือ 33 มก. ในปัสสาวะ 1,000 มล. การปรากฏตัวของแหวนเร็วกว่า 3 นาทีบ่งชี้ว่ามีปริมาณโปรตีนในปัสสาวะสูงขึ้น
เมื่อวัดปริมาณโปรตีนในปัสสาวะ มีการปฏิบัติตามกฎต่อไปนี้:
- การหาปริมาณโปรตีนจะดำเนินการเฉพาะในส่วนของปัสสาวะที่ตรวจพบในเชิงคุณภาพเท่านั้น
- ความมุ่งมั่นทำด้วยปัสสาวะที่กรองอย่างระมัดระวัง
- ปฏิบัติตามเทคนิคการจัดชั้นของปัสสาวะทดสอบอย่างแม่นยำด้วยสารละลายกรดไนตริก 50% หรือน้ำยาของ Larionova ในอัตราส่วนของน้ำยาต่อปัสสาวะ (1:1)
- เวลาของการปรากฏตัวของแหวนจะถูกกำหนดโดยนาฬิกาจับเวลา: ในการคำนวณครั้งสุดท้ายของปริมาณโปรตีนจะพิจารณาเวลาของชั้นของปัสสาวะในกรดไนตริกซึ่งก็คือ 15 วินาที
- ปัสสาวะจะเจือจางตามคุณสมบัติของแหวน ในกรณีนี้เตรียมการเจือจางปัสสาวะแต่ละครั้งจากครั้งก่อน
- แหวนถูกระบุบนพื้นหลังสีดำ
วิธีที่พบมากที่สุดคือสองวิธีในการกำหนดปริมาณโปรตีนในปัสสาวะ: วิธีของ Roberts-Stolnikov-Brandberg และวิธีการของ S. L. Erlich และ A. Ya. Althausen
- วิธีของ Roberts-Stolnikov-Brandbergตามวิธีนี้ ปริมาณโปรตีนในปัสสาวะจะถูกกำหนดโดยการเจือจางจนกระทั่งชั้นถัดไปของปัสสาวะบนสารละลายกรดไนตริก 50% หรือน้ำยารีเอเจนต์ของ Larionov ปรากฏขึ้นภายใน 3 นาทีพอดี ปริมาณโปรตีนคำนวณโดยการคูณ 0.033% ด้วยระดับการเจือจางของปัสสาวะ ผลลัพธ์ที่ได้แสดงปริมาณโปรตีนในหน่วยมิลลิกรัมต่อปัสสาวะ 1,000 มล. เช่น หน่วยเป็น ppm (% o)
- วิธีการของ S. L. Erlich และ A. Ya. Althausenหลอดการเกาะติดกันจำนวนหนึ่งวางอยู่ในชั้นวางโดยเทสารละลายกรดไนตริก 50% หรือน้ำยาของ Larionova 1 มล. ลงในครั้งแรก ทดสอบปัสสาวะด้วยปิเปตที่แห้งและสะอาดแยกจากกัน โดยมีปลายที่ดึงออกแคบๆ และทาทับรีเอเจนต์ หลังจากนั้นจึงเปิดนาฬิกาจับเวลา เวลาของการปรากฏตัวของแหวนจะถูกตรวจสอบโดยการวางหลอดทดลองบนพื้นหลังสีดำ เมื่อวงแหวนปรากฏขึ้น นาฬิกาจับเวลาจะปิดลง
เมื่อปัสสาวะเป็นชั้น ขึ้นอยู่กับปริมาณโปรตีน อาจมีวงแหวนขนาดเล็ก กว้าง หรือคล้ายเกลียวปรากฏขึ้น วงแหวนกว้างขนาดกะทัดรัดจะปรากฏขึ้นทันทีหลังจากวางปัสสาวะบนรีเอเจนต์ วงแหวนคล้ายเกลียวอาจปรากฏขึ้นทันที ก่อนหมดเวลาหนึ่งนาที หรือในช่วงเวลาตั้งแต่หนึ่งถึง 4 นาที
เมื่อวงแหวน filiform ปรากฏขึ้นภายใน 1 ถึง 4 นาที ไม่จำเป็นต้องเจือจางปัสสาวะ!
ในการคำนวณปริมาณโปรตีนในกรณีนี้ก็เพียงพอที่จะใช้แผนตารางที่ผู้เขียนเสนอ (ตารางที่ 1)
ตัวอย่าง 1เมื่อวางปัสสาวะบนรีเอเจนต์ วงแหวน filiform จะเกิดขึ้นหลังจาก 2 นาที หากวงแหวนก่อตัวขึ้นภายใน 3 นาที ปริมาณโปรตีนจะเท่ากับ 0.033%
ในกรณีนี้แหวนเกิดขึ้นก่อนหน้านี้ การแก้ไขที่สอดคล้องกันตามตารางแผนเป็นเวลา 2 นาทีคือ 1 + 1/8 ซึ่งหมายความว่าโปรตีนในปัสสาวะส่วนนี้จะมากกว่า 1 + 1/8 เท่าของ 0.033 ° / oo นั่นคือ 0.033% o X (1 + 1/8) \u003d 0.037 ° / oo
เมื่อวงแหวนฟิลิฟอร์มปรากฏขึ้นนานถึง 1 นาที กล่าวคือ หลังจาก 40-60 วินาที ปัสสาวะจะเจือจาง 1 ครั้ง 1.5 เท่า (ปัสสาวะ 2 ส่วน + น้ำ 1 ส่วน) จากนั้นปัสสาวะที่เจือจางแล้วจะนำไปทับบนรีเอเจนต์อีกครั้ง และบันทึกลักษณะที่ปรากฏของแหวน เมื่อคำนวณผลลัพธ์จะพิจารณาว่าปัสสาวะเจือจาง 1.5 เท่า
ตัวอย่าง 2หลังจากชั้นปัสสาวะเจือจาง 1.5 ครั้ง แหวน filiform ปรากฏขึ้น 2 นาที หากวงแหวนปรากฏขึ้นภายใน 3 นาที โปรตีนจะเป็น 0.033% การแก้ไขที่สอดคล้องกันตามแผนตารางเป็นเวลา 2 นาทีคือ 1 + 1/8 โปรตีนในปัสสาวะประกอบด้วย 0.033% oX1.5X (1 + 1/8) \u003d 0.056% o
หากวงแหวน filiform ปรากฏขึ้นทันที ปัสสาวะจะเจือจาง 2 ครั้ง (ปัสสาวะ 1 ส่วน + น้ำ 1 ส่วน) ปัสสาวะที่เจือจางแล้วจะถูกเคลือบทับบนรีเอเจนต์อีกครั้ง และสังเกตลักษณะของวงแหวนหลังจากผ่านไป 1 นาที
ตัวอย่างที่ 3เมื่อชั้นปัสสาวะเจือจาง 2 ครั้งบนรีเอเจนต์ วงแหวน filiform จะปรากฏขึ้นหลังจาก 1 นาที 15 วินาที จากนั้นปริมาณโปรตีนในปัสสาวะที่ศึกษาโดยเปรียบเทียบกับการคำนวณครั้งก่อนจะเท่ากับ
0.033% oX2X (1 + 3/8) \u003d 0.091%
หากวงแหวนกว้างปรากฏขึ้น ปัสสาวะจะเจือจาง 4 ครั้ง (ปัสสาวะ 1 ส่วน + น้ำ 3 ส่วน)
เมื่อชั้นปัสสาวะเจือจางในภายหลัง วงแหวน filiform สามารถก่อตัวได้ทั้งก่อนและหลังหนึ่งนาที ในกรณีเช่นนี้ การคำนวณปริมาณโปรตีนจะดำเนินการโดยการเปรียบเทียบกับตัวอย่างก่อนหน้านี้ นั่นคือ 0.033% o ถูกคูณด้วยระดับการเจือจางและโดยการแก้ไขที่สอดคล้องกัน
ตัวอย่าง 1แหวนหลังจากเจือจางปัสสาวะ 4 ครั้งปรากฏขึ้นทันที ปัสสาวะเจือจาง 2 ครั้ง หลังจากชั้นปัสสาวะเจือจาง 8 ครั้ง (4X2) วงแหวน filiform จะเกิดขึ้นหลังจาก 1.5 นาที ในกรณีนี้ ปริมาณโปรตีนคือ 0.033% oX8X1.25 \u003d 0.33% o เป็นต้น
เมื่อวงแหวนขนาดกะทัดรัดปรากฏขึ้น ปัสสาวะจะเจือจาง 8 ครั้ง (ปัสสาวะ 1 ส่วน + น้ำ 7 ส่วน) เมื่อปัสสาวะเจือจางในชั้นต่อมาบนรีเอเจนต์ อาจมีวงแหวนขนาดกะทัดรัด วงกว้าง หรือวงแหวนฟิลิฟอร์ม
ตัวอย่าง 2เมื่อปัสสาวะทับกรดไนตริก จะเกิดวงแหวนขนาดเล็กขึ้นทันที ปัสสาวะเจือจาง 8 ครั้ง (ปัสสาวะ 1 ส่วน + น้ำ 7 ส่วน) และจัดเป็นชั้นอีกครั้ง ส่งผลให้วงแหวนกระชับขึ้นอีกครั้ง จากนั้นปัสสาวะจะเจือจางอีก 8 ครั้ง (สำหรับสิ่งนี้ 1 ส่วนของปัสสาวะที่เจือจางจะถูกนำเข้าไปในกระบอกสูบหรือในหลอดทดลองและเติมน้ำ 7 ส่วนลงไป) หลังจากปัสสาวะเจือจางอีกชั้นหนึ่ง วงแหวน filiform ก็ก่อตัวขึ้นทันที ปัสสาวะเจือจาง 2 ครั้ง (ปัสสาวะ 1 ส่วน + น้ำ 1 ส่วน) หลังจากชั้นถัดไปของปัสสาวะเจือจาง วงแหวน filiform จะเกิดขึ้นภายใน 2 นาที การคำนวณปริมาณโปรตีนในส่วนที่กำหนดของปัสสาวะจะดำเนินการดังนี้: 0.033,% oX8X8X2X (1 + 1/8) = 4.8% o
นอกจากตารางแผนแล้ว ยังมีตารางที่มีตัวเลขโปรตีนที่คำนวณได้ (ตารางที่ 2) หากปัสสาวะไม่เจือจาง ปริมาณโปรตีนจะอยู่ในคอลัมน์ "ปัสสาวะไม่เจือปน" เมื่อเจือจางปัสสาวะด้วยจำนวนเต็ม (8,4,2) ให้ใช้ตารางที่ 1 1. เมื่อเจือจางปัสสาวะ 1.5 เท่า ให้ใช้ตาราง 2.
เทคนิคการใช้ตารางหาปริมาณโปรตีนในปัสสาวะ
ในคอลัมน์ที่เกี่ยวข้องของตารางจะระบุเวลาของการปรากฏตัวของแหวนและระดับการเจือจางของปัสสาวะ
ตัวเลขที่จุดตัดของเส้นแนวนอนและแนวตั้งที่ลากจากตัวบ่งชี้ทั้งสองนี้ระบุปริมาณโปรตีนในปัสสาวะทดสอบ (% o)
เป็นไปได้ว่าด้วยการทดสอบเชิงคุณภาพที่เป็นบวกสำหรับโปรตีน วงแหวนจะไม่ก่อตัวเมื่อทาทับบนสารละลายกรดไนตริก 50% ซึ่งหมายความว่าปริมาณโปรตีนในปัสสาวะน้อยกว่า 0.033% ในกรณีเช่นนี้ ปริมาณโปรตีนในรูปแบบการวิเคราะห์จะเรียกว่า "ร่องรอย"
หากวัดปริมาณโปรตีน ปริมาณโปรตีนในโพรมิลล์จะถูกบันทึกไว้ในรูปแบบการวิเคราะห์ปัสสาวะ เช่น “โปรตีน - 0.66% o”
นอกจากการวัดปริมาณโปรตีนในปัสสาวะแต่ละส่วนแล้ว ยังคำนวณปริมาณโปรตีนต่อวันเป็นกรัมอีกด้วย เพื่อจุดประสงค์นี้จะมีการรวบรวมปัสสาวะทุกวันวัดปริมาณและกำหนดปริมาณโปรตีนในโพรมิลล์ จากนั้นจะทำการคำนวณ ตัวอย่างเช่น ปริมาณปัสสาวะต่อวันคือ 1800 มล. โปรตีน - 7 ° / oo ซึ่งหมายความว่าโปรตีนในปริมาณปัสสาวะทุกวันประกอบด้วย: 1.8X7 \u003d 12.6 กรัม
วิธี Brandberg-Roberts-Stolnikov หมายถึงวิธีกึ่งปริมาณสำหรับกำหนดโปรตีนทั้งหมดในปัสสาวะ วิธีนี้ใช้การทดสอบแหวนเฮลเลอร์ ซึ่งประกอบด้วยกรดไนตริกและปัสสาวะ เมื่อมีโปรตีนจะจับตัวเป็นก้อนและมีวงแหวนสีขาวปรากฏขึ้น
รีเอเจนต์
สารละลายกรดไนตริก 50% หรือ น้ำยา Larionova.
การเตรียมน้ำยา Larionova: เตรียมสารละลายอิ่มตัวของโซเดียมคลอไรด์ (เกลือ 20-30 กรัมละลายในน้ำ 100 มล. เมื่อถูกความร้อนปล่อยให้ยืนจนเย็น) ส่วนลอยเหนือตะกอนถูกระบายออก กรองแล้ว ในการกรอง 99 มล. ให้เติมกรดไนตริกเข้มข้น 1 มล. สามารถเติมกรดไฮโดรคลอริกเข้มข้น 2 มล. แทนกรดไนตริกได้
คำจำกัดความความคืบหน้า
1 - 2 มล. ของกรดไนตริก (หรือน้ำยา Laionic) เทลงในหลอดทดลอง กรดสามารถระบายออกจากผนังของหลอดทดลอง (5 - 8 นาที) มิฉะนั้นเมื่อชั้นโปรตีนปัสสาวะจะเกิดความขุ่น เนื่องจากการผสมของกรดไนตริกบนผนังของหลอดทดลองกับปัสสาวะซึ่งป้องกันการก่อตัวของวงแหวนที่ชัดเจน . ดังนั้นควรเตรียมชุดหลอดทดลองที่มีกรดไว้ล่วงหน้า ใช้ปิเปต ค่อยๆ เทน้ำที่ผ่านการกรองแล้วบนผนังของหลอดทดลองอย่างระมัดระวัง ปัสสาวะใสระวังอย่าเขย่าของเหลวในหลอดทดลอง การปรากฏตัวของวงแหวนสีขาวบาง ๆ ที่ส่วนต่อประสานระหว่างของเหลวทั้งสองระหว่างนาทีที่ 2 และ 3 บ่งชี้ว่ามีโปรตีนอยู่ที่ความเข้มข้นประมาณ 0.033 กรัม/ลิตร เวลาในการแบ่งชั้นจะนับเป็นหนึ่งในสี่ของนาที
หากแหวนปรากฏขึ้นเร็วกว่า 2 นาทีหลังจากฝังรากลึก ปัสสาวะควรเจือจางด้วยน้ำ และควรทำปัสสาวะที่เจือจางแล้วซ้ำแล้วซ้ำอีก ระดับการเจือจางของปัสสาวะจะถูกเลือกขึ้นอยู่กับชนิดของแหวน เช่น ความกว้าง ความแน่น และเวลาที่ปรากฏ ด้วยวงแหวน filiform ที่ปรากฏก่อน 2 นาทีปัสสาวะจะเจือจาง 2 ครั้งโดยกว้าง 1 - 4 ครั้งมีขนาดกะทัดรัด - 8 ครั้งเป็นต้น การเจือจางของปัสสาวะจะทำในหลอดวัดการหมุนเหวี่ยงเทปัสสาวะไปที่ มาร์ค 1 มล. และเติมน้ำให้ครบตามจำนวนครั้งที่ผสมพันธุ์ เนื้อหาของหลอดทดลองจะถูกผสมอย่างทั่วถึงด้วยปิเปตปาสเตอร์กับบอลลูน หากความขุ่นปรากฏขึ้นในระหว่างการเจือจางของปัสสาวะ จะต้องกรองส่วนผสมอีกครั้งและกรองเฉพาะชั้นกรองที่โปร่งใสบนกรดไนตริกเท่านั้น จากนั้นคำนวณความเข้มข้นของโปรตีนโดยการคูณ 0.033 ด้วยอัตราส่วนการเจือจางและแสดงเป็นกรัมต่อลิตร (g/l) การเลือกเจือจางปัสสาวะดังกล่าวจะถูกเลือกเพื่อให้เมื่อทากรดไนตริกเป็นชั้น ๆ แหวนจะปรากฏขึ้นในนาทีที่ 2 - 3
ในกรณีที่วงแหวนก่อตัวขึ้นระหว่างนาทีที่ 1 และ 4 ด้วยปัสสาวะที่ไม่เจือปนหรือเจือจาง สามารถใช้การแก้ไข Ehrlich-Althausen เพื่อไม่ให้ปัสสาวะเจือจางอีก (ซึ่งจะช่วยประหยัดเวลา) ผู้เขียนเสนอให้กำหนดเวลาที่ปรากฏของวงแหวนเส้นใยและแก้ไขการคำนวณเวลา ในกรณีนี้ ปริมาณโปรตีนคำนวณโดยการคูณ 0.033 g/l ด้วยระดับการเจือจางและโดยการแก้ไข
เมื่อแหวนถูกสร้างขึ้นก่อนหมดอายุ 1 นาทีต้องทำการเจือจางเศษส่วนหนึ่งส่วนคือ 1.5 ครั้ง (ปัสสาวะสองส่วนและน้ำ 1 ส่วน) การเจือจางนี้ถูกนำมาพิจารณาด้วยเมื่อคำนวณปริมาณโปรตีนในปัสสาวะ
ตัวอย่างการหาปริมาณโปรตีนทั้งหมดในปัสสาวะโดยวิธี Brandberg-Roberts-Stolnikov
เมื่อวางปัสสาวะบนรีเอเจนต์จะเกิดวงแหวนกว้างขึ้นทันที ปัสสาวะเจือจาง 4 ครั้ง (ปัสสาวะ 1 ส่วน + น้ำ 3 ส่วน) เป็นชั้น จะได้รับแหวน filiform ทันที จำเป็นต้องเจือจางการเจือจางที่มีอยู่อีก 2 ครั้ง เมื่อแบ่งชั้นการเจือจางนี้ แหวนจะเกิดขึ้นหลังจาก 1.5 นาที คุณไม่สามารถผสมพันธุ์ได้อีกต่อไป
การคำนวณโปรตีน: ปัสสาวะเจือจาง 4 และ 2 ครั้ง ดังนั้น 8 ครั้ง ปริมาณโปรตีน 0.033*8*1 1/4 = 0.33 g/l
ข้อเสียของวิธี Brandberg-Roberts-Stolnikov:
- อัตวิสัย,
- ความลำบาก,
- ความแม่นยำในการกำหนดความเข้มข้นของโปรตีนลดลงเมื่อปัสสาวะเจือจาง
ดูสิ่งนี้ด้วย:
วรรณกรรม:
- คู่มือ "วิธีการวิจัยในห้องปฏิบัติการในคลินิก", ed. ศ. วี.วี.เมนชิคอฟ. - มอสโก "ยา", 2530
- L.V. Kozlovskaya, A. Yu. Nikolaev. ตำราวิธีการวิจัยทางห้องปฏิบัติการทางคลินิก มอสโก, แพทยศาสตร์, 1985
- A. Ya. Althausen "การวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการทางคลินิก" - Moscow, Medgiz, 1959
- A. Ya. Lyubina, L. P. Ilyicheva และผู้เขียนร่วม "การวิจัยในห้องปฏิบัติการทางคลินิก", มอสโก, "ยา", 1984
สารบัญ [แสดง]
คนที่มีสุขภาพดีจะขับปัสสาวะ 1.0–1.5 ลิตรต่อวัน ปริมาณโปรตีน 8-10 มก./ดล. เป็นปรากฏการณ์ทางสรีรวิทยา อัตรารายวันของโปรตีนในปัสสาวะ 100-150 มก. ไม่ควรกระตุ้นความสงสัย Globulin, mucoprotein และ albumin - สิ่งที่ประกอบขึ้นจาก โปรตีนทั้งหมดในปัสสาวะ การไหลออกของอัลบูมินจำนวนมากบ่งชี้ว่ามีการละเมิดกระบวนการกรองในไตและเรียกว่าโปรตีนในปัสสาวะหรืออัลบูมินูเรีย
สารแต่ละชนิดในปัสสาวะถูกกำหนดให้เป็นบรรทัดฐาน "สุขภาพดี" และหากดัชนีโปรตีนผันผวน อาจบ่งบอกถึงพยาธิสภาพของไต
การตรวจปัสสาวะทั่วไปหมายถึงการใช้ส่วนแรก (ตอนเช้า) หรือการเก็บตัวอย่างทุกวัน แบบหลังเป็นที่นิยมสำหรับการประเมินระดับของโปรตีนในปัสสาวะ เนื่องจากปริมาณโปรตีนมีความผันผวนอย่างเด่นชัดในแต่ละวัน เก็บปัสสาวะระหว่างวันในภาชนะเดียววัดปริมาตรทั้งหมด สำหรับห้องปฏิบัติการที่วิเคราะห์ปัสสาวะเพื่อหาโปรตีน ตัวอย่างมาตรฐาน (50 ถึง 100 มล.) จากภาชนะนี้ก็เพียงพอแล้ว ส่วนที่เหลือไม่จำเป็น เพื่อรับ ข้อมูลเพิ่มเติมนอกจากนี้ยังมีการทดสอบตาม Zimnitsky ซึ่งแสดงให้เห็นว่าตัวบ่งชี้ปัสสาวะต่อวันเป็นเรื่องปกติหรือไม่
วิธีการกำหนดโปรตีนในปัสสาวะ | ||||
ดู | ชนิดย่อย | ลักษณะเฉพาะ | ||
คุณภาพ | การทดสอบเกลเลอร์ | การศึกษาปัสสาวะเพื่อหาโปรตีน | ||
การทดสอบกรดซัลโฟซาลิไซลิก | ||||
การวิเคราะห์ต้ม | ||||
เชิงปริมาณ | ความขุ่น | โปรตีนจากปัสสาวะทำปฏิกิริยากับรีเอเจนต์ส่งผลให้ความสามารถในการละลายลดลง benzethonium chloride เป็นรีเอเจนต์กรดซัลโฟซาลิไซลิกและไตรคลอโรอะซิติก | ||
คัลเลอร์ริเมตริก | ด้วยสารบางชนิด โปรตีนจากปัสสาวะจะเปลี่ยนสี นี่เป็นพื้นฐานของปฏิกิริยาไบยูเรตและวิธีโลว์รี นอกจากนี้ยังใช้รีเอเจนต์อื่น - สีฟ้าสดใส, ไพโรกัลลอลสีแดง | |||
กึ่งเชิงปริมาณ | ให้แนวคิดสัมพัทธ์ของปริมาณโปรตีน ผลลัพธ์จะถูกตีความโดยการเปลี่ยนสีของตัวอย่าง วิธีกึ่งเชิงปริมาณรวมถึงแถบทดสอบและวิธี Brandberg-Roberts-Stolnikov |
กลับไปที่ดัชนี
โปรตีนในปัสสาวะเป็นเรื่องปกติในผู้ใหญ่ไม่ควรเกิน 0.033 g / l โดยที่ อัตรารายวันไม่เกิน 0.05 ก./ล. สำหรับหญิงตั้งครรภ์บรรทัดฐานของโปรตีนในปัสสาวะทุกวันมีค่ามากกว่า - 0.3 g / l. และในปัสสาวะตอนเช้าก็เหมือนกัน - 0.033 g / l บรรทัดฐานของโปรตีนในการวิเคราะห์ทั่วไปของปัสสาวะและในเด็กแตกต่างกัน: 0.036 g / l สำหรับตอนเช้าและ 0.06 g / l ต่อวัน ส่วนใหญ่มักจะทำการวิเคราะห์ในห้องปฏิบัติการโดยสองวิธีซึ่งแสดงว่าเศษโปรตีนอยู่ในปัสสาวะเท่าใด ค่ามาตรฐานข้างต้นใช้ได้กับการวิเคราะห์ด้วยกรดซัลโฟซาลิไซลิก หากใช้สีย้อมสีแดงไพโรกัลลอล ค่าจะแตกต่างกันสามเท่า
กลับไปที่ดัชนี
- การกรองในไต glomeruli ไปในทางที่ผิด
- การดูดซึมในท่อของโปรตีนบกพร่อง
- โรคบางชนิดทำให้ไตทำงานหนัก - เมื่อโปรตีนในเลือดสูงขึ้น ไตก็เพียง "ไม่มีเวลา" ในการกรองมัน
สาเหตุที่เหลือถือว่าไม่เกี่ยวกับไต นี่คือพัฒนาการของอัลบูมินูเรียที่ใช้งานได้ โปรตีนในการทดสอบปัสสาวะจะปรากฏขึ้นเมื่อ อาการแพ้, โรคลมบ้าหมู, หัวใจล้มเหลว, มะเร็งเม็ดเลือดขาว, พิษ, myeloma, เคมีบำบัด, โรคทางระบบ ส่วนใหญ่มักจะเป็นตัวบ่งชี้นี้ในการวิเคราะห์ของผู้ป่วยซึ่งจะเป็นระฆังแรกของความดันโลหิตสูง
การเพิ่มขึ้นของโปรตีนในปัสสาวะอาจเกิดจากปัจจัยที่ไม่ใช่ทางพยาธิวิทยา ดังนั้นจึงจำเป็นต้องมีการทดสอบเพิ่มเติม
วิธีการเชิงปริมาณในการหาโปรตีนในปัสสาวะทำให้เกิดข้อผิดพลาด ดังนั้นจึงแนะนำให้ทำการวิเคราะห์หลายๆ ครั้ง แล้วใช้สูตรเพื่อคำนวณค่าที่ถูกต้อง ปริมาณโปรตีนในปัสสาวะมีหน่วยเป็น g/l หรือ mg/l ค่าโปรตีนเหล่านี้ทำให้สามารถกำหนดระดับของโปรตีนในปัสสาวะ แนะนำสาเหตุ ประเมินการพยากรณ์โรค และตัดสินใจเกี่ยวกับกลยุทธ์
กลับไปที่ดัชนี
เพื่อการทำงานที่เหมาะสมของร่างกายจึงมีความจำเป็น การแลกเปลี่ยนอย่างต่อเนื่องระหว่างเลือดกับเนื้อเยื่อ เป็นไปได้ก็ต่อเมื่อมีแรงดันออสโมติกในหลอดเลือด โปรตีนในพลาสมาในเลือดจะรักษาระดับความดันดังกล่าวไว้ได้เมื่อสารโมเลกุลต่ำผ่านจากสภาพแวดล้อมที่มีความเข้มข้นสูงไปยังสภาพแวดล้อมที่ต่ำกว่าได้อย่างง่ายดาย การสูญเสียโมเลกุลโปรตีนนำไปสู่การปล่อยเลือดจากช่องทางเข้าสู่เนื้อเยื่อซึ่งเต็มไปด้วยอาการบวมน้ำอย่างรุนแรง นี่คือการแสดงโปรตีนในปัสสาวะในระดับปานกลางและรุนแรง
ระยะเริ่มต้นของอัลบูมินูเรียไม่มีอาการ ผู้ป่วยให้ความสนใจเฉพาะกับอาการของโรคพื้นเดิมซึ่งเป็นสาเหตุของโปรตีนในปัสสาวะ
ปริมาณโปรตีนในปัสสาวะเรียกว่าการเพิ่มขึ้นของระดับโปรตีนในปัสสาวะเนื่องจากการใช้อาหารบางชนิด
เก็บปัสสาวะเพื่อการวิเคราะห์ในภาชนะที่สะอาดปราศจากไขมัน ก่อนการรวบรวมจะแสดงห้องน้ำของ perineum คุณต้องล้างด้วยสบู่ แนะนำให้ผู้หญิงปิดช่องคลอดด้วยสำลีหรือผ้าอนามัยแบบสอด ตกขาวไม่ส่งผลกระทบต่อผลลัพธ์ วันก่อนไม่ดื่มเหล้าดีกว่า น้ำแร่, กาแฟ , เผ็ด , เค็ม และอาหารที่ให้สีปัสสาวะ (บลูเบอร์รี่, หัวบีท). การออกแรงอย่างหนัก, การเดินเป็นเวลานาน, ความเครียด, มีไข้และเหงื่อออก, การบริโภคอาหารที่มีโปรตีนหรือยามากเกินไปก่อนที่จะผ่านปัสสาวะจะกระตุ้นการปรากฏตัวของโปรตีนในปัสสาวะของบุคคลที่มีสุขภาพดีอย่างสมบูรณ์ ปรากฏการณ์ที่ทนได้นี้เรียกว่าโปรตีนในปัสสาวะ
กลับไปที่ดัชนี
โรคไตที่นำไปสู่การสูญเสียโปรตีน:
- อะไมลอยด์ เซลล์ปกติในไตจะถูกแทนที่ด้วยอะไมลอยด์ (โปรตีน-แซ็กคาไรด์เชิงซ้อน) ซึ่งป้องกันไม่ให้อวัยวะทำงานตามปกติ ในขั้นตอนของโปรตีนยูริก อะไมลอยด์จะสะสมอยู่ในเนื้อเยื่อไต ทำลายเนฟรอนและส่งผลให้กรองไต นี่คือวิธีที่โปรตีนส่งผ่านจากเลือดไปยังปัสสาวะ ระยะนี้สามารถอยู่ได้นานกว่า 10 ปี
- โรคไตโรคเบาหวาน เนื่องจากการเผาผลาญคาร์โบไฮเดรตและไขมันที่ไม่เหมาะสมทำให้เกิดการทำลายหลอดเลือด glomeruli และ tubules ในไต โปรตีนในปัสสาวะเป็นสัญญาณแรกของภาวะแทรกซ้อนที่คาดการณ์ได้ของโรคเบาหวาน
- โรคที่เกิดจากการอักเสบ - โรคไตอักเสบ ส่วนใหญ่แล้วแผลจะส่งผลต่อหลอดเลือดระบบ glomeruli และ pelvicalyceal ทำให้ระบบการกรองหยุดชะงัก
- Glomerulonephritis ในกรณีส่วนใหญ่เป็นภูมิต้านทานผิดปกติในธรรมชาติ ผู้ป่วยบ่นว่าปัสสาวะน้อยลง ปวดหลัง และความดันเพิ่มขึ้น สำหรับการรักษา glomerulonephritis แนะนำให้รับประทานอาหาร ระบบการปกครอง และการรักษาด้วยยา
- กรวยไตอักเสบ. ในระยะเฉียบพลันจะมีอาการ ติดเชื้อแบคทีเรีย: หนาวสั่น คลื่นไส้ ปวดหัว. นี่คือโรคติดเชื้อ
- โรคไต Polycystic
ในร่างกายที่แข็งแรง โมเลกุลโปรตีน (และมีขนาดค่อนข้างใหญ่) ไม่สามารถผ่านระบบกรองของไตได้ ดังนั้นจึงไม่ควรมีโปรตีนในปัสสาวะ ตัวเลขนี้เหมือนกันสำหรับทั้งชายและหญิง หากการวิเคราะห์บ่งชี้ว่ามีโปรตีนในปัสสาวะ สิ่งสำคัญคือต้องปรึกษาแพทย์เพื่อหาสาเหตุ ผู้เชี่ยวชาญจะประเมินว่าระดับโปรตีนสูงแค่ไหน ไม่ว่าจะมีพยาธิสภาพร่วมหรือไม่ วิธีฟื้นฟูการทำงานปกติของร่างกาย จากสถิติพบว่าผู้หญิงมีความเสี่ยงในการติดเชื้อทางเดินปัสสาวะสูงกว่าผู้ชาย
หลักการวิธีการ ขึ้นอยู่กับการแข็งตัวของโปรตีนในปัสสาวะเมื่อมีกรดไนตริก (หรือกรดซัลโฟซาลิไซลิก 20%)
ความคืบหน้า: เติมกรดไนตริก (หรือซัลโฟซาลิไซลิก) 1-2 หยดลงในปัสสาวะ 5 หยด หากมีโปรตีนในปัสสาวะจะมีความขุ่น
โต๊ะ. การตรวจหาส่วนประกอบทางพยาธิวิทยาของปัสสาวะ .
บันทึก:เมื่อมีกลูโคสและโปรตีนในปัสสาวะทดสอบจะมีการกำหนดเนื้อหาเชิงปริมาณ
หลักการวิธีการ : เมื่อโปรตีนทำปฏิกิริยากับไพโรกัลลอล เรดและโซเดียม โมลิบเดต จะเกิดสารเชิงซ้อนที่มีสีขึ้น ความเข้มของสีจะเป็นสัดส่วนกับความเข้มข้นของโปรตีนในตัวอย่าง
รีเอเจนต์: น้ำยาทำงาน - สารละลายไพโรกัลลอลเรดในบัฟเฟอร์ซัคซิเนต, สารละลายสอบเทียบโปรตีนที่มีความเข้มข้น 0.50 ก./ล.
ความคืบหน้า:
ผสมตัวอย่างค้างไว้ 10 นาที ที่ อุณหภูมิห้อง(18 -25ºС) วัดความหนาแน่นเชิงแสงของการทดลอง (Dop) และตัวอย่างการสอบเทียบ (Dk) กับตัวอย่างควบคุมที่ λ=598 (578-610) นาโนเมตร สีคงตัวนาน 1 ชม.
การคำนวณ: ความเข้มข้นของโปรตีนในปัสสาวะ (С) g/l คำนวณโดยสูตร:
С= ดอป/Dk×0.50
โดยที่: Dop \u003d Dk \u003d C \u003d g / l
ค่าปกติ: มากถึง 0.094 ก./ล. (0.141 ก./วัน)
บทสรุป:
หลักการวิธีการ : เมื่อ D-glucose ถูกออกซิไดซ์โดยออกซิเจนในบรรยากาศภายใต้การกระทำของกลูโคสออกซิเดส จะเกิดปริมาณไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ที่เท่ากัน ภายใต้การกระทำของเปอร์ออกซิเดส ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ออกซิไดซ์สารตั้งต้นของโครโมนิก (ส่วนผสมของฟีนอลและ 4 อะมิโนแอนติไพริน - 4AAP) ด้วยการก่อตัวของผลิตภัณฑ์สี ความเข้มของสีเป็นสัดส่วนกับปริมาณกลูโคส
กลูโคสออกซิเดส
กลูโคส + O2 + H2O กลูโคโนแลคโตน + H2O2
เปอร์ออกซิเดส
2H2O2 + ฟีนอล + สารประกอบสี 4AAP + 4H2O
ความคืบหน้า: เติมสารละลายทำงาน 1 มล. และบัฟเฟอร์ฟอสเฟต 0.5 มล. ลงในหลอดทดลอง 2 หลอด หลอดแรกเติมปัสสาวะ 0.02 มล. เครื่องสอบเทียบ 0.02 มล. (การสอบเทียบ สารละลายน้ำตาลกลูโคสมาตรฐาน 10 มิลลิโมล/ลิตร) ลงในหลอดที่สอง ตัวอย่างจะถูกผสม เก็บไว้เป็นเวลา 15 นาทีที่อุณหภูมิ 370C ในเทอร์โมสตัท และความหนาแน่นเชิงแสงของตัวอย่างทดลอง (Dop) และการสอบเทียบ (Dc) จะถูกวัดเทียบกับรีเอเจนต์การทำงานที่ความยาวคลื่น 500-546 นาโนเมตร
การคำนวณ: С = Dop/Dk 10 mmol/l Dop= Dk =
บทสรุป:
บันทึก.หากปริมาณน้ำตาลในปัสสาวะมากกว่า 1% จะต้องเจือจาง
ในปัจจุบัน ห้องปฏิบัติการทางชีวเคมีใช้วิธีด่วนแบบครบวงจรในการวิเคราะห์ปัสสาวะสำหรับกลูโคสโดยใช้กระดาษปฏิกิริยาสำหรับกลูโคส Glucotest หรือใช้แถบทดสอบรวมกันสำหรับ pH โปรตีน กลูโคส ร่างกายคีโตนและเลือด แผ่นทดสอบถูกหย่อนลงในภาชนะที่มีปัสสาวะเป็นเวลา 1 วินาที และเปรียบเทียบระดับสี
การกำหนดโปรตีนโดยใช้ตัวบ่งชี้สีแดงไพโรกัลลอล
หลักการของวิธีการนี้ขึ้นอยู่กับการวัดความหนาแน่นเชิงแสงของสารละลายของสารเชิงซ้อนที่มีสีซึ่งเกิดจากการปฏิสัมพันธ์ของโมเลกุลโปรตีนกับโมเลกุลของสารผสมสีย้อมที่ซับซ้อน Pyrogallol Red-Molybdate ในตัวกลางที่เป็นกรด ความเข้มของสีของสารละลายเป็นสัดส่วนกับปริมาณโปรตีนในวัสดุที่ใช้ทดสอบ การมีอยู่ของผงซักฟอกในรีเอเจนต์ให้การตรวจวัดโปรตีนที่มีลักษณะและโครงสร้างต่างกัน
รีเอเจนต์ 1) สารละลายไพโรกัลลอลเรด 1.5 มิลลิโมล/ลิตร (PGD): 60 มก. ของ PGA ละลายในเมทานอล 100 มล. เก็บที่อุณหภูมิ 0–5 °C; 2) 50 มิลลิโมล/ลิตร succinate buffer pH 2.5: 5.9 g succinic acid (HOOC-CH2-CH2-COOH); โซเดียมออกซาเลต 0.14 กรัม (Na2C2O4) และโซเดียมเบนโซเอต 0.5 กรัม (C6H5COONa) ละลายในน้ำกลั่น 900 มล. 3) 10 mmol/l สารละลายโซเดียมโมลิบเดตคริสตัลไฮเดรต 10 มิลลิโมล/ลิตร (Na2MoO4 × 2H2O): โซเดียมโมลิบเดต 240 มก. ละลายในน้ำกลั่น 100 มล. 4) น้ำยาทำงาน: เติมสารละลายพีจีเอ 40 มล. และสารละลายโซเดียมโมลิบเดต 4 มล. ลงในสารละลายบัฟเฟอร์ซัคซิเนต 900 มล. ปรับ pH ของสารละลายเป็น 2.5 ด้วยสารละลายกรดไฮโดรคลอริก (HCl) 0.1 โมล/ลิตร และปรับปริมาตรเป็น 1 ลิตร รีเอเจนต์ในรูปแบบนี้พร้อมใช้งานและมีความเสถียรเมื่อเก็บในที่ที่ป้องกันแสงและที่อุณหภูมิ 2-25 °C เป็นเวลา 6 เดือน 5) 0.5 ก./ล. สารละลายอัลบูมินมาตรฐาน
ความคืบหน้าของคำจำกัดความ ปัสสาวะทดสอบ 0.05 มล. ถูกเติมลงในหลอดแรก สารละลายมาตรฐานอัลบูมิน 0.05 มล. ถูกเติมลงในหลอดที่สอง และเติมน้ำกลั่น 0.05 มล. ลงในหลอดที่สาม (ตัวอย่างควบคุม) จากนั้นให้ทำงาน 3 มล. รีเอเจนต์ถูกเติมลงในหลอดเหล่านี้ เนื้อหาของหลอดจะถูกผสมและหลังจากผ่านไป 10 นาที ตัวอย่างและสารมาตรฐานจะถูกโฟโตมิเตอร์กับตัวอย่างกลุ่มควบคุมที่ความยาวคลื่น 596 นาโนเมตรในคิวเวตต์ที่มีความยาวเส้นทางแสง 10 มม.
การคำนวณความเข้มข้นของโปรตีนในตัวอย่างปัสสาวะทดสอบดำเนินการตามสูตร:
โดยที่ C คือความเข้มข้นของโปรตีนในตัวอย่างปัสสาวะทดสอบ g/l; เมษายน และ Ast - การสูญพันธุ์ของตัวอย่างปัสสาวะที่ศึกษาและสารละลายมาตรฐานอัลบูมิน g/l; 0.5 - ความเข้มข้นของสารละลายมาตรฐานของอัลบูมิน g/l
หมายเหตุ:
- สีของสารละลาย (คอมเพล็กซ์สี) จะคงตัวเป็นเวลาหนึ่งชั่วโมง
- ความสัมพันธ์ตามสัดส่วนโดยตรงระหว่างความเข้มข้นของโปรตีนในตัวอย่างทดสอบกับการดูดกลืนแสงของสารละลายขึ้นอยู่กับชนิดของโฟโตมิเตอร์
- เมื่อปริมาณโปรตีนในปัสสาวะสูงกว่า 3 กรัม/ลิตร ตัวอย่างจะถูกเจือจางด้วยสารละลายโซเดียมคลอไรด์ไอโซโทนิก (9 กรัม/ลิตร) และทำการตรวจวัดซ้ำ ระดับของการเจือจางจะถูกนำมาพิจารณาเมื่อพิจารณาความเข้มข้นของโปรตีน
ดูสิ่งนี้ด้วย:
- การหาโปรตีนในปัสสาวะ
- การทดสอบที่ได้มาตรฐานด้วยกรดซัลโฟซาลิไซลิก
- วิธีแบบครบวงจรของ Brandberg–Roberts–Stolnikov
- การหาปริมาณโปรตีนในปัสสาวะโดยการทำปฏิกิริยากับกรดซัลโฟซาลิไซลิก
- วิธีไบยูเรต
- การตรวจหาโปรตีน Bence-Jones ในปัสสาวะ
โปรตีนในปัสสาวะเป็นปรากฏการณ์ที่โปรตีนถูกกำหนดในปัสสาวะ ซึ่งบ่งชี้ถึงความเป็นไปได้ของความเสียหายต่อไต ทำหน้าที่เป็นปัจจัยในการพัฒนาของโรคหัวใจ เลือด และหลอดเลือดน้ำเหลือง
การตรวจพบโปรตีนในปัสสาวะไม่ได้บ่งชี้ถึงโรคเสมอไป ปรากฏการณ์ที่คล้ายคลึงกันเป็นเรื่องปกติแม้กระทั่งกับคนที่มีสุขภาพสมบูรณ์ซึ่งสามารถกำหนดโปรตีนในปัสสาวะได้ ภาวะอุณหภูมิต่ำกว่าปกติ การออกกำลังกาย การใช้อาหารที่มีโปรตีนทำให้เกิดโปรตีนในปัสสาวะ ซึ่งจะหายไปโดยไม่ต้องรักษา
ในระหว่างการตรวจคัดกรอง ตรวจพบโปรตีนใน 17% ของคนที่มีสุขภาพดีอย่างเห็นได้ชัด แต่มีเพียง 2% ของคนจำนวนนี้ที่ผลการทดสอบในเชิงบวกเป็นสัญญาณของโรคไต
โมเลกุลโปรตีนไม่ควรเข้าสู่กระแสเลือด มีความสำคัญต่อร่างกาย วัสดุก่อสร้างสำหรับเซลล์ มีส่วนร่วมในปฏิกิริยาเช่น โคเอ็นไซม์ ฮอร์โมน แอนติบอดี ในทั้งชายและหญิง บรรทัดฐานคือการขาดโปรตีนในปัสสาวะโดยสมบูรณ์
ไตทำหน้าที่ป้องกันร่างกายไม่ให้สูญเสียโมเลกุลโปรตีน
ไตมีสองระบบที่กรองปัสสาวะ:
- glomeruli ของไต - อย่าปล่อยให้โมเลกุลขนาดใหญ่ผ่าน แต่อย่าเก็บอัลบูมิน, โกลบูลิน - โมเลกุลโปรตีนเพียงเล็กน้อย
- ท่อไต - ดูดซับโปรตีนที่กรองโดย glomeruli กลับสู่ระบบไหลเวียนโลหิต
อัลบูมิน (ประมาณ 49%), mucoproteins, globulins พบในปัสสาวะซึ่งอิมมูโนโกลบูลินคิดเป็นประมาณ 20%
Globulins เป็นเวย์โปรตีนที่มีน้ำหนักโมเลกุลสูงซึ่งผลิตโดยระบบภูมิคุ้มกันและตับ ส่วนใหญ่ถูกสังเคราะห์โดยระบบภูมิคุ้มกันหมายถึงอิมมูโนโกลบูลินหรือแอนติบอดี
อัลบูมินเป็นส่วนของโปรตีนที่ปรากฏตัวครั้งแรกในปัสสาวะและมีความเสียหายต่อไตเล็กน้อย อัลบูมินจำนวนหนึ่งยังอยู่ในปัสสาวะที่มีสุขภาพดี แต่ก็ไม่มีนัยสำคัญมากจนตรวจไม่พบโดยใช้การวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการ
เกณฑ์ที่ต่ำกว่าซึ่งสามารถตรวจพบได้โดยใช้การวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการคือ 0.033 g / l หากสูญเสียโปรตีนมากกว่า 150 มก. ต่อวัน พวกเขาจะพูดถึงโปรตีนในปัสสาวะ
ข้อมูลสำคัญเกี่ยวกับโปรตีนในปัสสาวะ
โรคกับ ระดับไม่รุนแรงโปรตีนในปัสสาวะไม่มีอาการ ทางสายตา ปัสสาวะที่ไม่มีโปรตีนไม่สามารถแยกความแตกต่างจากปัสสาวะซึ่งมีโปรตีนในปริมาณเล็กน้อยได้ ปัสสาวะค่อนข้างเป็นฟองอยู่แล้วที่ ระดับสูงโปรตีนในปัสสาวะ
เป็นไปได้ที่จะถือว่าการขับโปรตีนออกทางปัสสาวะโดยการปรากฏตัวของผู้ป่วยที่มีโรคในระดับปานกลางหรือรุนแรงเท่านั้นโดยการปรากฏตัวของอาการบวมน้ำที่แขนขา ใบหน้า และหน้าท้อง
ในระยะแรกของโรค อาการทางอ้อมของโปรตีนในปัสสาวะอาจเป็นอาการ:
- การเปลี่ยนแปลงสีของปัสสาวะ
- เพิ่มความอ่อนแอ;
- ขาดความกระหาย;
- คลื่นไส้, อาเจียน;
- ปวดกระดูก;
- อาการง่วงนอนเวียนศีรษะ
- อุณหภูมิที่สูงขึ้น
ไม่ควรละเลยลักษณะที่ปรากฏของสัญญาณดังกล่าวโดยเฉพาะในระหว่างตั้งครรภ์ นี่อาจหมายถึงการเบี่ยงเบนเล็กน้อยจากบรรทัดฐาน และอาจเป็นอาการของการพัฒนาภาวะครรภ์เป็นพิษ, ภาวะครรภ์เป็นพิษ
การหาปริมาณการสูญเสียโปรตีนไม่ใช่เรื่องง่าย การทดสอบในห้องปฏิบัติการหลายครั้งถูกนำมาใช้เพื่อให้ได้ภาพที่สมบูรณ์ยิ่งขึ้นของสภาพของผู้ป่วย
ความยากลำบากในการเลือกวิธีการตรวจหาโปรตีนส่วนเกินในปัสสาวะอธิบายได้โดย:
- ความเข้มข้นของโปรตีนต่ำสำหรับการรับรู้ถึงเครื่องมือที่มีความแม่นยำสูง
- องค์ประกอบของปัสสาวะซึ่งทำให้งานซับซ้อนเนื่องจากมีสารที่บิดเบือนผลลัพธ์
ข้อมูลที่ดีที่สุดสามารถหาได้จากการวิเคราะห์ส่วนของปัสสาวะในเช้าวันแรก ซึ่งรวบรวมหลังจากตื่นนอน
ในวันวิเคราะห์ต้องปฏิบัติตามเงื่อนไขต่อไปนี้:
- อย่าใช้เผ็ด, ทอด, อาหารที่มีโปรตีน, แอลกอฮอล์
- หลีกเลี่ยงการใช้ยาขับปัสสาวะเป็นเวลา 48 ชั่วโมง
- จำกัด การออกกำลังกาย
- ปฏิบัติตามกฎสุขอนามัยส่วนบุคคลอย่างระมัดระวัง
ปัสสาวะตอนเช้าเป็นข้อมูลที่ดีที่สุด เนื่องจากปัสสาวะจะอยู่ในกระเพาะปัสสาวะเป็นเวลานาน และขึ้นอยู่กับปริมาณอาหารที่รับประทานเข้าไป
เป็นไปได้ที่จะวิเคราะห์ปริมาณโปรตีนในปัสสาวะโดยใช้ส่วนสุ่มซึ่งถ่ายเมื่อใดก็ได้ แต่การวิเคราะห์ดังกล่าวมีข้อมูลน้อยกว่าและความน่าจะเป็นของข้อผิดพลาดก็สูงขึ้น
ในการหาปริมาณการสูญเสียโปรตีนในแต่ละวัน จะทำการวิเคราะห์ปัสสาวะทั้งหมดในแต่ละวัน สำหรับสิ่งนี้ภายใน 24 ชั่วโมงพวกเขาจะถูกรวบรวมเป็นพิเศษ ภาชนะพลาสติกปัสสาวะทั้งหมดขับออกมาต่อวัน คุณสามารถเริ่มสะสมได้ตลอดเวลา เงื่อนไขหลักคือหนึ่งวันของการรวบรวม
คำจำกัดความเชิงคุณภาพของโปรตีนในปัสสาวะขึ้นอยู่กับคุณสมบัติของโปรตีนที่จะทำให้เสียสภาพภายใต้อิทธิพลของปัจจัยทางกายภาพหรือทางเคมี วิธีการเชิงคุณภาพเป็นวิธีการตรวจคัดกรองที่ช่วยให้คุณสามารถระบุโปรตีนในปัสสาวะได้ แต่ไม่สามารถประเมินระดับโปรตีนในปัสสาวะได้อย่างแม่นยำ
ตัวอย่างที่ใช้:
- ด้วยการเดือด
- กรดซัลโฟซาลิไซลิก;
- กรดไนตริก รีเอเจนต์ของ Larionova ด้วยการทดสอบแหวนเฮลเลอร์
การทดสอบด้วยกรดซัลโฟซาลิไซลิกทำได้โดยการเปรียบเทียบตัวอย่างปัสสาวะควบคุมกับตัวอย่างทดลอง โดยเติมกรดซัลโฟซาลิไซลิก 20% ลงในปัสสาวะ 7-8 หยด ข้อสรุปเกี่ยวกับการมีอยู่ของโปรตีนนั้นเกิดจากความเข้มของความขุ่นขุ่นที่ปรากฏในหลอดทดลองระหว่างปฏิกิริยา
การทดสอบ Geller มักใช้กรดไนตริก 50% ความไวของวิธีการคือ 0.033 g/l ที่ความเข้มข้นของโปรตีนในหลอดทดลองที่มีตัวอย่างปัสสาวะและรีเอเจนต์ จะมีวงแหวนคล้ายเกลียวปรากฏขึ้น 2-3 นาทีหลังจากเริ่มการทดลอง สีขาวการก่อตัวของซึ่งบ่งชี้ว่ามีโปรตีนอยู่
การทดสอบเกลเลอร์
วิธีกึ่งเชิงปริมาณ ได้แก่ :
- วิธีการกำหนดโปรตีนในปัสสาวะด้วยแผ่นทดสอบ
- วิธี Brandberg-Roberts-Stolnikov
วิธีกำหนด Brandberg-Roberts-Stolnikov อิงตามวิธี Geller ring แต่ช่วยให้ประเมินปริมาณโปรตีนได้แม่นยำยิ่งขึ้น เมื่อทำการทดสอบตามวิธีนี้ การเจือจางของปัสสาวะหลายครั้งจะมีลักษณะเป็นวงแหวนโปรตีนเส้นใยในช่วงเวลาระหว่าง 2-3 นาทีตั้งแต่เริ่มการทดสอบ
ในทางปฏิบัติจะใช้วิธีการของแถบทดสอบที่มีสีย้อมโบรโมฟีนอลสีน้ำเงินเป็นตัวบ่งชี้ ข้อเสียของแถบทดสอบคือความไวในการคัดเลือกต่ออัลบูมิน ซึ่งนำไปสู่ผลลัพธ์ที่บิดเบี้ยวในกรณีที่ความเข้มข้นของโกลบูลินหรือโปรตีนอื่นๆ ในปัสสาวะเพิ่มขึ้น
ข้อเสียของวิธีการนี้ยังรวมถึงความไวที่ค่อนข้างต่ำของการทดสอบต่อโปรตีน แผ่นทดสอบเริ่มทำปฏิกิริยาต่อการมีอยู่ของโปรตีนในปัสสาวะที่ความเข้มข้นของโปรตีนเกิน 0.15 g / l
วิธีการหาปริมาณสามารถแบ่งตามเงื่อนไขได้ดังนี้
- ความขุ่น
- สี
วิธีการนี้ขึ้นอยู่กับคุณสมบัติของโปรตีนเพื่อลดความสามารถในการละลายภายใต้การกระทำของสารยึดเกาะกับการก่อตัวของสารประกอบที่ละลายได้ต่ำ
สารจับโปรตีนสามารถ:
- กรดซัลโฟซาลิไซลิก;
- กรดไตรคลอโรอะซิติก
- เบนโซเนียมคลอไรด์
สรุปผลการทดสอบโดยพิจารณาจากระดับการลดทอนของฟลักซ์แสงในตัวอย่างสารแขวนลอยเมื่อเทียบกับชุดควบคุม ผลลัพธ์ของวิธีนี้ไม่สามารถนำมาประกอบกับความน่าเชื่อถือได้เสมอไป เนื่องจากความแตกต่างในเงื่อนไขของการดำเนินการ: ความเร็วในการผสมรีเอเจนต์ อุณหภูมิ ความเป็นกรดของตัวกลาง
ส่งผลต่อการประเมินการใช้ยาในวันก่อน ก่อนทำการทดสอบโดยใช้วิธีการเหล่านี้ คุณไม่สามารถทำ:
- ยาปฏิชีวนะ;
- ซัลโฟนาไมด์;
- การเตรียมไอโอดีน
วิธีการนี้มีราคาไม่แพงซึ่งช่วยให้สามารถใช้กันอย่างแพร่หลายในการตรวจคัดกรอง แต่ได้ผลลัพธ์ที่แม่นยำยิ่งขึ้นโดยใช้เทคนิคการวัดสีที่มีราคาแพงกว่า
เทคนิคการวัดสีเป็นหนึ่งในวิธีการที่ละเอียดอ่อนในการกำหนดความเข้มข้นของโปรตีนในปัสสาวะได้อย่างแม่นยำ
การทำเช่นนี้ด้วยความแม่นยำสูงช่วยให้:
- ปฏิกิริยาไบยูเรต
- เทคนิคของ Lowry;
- เทคนิคการย้อมสีที่ใช้สีย้อมที่สร้างสารเชิงซ้อนที่มีโปรตีนในปัสสาวะที่แตกต่างจากตัวอย่างอย่างเห็นได้ชัด
วิธีการวัดสีเพื่อตรวจหาโปรตีนในปัสสาวะ
วิธีการนี้มีความน่าเชื่อถือ มีความไวสูง ทำให้สามารถตรวจวัดอัลบูมิน โกลบูลิน พาราโปรตีนในปัสสาวะได้ ใช้เป็นวิธีหลักในการชี้แจงผลการทดสอบที่เป็นข้อขัดแย้งรวมถึงโปรตีนรายวันในปัสสาวะในผู้ป่วยแผนกโรคไตในโรงพยาบาล
มากไปกว่านั้น ผลลัพธ์ที่แม่นยำช่วยให้คุณบรรลุวิธีการของ Lowry ซึ่งขึ้นอยู่กับปฏิกิริยาไบยูเรต เช่นเดียวกับปฏิกิริยาโฟลิน ซึ่งรับรู้ทริปโตเฟนและไทโรซีนในโมเลกุลโปรตีน
เพื่อขจัดข้อผิดพลาดที่อาจเกิดขึ้น ตัวอย่างปัสสาวะจะถูกทำให้บริสุทธิ์โดยการฟอกไตจากกรดอะมิโน กรดยูริก อาจมีข้อผิดพลาดเมื่อใช้ salicylates, tetracyclines, chlorpromazine
วิธีที่แม่นยำที่สุดในการพิจารณาโปรตีนนั้นขึ้นอยู่กับความสามารถในการจับกับสีย้อม ซึ่งใช้:
- พอนโซ;
- coumasi สีฟ้าสดใส;
- ไพโรกัลสีแดง
ในระหว่างวัน ปริมาณโปรตีนที่ขับออกทางปัสสาวะจะเปลี่ยนแปลงไป เพื่อประเมินการสูญเสียโปรตีนในปัสสาวะอย่างเป็นกลางมากขึ้น แนวคิดของโปรตีนรายวันในปัสสาวะจึงถูกนำมาใช้ ค่านี้วัดเป็นกรัม/วัน
สำหรับการประเมินโปรตีนรายวันอย่างรวดเร็วในปัสสาวะ ปริมาณของโปรตีนและครีเอตินีนจะถูกกำหนดในปัสสาวะส่วนเดียว จากนั้นจึงใช้อัตราส่วนโปรตีน/ครีเอตินีนเพื่อสรุปเกี่ยวกับการสูญเสียโปรตีนต่อวัน
วิธีนี้ขึ้นอยู่กับความจริงที่ว่าอัตราการขับครีเอตินินในปัสสาวะเป็นค่าคงที่ไม่เปลี่ยนแปลงในระหว่างวัน ในคนที่มีสุขภาพดี อัตราโปรตีนปกติ:ครีเอตินีนในปัสสาวะคือ 0.2
วิธีนี้ช่วยขจัดข้อผิดพลาดที่อาจเกิดขึ้นเมื่อเก็บปัสสาวะทุกวัน
ตัวอย่างเชิงคุณภาพมีแนวโน้มที่จะให้ผลบวกลวงมากกว่าการทดสอบเชิงปริมาณหรือ ผลลัพธ์เชิงลบที่เป็นเท็จ. ข้อผิดพลาดเกิดขึ้นจากการใช้ยา พฤติกรรมการรับประทานอาหาร การออกกำลังกายก่อนการวิเคราะห์
การตีความการทดสอบเชิงคุณภาพนี้กำหนดโดยการประเมินความขุ่นในหลอดทดลองด้วยสายตาโดยเปรียบเทียบผลการทดสอบกับชุดควบคุม:
- ปฏิกิริยาบวกเล็กน้อยประมาณเป็น +;
- บวก ++;
- บวกเฉียบ+++
การทดสอบแหวนเฮลเลอร์นั้นแม่นยำกว่าในการประเมินการปรากฏตัวของโปรตีนในปัสสาวะ แต่ไม่ได้วัดปริมาณโปรตีนในปัสสาวะ เช่นเดียวกับการทดสอบกรดซัลโฟซาลิไซลิก การทดสอบเฮลเลอร์ให้แนวคิดคร่าวๆ เกี่ยวกับปริมาณโปรตีนในปัสสาวะ
วิธีนี้ช่วยให้คุณวัดระดับของโปรตีนในปัสสาวะได้ แต่มันลำบากเกินไป ไม่ถูกต้อง เนื่องจากการเจือจางอย่างรุนแรง ความแม่นยำของการประเมินจะลดลง
ในการคำนวณโปรตีนคุณต้องคูณระดับการเจือจางของปัสสาวะด้วย 0.033 g / l:
1 | 1 | 1: 2 | 0,066 |
1 | 2 | 1: 3 | 0,099 |
1 | 3 | 1: 4 | 0,132 |
1 | 4 | 1: 5 | 0,165 |
1 | 5 | 1: 6 | 0,198 |
1 | 6 | 1: 7 | 0,231 |
1 | 7 | 1: 8 | 0,264 |
1 | 8 | 1: 9 | 0,297 |
1 | 9 | 1: 10 | 0,33 |
การทดสอบไม่ต้องการเงื่อนไขพิเศษ ขั้นตอนนี้ทำได้ง่ายที่บ้าน ในการทำเช่นนี้ คุณต้องลดแถบทดสอบลงในปัสสาวะเป็นเวลา 2 นาที
ผลลัพธ์จะแสดงด้วยจำนวนบวกบนแถบซึ่งมีการถอดรหัสอยู่ในตาราง:
- ผลการทดสอบที่สอดคล้องกับค่าสูงถึง 30 มก./100 มล. มีความสอดคล้องกับโปรตีนในปัสสาวะทางสรีรวิทยา
- ค่าแถบทดสอบ 1+ และ 2++ บ่งชี้ว่ามีโปรตีนในปัสสาวะอย่างมีนัยสำคัญ
- ค่า 3+++, 4++++ สังเกตได้จากโปรตีนในปัสสาวะที่เกิดจากโรคไต
แผ่นทดสอบสามารถระบุโปรตีนที่เพิ่มขึ้นในปัสสาวะได้โดยประมาณเท่านั้น พวกเขาไม่ได้ใช้สำหรับการวินิจฉัยที่ถูกต้อง และยิ่งกว่านั้นพวกเขาจึงไม่สามารถพูดได้ว่ามันหมายถึงอะไร
อย่าให้แผ่นทดสอบประเมินปริมาณโปรตีนในปัสสาวะของสตรีมีครรภ์อย่างเพียงพอ วิธีการประเมินที่เชื่อถือได้มากขึ้นคือการกำหนดโปรตีนในปัสสาวะทุกวัน
การหาโปรตีนในปัสสาวะโดยใช้แถบทดสอบ:
โปรตีนรายวันในปัสสาวะทำหน้าที่เป็นการวินิจฉัยที่แม่นยำยิ่งขึ้นในการประเมินสถานะการทำงานของไต ในการทำเช่นนี้คุณต้องรวบรวมปัสสาวะทั้งหมดที่ขับออกจากไตต่อวัน
ค่าที่ยอมรับได้สำหรับอัตราส่วนของโปรตีน / ครีเอตินินคือข้อมูลที่แสดงในตาราง:
หากคุณสูญเสียโปรตีนมากกว่า 3.5 กรัมต่อวัน ภาวะนี้เรียกว่าโปรตีนในปัสสาวะมาก
หากมีโปรตีนจำนวนมากในปัสสาวะ ต้องทำการตรวจครั้งที่สองหลังจากผ่านไป 1 เดือน และหลังจากนั้น 3 เดือน ตามผลลัพธ์ที่พิสูจน์ได้ว่าเหตุใดจึงเกินเกณฑ์ปกติ
สาเหตุของโปรตีนที่เพิ่มขึ้นในปัสสาวะคือการผลิตที่เพิ่มขึ้นในร่างกายและการหยุดชะงักของไตโปรตีนในปัสสาวะมีความโดดเด่น:
- สรีรวิทยา - มีการเบี่ยงเบนเล็กน้อยจากบรรทัดฐาน กระบวนการทางสรีรวิทยา, แก้ไขโดยธรรมชาติ;
- พยาธิวิทยา - การเปลี่ยนแปลงเกิดจาก กระบวนการทางพยาธิวิทยาในไตหรืออวัยวะอื่น ๆ ของร่างกายดำเนินไปโดยไม่มีการรักษา
โปรตีนที่เพิ่มขึ้นเล็กน้อยสามารถสังเกตได้จากสารอาหารที่มีโปรตีนมากมาย, แผลไหม้ทางกล, การบาดเจ็บ, พร้อมกับการเพิ่มขึ้นของการผลิตอิมมูโนโกลบูลิน
ระดับโปรตีนในปัสสาวะที่ไม่รุนแรงอาจเกิดจากการออกกำลังกาย ความเครียดทางจิตใจ และการใช้ยาบางชนิด
โปรตีนในปัสสาวะทางสรีรวิทยาหมายถึงการเพิ่มขึ้นของโปรตีนในปัสสาวะในเด็กในวันแรกหลังคลอด แต่หลังจากผ่านไปหนึ่งสัปดาห์ของชีวิตเนื้อหาของโปรตีนในปัสสาวะของเด็กถือเป็นการเบี่ยงเบนจากบรรทัดฐานและบ่งบอกถึงพยาธิสภาพที่กำลังพัฒนา
โรคไตโรคติดเชื้อบางครั้งก็มาพร้อมกับการปรากฏตัวของโปรตีนในปัสสาวะ
ภาวะดังกล่าวมักจะสอดคล้องกับระดับโปรตีนในปัสสาวะที่ไม่รุนแรง เป็นปรากฏการณ์ชั่วคราว หายไปเองอย่างรวดเร็ว โดยไม่ต้องได้รับการดูแลเป็นพิเศษ
ภาวะที่รุนแรงขึ้น ภาวะโปรตีนในปัสสาวะรุนแรงจะสังเกตได้ในกรณีของ:
- glomerulonephritis;
- โรคเบาหวาน
- โรคหัวใจ;
- โรคมะเร็ง กระเพาะปัสสาวะ;
- หลาย myeloma;
- การติดเชื้อ, การบาดเจ็บจากยา, โรคไต polycystic;
- ความดันโลหิตสูง;
- โรคลูปัส erythematosus ระบบ;
- กลุ่มอาการกู๊ดพาสเจอร์
ลำไส้อุดตัน หัวใจล้มเหลว hyperthyroidism อาจทำให้เกิดร่องรอยของโปรตีนในปัสสาวะ
โปรตีนในปัสสาวะแบ่งได้หลายแบบ สำหรับการประเมินคุณภาพของโปรตีน คุณสามารถใช้การจำแนกประเภท Yaroshevsky
ตามระบบของ Yaroshevsky ที่สร้างขึ้นในปี 1971 โปรตีนมีความโดดเด่น:
- ไต - ซึ่งรวมถึงการละเมิดการกรองไต, การปล่อยโปรตีนในท่อ, การอ่านโปรตีนไม่เพียงพอใน tubules;
- ก่อนไต - เกิดขึ้นนอกไต, การขับถ่ายของฮีโมโกลบิน, โปรตีนที่เกิดขึ้นในเลือดมากเกินไปอันเป็นผลมาจาก multiple myeloma;
- postrenal - เกิดขึ้นที่บริเวณทางเดินปัสสาวะหลังไต, การขับถ่ายของโปรตีนระหว่างการทำลายของอวัยวะปัสสาวะ.
เพื่อหาปริมาณของสิ่งที่เกิดขึ้น ระดับของโปรตีนในปัสสาวะจะถูกแยกออกตามเงื่อนไข ต้องจำไว้ว่าพวกเขาสามารถรุนแรงขึ้นได้ง่ายโดยไม่ต้องรักษา
โปรตีนในปัสสาวะที่รุนแรงที่สุดเกิดขึ้นเมื่อสูญเสียโปรตีนมากกว่า 3 กรัมต่อวัน การสูญเสียโปรตีนจาก 30 มก. ถึง 300 มก. ต่อวันสอดคล้องกับระยะปานกลางหรือไมโครอัลบัมนูเรีย โปรตีนสูงถึง 30 มก. ในปัสสาวะทุกวันหมายถึงระดับโปรตีนในปัสสาวะเล็กน้อย
โปรตีนในปัสสาวะเท่าไหร่?
- โดยปกติในปัสสาวะแทบไม่มีโปรตีน (น้อยกว่า 0.002 g / l) อย่างไรก็ตาม ภายใต้เงื่อนไขบางประการ . จำนวนเล็กน้อยโปรตีนอาจปรากฏในปัสสาวะ บุคคลที่มีสุขภาพดีหลังจากรับประทานอาหารโปรตีนจำนวนมากอันเป็นผลมาจากการระบายความร้อนด้วยความเครียดทางอารมณ์การออกกำลังกายเป็นเวลานาน (ที่เรียกว่าโปรตีนในปัสสาวะเดินขบวน)
การปรากฏตัวของโปรตีนจำนวนมากในปัสสาวะ (โปรตีนในปัสสาวะ) เป็นพยาธิสภาพ โปรตีนในปัสสาวะอาจเกิดจากโรคของไต (glomerulonephritis เฉียบพลันและเรื้อรัง, pyelonephritis, โรคไตของการตั้งครรภ์ ฯลฯ ) หรือทางเดินปัสสาวะ (การอักเสบของกระเพาะปัสสาวะ, ต่อมลูกหมาก, ท่อไต) โปรตีนในไตอาจเป็นสารอินทรีย์ (ไต ท่อและมากเกินไป) และทำงานได้ (โปรตีนในปัสสาวะมีไข้ มีพยาธิสภาพในวัยรุ่น กับทารกที่กินมากเกินไป ในทารกแรกเกิด) โปรตีนจากการทำงานไม่เกี่ยวข้องกับพยาธิสภาพของไต ปริมาณโปรตีนในแต่ละวันแตกต่างกันไปในผู้ป่วยตั้งแต่ 0.1 ถึง 3.0 กรัมหรือมากกว่า องค์ประกอบของโปรตีนในปัสสาวะถูกกำหนดโดยอิเล็กโตรโฟรีซิส การปรากฏตัวของโปรตีน Bence-Jones ในปัสสาวะเป็นลักษณะของ multiple myeloma และ macroglobulinemia ของ Waldenström #223;2 microglobulin ในกรณีที่เกิดความเสียหายต่อท่อไต
- โดยปกติ แทบไม่มีโปรตีนในปัสสาวะ (น้อยกว่า 0.002 ก./ล.)
- สัญญาณหลักของโรคที่ตรวจพบในการศึกษาปัสสาวะ
SG ความถ่วงจำเพาะ ความถ่วงจำเพาะที่ลดลงบ่งชี้ว่าความสามารถของไตในการทำให้ปัสสาวะมีสมาธิและขับสารพิษออกจากร่างกายลดลง ซึ่งเกิดขึ้นกับไตวาย ความถ่วงจำเพาะที่เพิ่มขึ้นนั้นสัมพันธ์กับน้ำตาลและเกลือจำนวนมากในปัสสาวะ ควรสังเกตว่าเป็นไปไม่ได้ที่จะประเมินความถ่วงจำเพาะด้วยการตรวจปัสสาวะเพียงครั้งเดียว อาจมีการเปลี่ยนแปลงแบบสุ่ม จำเป็นต้องตรวจปัสสาวะซ้ำ 1-2 ครั้ง
โปรตีนโปรตีนในปัสสาวะ - โปรตีนในปัสสาวะ สาเหตุของโปรตีนในปัสสาวะสามารถสร้างความเสียหายให้กับไตด้วยโรคไตอักเสบ, อะไมลอยโดซิส, ความเสียหายจากสารพิษ โปรตีนในปัสสาวะอาจปรากฏขึ้นเนื่องจากโรคของระบบทางเดินปัสสาวะ (pyelonephritis, cystitis, prostatitis)
กลูโคส กลูโคส (น้ำตาล) ในปัสสาวะ - กลูโคซูเรีย - มักเกิดจากโรคเบาหวาน มากกว่า สาเหตุที่หายาก- ความเสียหายต่อท่อไต เป็นเรื่องที่น่าตกใจมากหากร่างกายของคีโตนถูกกำหนดพร้อมกับน้ำตาลในปัสสาวะ สิ่งนี้เกิดขึ้นกับความรุนแรง, ผิดระเบียบ โรคเบาหวานและเป็นลางสังหรณ์ของภาวะแทรกซ้อนที่รุนแรงที่สุดของโรคเบาหวาน - อาการโคม่าจากเบาหวาน
Bilirubin, Urobilinogen Bilirubin และ urobilin ถูกกำหนดในปัสสาวะในรูปแบบต่างๆของโรคดีซ่าน
เม็ดเลือดแดง เม็ดเลือดแดงในปัสสาวะ - ปัสสาวะ. สิ่งนี้เกิดขึ้นได้ทั้งกับความเสียหายต่อไต ส่วนใหญ่มักเกิดจากการอักเสบหรือในผู้ป่วยที่เป็นโรคของระบบทางเดินปัสสาวะ ตัวอย่างเช่น ถ้าก้อนหินเคลื่อนไปตามนั้น มันสามารถทำร้ายเยื่อเมือกได้ จะมีเซลล์เม็ดเลือดแดงในปัสสาวะ เนื้องอกในไตที่เน่าเปื่อยสามารถนำไปสู่ภาวะโลหิตจางได้
เม็ดเลือดขาว เม็ดเลือดขาวในปัสสาวะ - เม็ดเลือดขาวส่วนใหญ่มักเป็นผลมาจากการเปลี่ยนแปลงการอักเสบในทางเดินปัสสาวะในผู้ป่วยที่มี pyelonephritis, กระเพาะปัสสาวะอักเสบ เม็ดเลือดขาวมักจะถูกกำหนดด้วยการอักเสบของอวัยวะสืบพันธุ์ภายนอกของเพศหญิงในผู้ชาย - ด้วยการอักเสบของต่อมลูกหมาก
Cylindrs Cylinders เป็นรูปแบบจุลทรรศน์ที่แปลกประหลาด กระบอกไฮยาลินในปริมาณ 1-2 สามารถอยู่ในคนที่มีสุขภาพดี พวกมันถูกสร้างขึ้นในท่อไตซึ่งเป็นอนุภาคของโปรตีนที่เกาะติดกัน แต่การเพิ่มจำนวนกระบอกสูบประเภทอื่น (เม็ด, เม็ดเลือดแดง, ไขมัน) มักบ่งบอกถึงความเสียหายต่อเนื้อเยื่อไต พบกระบอกสูบ โรคอักเสบไต แผลจากการเผาผลาญ เช่น เบาหวาน
ข้อมูลของวิธีการและข้อจำกัด ข้อมูล การวิเคราะห์ทั่วไปปัสสาวะจำเพาะโรคไตต่ำมักจะต้องเพิ่มเติมเพิ่มเติม การวิจัยที่แม่นยำ. แต่การศึกษานี้มีความสำคัญมาก โดยเฉพาะอย่างยิ่งเมื่อทำการศึกษาเชิงป้องกัน เนื่องจากจะช่วยให้คุณระบุได้ สัญญาณเริ่มต้นโรคไต เป็นที่ทราบกันดีว่าโรคไตมักถูกซ่อนไว้ และมีเพียงการตรวจปัสสาวะเท่านั้นที่ทำให้พวกเขาต้องสงสัยและทำการตรวจที่จำเป็นเพิ่มเติม
- ในห้องปฏิบัติการส่วนใหญ่ เมื่อทดสอบปัสสาวะเพื่อหาโปรตีน ขั้นแรกจะใช้ปฏิกิริยาเชิงคุณภาพซึ่งตรวจไม่พบโปรตีนในปัสสาวะของบุคคลที่มีสุขภาพดี หากตรวจพบโปรตีนในปัสสาวะโดยปฏิกิริยาเชิงคุณภาพ การวัดเชิงปริมาณ (หรือกึ่งเชิงปริมาณ) จะดำเนินการ ในเวลาเดียวกัน คุณลักษณะของวิธีการที่ใช้ซึ่งครอบคลุมสเปกตรัมที่แตกต่างกันของ uroproteins มีความสำคัญ ดังนั้นเมื่อกำหนดโปรตีนโดยใช้กรดซัลโฟซาลิไซลิก 3% ปริมาณโปรตีนสูงถึง 0.03 ก./ล. จึงถือว่าเป็นเรื่องปกติ ในขณะที่ใช้วิธีไพโรกัลลอล ขีดจำกัดของค่าโปรตีนปกติจะเพิ่มขึ้นเป็น 0.1 ก./ลิตร ทั้งนี้ต้องระบุแบบวิเคราะห์ ค่าปกติโปรตีนสำหรับวิธีการที่ห้องปฏิบัติการใช้
เมื่อกำหนดปริมาณโปรตีนขั้นต่ำ ขอแนะนำให้ทำการวิเคราะห์ซ้ำ ในกรณีที่สงสัย ควรพิจารณาการสูญเสียโปรตีนในปัสสาวะทุกวัน ปัสสาวะประจำวันปกติมีโปรตีนในปริมาณเล็กน้อย ภายใต้สภาวะทางสรีรวิทยา โปรตีนที่กรองแล้วจะถูกดูดซึมกลับเกือบทั้งหมดโดยเยื่อบุผิวของท่อใกล้เคียง และปริมาณของโปรตีนในปัสสาวะในแต่ละวันแตกต่างกันไปตามผู้เขียนแต่ละคน ตั้งแต่ร่องรอยจนถึง 20-50, 80-100 มก. และสูงถึง 150-200 มก. มก. ผู้เขียนบางคนเชื่อว่าการขับโปรตีนทุกวันในปริมาณ 30-50 มก./วัน เป็นบรรทัดฐานทางสรีรวิทยาสำหรับผู้ใหญ่ คนอื่นแนะนำว่าการขับโปรตีนในปัสสาวะไม่ควรเกิน 60 มก./ตร.ม. ของผิวกายต่อวัน ยกเว้นในเดือนแรกของชีวิตที่โปรตีนในปัสสาวะทางสรีรวิทยาอาจมากกว่าค่าที่ระบุสี่เท่า
ภาวะทั่วไปสำหรับการปรากฏตัวของโปรตีนในปัสสาวะของบุคคลที่มีสุขภาพดีคือความเข้มข้นสูงเพียงพอในเลือดและมีน้ำหนักโมเลกุลไม่เกิน 100-200 kDa
- นี่ไม่ใช่บรรทัดฐานด้วยการวินิจฉัยของคุณสิ่งนี้เป็นไปได้อีกสิ่งหนึ่งคือสำหรับโรคไตนี่เป็นตัวบ่งชี้เล็ก ๆ จริง ๆ .. ดูที่คลินิก - บวมความดัน ฯลฯ ดำเนินการรักษาตามที่กำหนดต่อไป ..
- และฉันจะพูดว่า: ไม่ควรเป็นเรื่องปกติ!
โปรตีนในปัสสาวะ: วิธีการกำหนด
โปรตีนในปัสสาวะทางพยาธิวิทยา เป็นหนึ่งในสัญญาณที่สำคัญและสม่ำเสมอที่สุดของโรคของไตและทางเดินปัสสาวะ การกำหนดความเข้มข้นของโปรตีนในปัสสาวะเป็นองค์ประกอบที่จำเป็นและสำคัญของการศึกษาปัสสาวะ การตรวจหาและหาปริมาณโปรตีนในปัสสาวะมีความสำคัญไม่เพียงแต่ในการวินิจฉัยโรคไตระดับปฐมภูมิและทุติยภูมิเท่านั้น แต่การประเมินการเปลี่ยนแปลงความรุนแรงของโปรตีนในปัสสาวะในไดนามิกส์นั้นยังมีข้อมูลเกี่ยวกับกระบวนการทางพยาธิวิทยาและประสิทธิผลของการรักษาอีกด้วย การตรวจพบโปรตีนในปัสสาวะแม้ในปริมาณเพียงเล็กน้อยก็น่าเป็นห่วงเกี่ยวกับ โรคที่เป็นไปได้ไตหรือทางเดินปัสสาวะและต้องมีการวิเคราะห์ซ้ำ ที่น่าสังเกตเป็นพิเศษคือความไร้สติของการศึกษาปัสสาวะ และโดยเฉพาะอย่างยิ่ง การกำหนดโปรตีนในปัสสาวะโดยไม่สังเกตทั้งหมด กฎการสะสม.
วิธีการทั้งหมดในการหาโปรตีนในปัสสาวะสามารถแบ่งออกเป็น:
คุณภาพ,
กึ่งเชิงปริมาณ
เชิงปริมาณ
วิธีการเชิงคุณภาพ
ทั้งหมด การทดสอบเชิงคุณภาพสำหรับโปรตีนในปัสสาวะ ขึ้นอยู่กับความสามารถของโปรตีนในการทำให้เสียสภาพภายใต้อิทธิพลของปัจจัยทางกายภาพและทางเคมีต่างๆ เมื่อมีโปรตีนในตัวอย่างปัสสาวะทดสอบ จะเกิดความขุ่นหรือการตกตะกอน
เงื่อนไขในการพิจารณาโปรตีนในปัสสาวะตามปฏิกิริยาการแข็งตัวของเลือด:
ปัสสาวะควรเป็นกรด ปัสสาวะอัลคาไลน์ทำให้เป็นกรดด้วยกรดอะซิติกเล็กน้อย (2 - 3) หยด (5 - 10%)
ปัสสาวะควรมีความชัดเจน ความขุ่นจะถูกลบออกผ่านตัวกรองกระดาษ หากยังคงมีหมอกควันอยู่ ให้เติมแป้งโรยตัวหรือแมกนีเซียที่ไหม้ (ประมาณ 1 ช้อนชาต่อปัสสาวะ 100 มล.) เขย่าและกรอง
ควรทำตัวอย่างเชิงคุณภาพในหลอดทดลองสองหลอด หนึ่งในนั้นคือหลอดควบคุม
มองหาความขุ่นควรอยู่บนพื้นหลังสีดำในแสงที่ส่องผ่าน
วิธีการเชิงคุณภาพในการหาโปรตีนในปัสสาวะ ได้แก่ :
การทดสอบแหวนเฮลเลอร์,
ตัวอย่างที่มีกรดซัลโฟซาลิไซลิก 15 - 20%,
การทดสอบการเดือดและอื่น ๆ
การศึกษาจำนวนมากแสดงให้เห็นว่าไม่มีวิธีการใดที่เป็นที่รู้จักสำหรับการกำหนดคุณภาพของโปรตีนในปัสสาวะที่ให้ผลลัพธ์ที่เชื่อถือได้และทำซ้ำได้ อย่างไรก็ตามสิ่งนี้ใน DLT ส่วนใหญ่ในรัสเซีย วิธีการเหล่านี้ใช้กันอย่างแพร่หลายในการตรวจคัดกรอง - ในปัสสาวะที่มีปฏิกิริยาเชิงคุณภาพในเชิงบวก การกำหนดปริมาณเพิ่มเติมของโปรตีนจะดำเนินการ จากปฏิกิริยาเชิงคุณภาพ การทดสอบเฮลเลอร์และการทดสอบกรดซัลโฟซาลิไซลิกมักใช้มากกว่า แต่การทดสอบกรดซัลโฟซาลิไซลิกโดยทั่วไปถือว่าเหมาะสมที่สุดสำหรับการตรวจหาโปรตีนในปัสสาวะทางพยาธิวิทยา ในปัจจุบันการทดสอบการเดือดนั้นไม่ได้ถูกใช้งานจริงเนื่องจากความซับซ้อนและระยะเวลา
วิธีกึ่งเชิงปริมาณ
ถึง วิธีกึ่งเชิงปริมาณ เกี่ยวข้อง:
วิธี Brandberg-Roberts-Stolnikov,
การตรวจหาโปรตีนในปัสสาวะโดยใช้แผ่นตรวจวินิจฉัย
วิธี Brandberg-Roberts-Stolnikov ขึ้นอยู่กับการทดสอบ Geller ring ดังนั้นด้วยวิธีนี้จะพบข้อผิดพลาดเดียวกันเช่นเดียวกับการทดสอบ Geller
ปัจจุบันมีการใช้แถบตรวจวินิจฉัยเพื่อตรวจหาโปรตีนในปัสสาวะมากขึ้น สีย้อมสีน้ำเงินโบรโมฟีนอลในบัฟเฟอร์ซิเตรตมักใช้เป็นตัวบ่งชี้สำหรับการกำหนดโปรตีนกึ่งปริมาณในปัสสาวะบนแถบ ปริมาณโปรตีนในปัสสาวะพิจารณาจากความเข้มของสีเขียวอมฟ้าที่พัฒนาขึ้นหลังจากสัมผัสกับโซนปฏิกิริยากับปัสสาวะ ประเมินผลด้วยสายตาหรือใช้เครื่องวิเคราะห์ปัสสาวะ แม้จะมีความนิยมอย่างมากและข้อดีที่เห็นได้ชัดของวิธีเคมีแบบแห้ง (ความเรียบง่าย ความเร็วของการวิเคราะห์) วิธีการเหล่านี้ในการวิเคราะห์ปัสสาวะโดยทั่วไปและการกำหนดโปรตีนโดยเฉพาะนั้นไม่ได้ไม่มีข้อบกพร่องร้ายแรง หนึ่งในนั้นที่นำไปสู่การบิดเบือนข้อมูลการวินิจฉัยคือความไวที่มากขึ้นของตัวบ่งชี้ของโบรโมฟีนอลบลูต่ออัลบูมินเมื่อเทียบกับโปรตีนอื่น ๆ ในเรื่องนี้ แผ่นทดสอบส่วนใหญ่ถูกปรับให้เข้ากับการตรวจหาโปรตีนในไตที่เลือกได้เป็นหลัก เมื่อโปรตีนในปัสสาวะเกือบทั้งหมดถูกแทนด้วยอัลบูมิน ด้วยความก้าวหน้าของการเปลี่ยนแปลงและการเปลี่ยนแปลงของโปรตีนในไตที่คัดเลือกไปเป็นแบบไม่คัดเลือก (ลักษณะของโกลบูลินในปัสสาวะ) ผลลัพธ์ของการกำหนดโปรตีนจะถูกประเมินต่ำไปเมื่อเทียบกับค่าจริง ข้อเท็จจริงนี้ทำให้ไม่สามารถใช้วิธีนี้ในการกำหนดโปรตีนในปัสสาวะเพื่อประเมินสถานะของไต (glomerular filter) ในการเปลี่ยนแปลงได้ ด้วยโปรตีนในท่อปัสสาวะ ผลของการกำหนดโปรตีนจะถูกประเมินต่ำเกินไป การทดสอบโปรตีนด้วยแผ่นทดสอบไม่ใช่ตัวบ่งชี้ที่เชื่อถือได้ว่ามีโปรตีนในปัสสาวะในระดับต่ำ (แถบทดสอบส่วนใหญ่ที่มีอยู่ในปัจจุบันไม่สามารถตรวจหาโปรตีนในปัสสาวะที่ความเข้มข้นต่ำกว่า 0.15 ก./ลิตร) ผลลัพธ์เชิงลบของการกำหนดโปรตีนบนแถบนั้นไม่รวมการมีอยู่ของโกลบูลิน เฮโมโกลบิน ยูโรมิวคอยด์ โปรตีน Bence-Jones และพาราโปรตีนอื่นๆ ในปัสสาวะ
เกล็ดของเมือกที่มีปริมาณไกลโคโปรตีนสูง (เช่น ในกระบวนการอักเสบใน ทางเดินปัสสาวะ, pyuria, bacteriuria) สามารถเกาะติดกับโซนตัวบ่งชี้ของแถบและนำไปสู่ผลลัพธ์ที่เป็นเท็จ ผลบวกเท็จอาจเกี่ยวข้องกับความเข้มข้นสูง ยูเรีย. แสงไม่ดีและการรับรู้สีไม่ดีอาจทำให้ได้ผลลัพธ์ที่ไม่ถูกต้อง
ในเรื่องนี้ การใช้แผ่นตรวจวินิจฉัยควรจำกัดเฉพาะขั้นตอนการตรวจคัดกรอง และผลที่ได้รับด้วยความช่วยเหลือควรได้รับการพิจารณาว่าเป็นเครื่องบ่งชี้เท่านั้น
วิธีการเชิงปริมาณ
ถูกต้อง การหาปริมาณโปรตีนในปัสสาวะ ในบางกรณีก็กลายเป็นงานที่ยาก ความยากในการแก้ปัญหานั้นพิจารณาจากปัจจัยหลายประการดังต่อไปนี้:
การปรากฏตัวของสารประกอบหลายชนิดในปัสสาวะที่อาจรบกวนปฏิกิริยาเคมี
ความผันผวนอย่างมีนัยสำคัญในเนื้อหาและองค์ประกอบของโปรตีนในปัสสาวะในโรคต่างๆ ทำให้ยากต่อการเลือกวัสดุสอบเทียบที่เพียงพอ
ในห้องปฏิบัติการทางคลินิกมักใช้วิธีการที่เรียกว่า "กิจวัตร" ในการตรวจหาโปรตีนในปัสสาวะ แต่ก็ไม่ได้ให้ผลลัพธ์ที่น่าพอใจเสมอไป
จากมุมมองของนักวิเคราะห์ที่ทำงานในห้องปฏิบัติการ วิธีการที่ออกแบบมาเพื่อวัดปริมาณโปรตีนในปัสสาวะควรเป็นไปตามข้อกำหนดต่อไปนี้:
มีความสัมพันธ์เชิงเส้นตรงระหว่างการดูดซึมของสารเชิงซ้อนที่เกิดขึ้นระหว่างปฏิกิริยาเคมีกับปริมาณโปรตีนในตัวอย่างในระดับความเข้มข้นที่หลากหลาย ซึ่งจะหลีกเลี่ยงการดำเนินการเพิ่มเติมเมื่อเตรียมตัวอย่างสำหรับการวิจัย
ควรจะง่าย ไม่ต้องการคุณสมบัติของนักแสดงสูง ดำเนินการจำนวนน้อย;
มีความไวสูง ความน่าเชื่อถือในการวิเคราะห์เมื่อใช้วัสดุทดสอบในปริมาณน้อย
ทนต่อปัจจัยต่าง ๆ (ความผันผวนในองค์ประกอบของตัวอย่าง การปรากฏตัวของยา ฯลฯ );
มีค่าใช้จ่ายที่ยอมรับได้
สามารถปรับให้เข้ากับเครื่องวิเคราะห์อัตโนมัติได้อย่างง่ายดาย
ผลการตรวจไม่ควรขึ้นอยู่กับองค์ประกอบโปรตีนของตัวอย่างปัสสาวะที่ศึกษา
ไม่มีวิธีการใดที่เป็นที่รู้จักในปัจจุบันสำหรับการกำหนดปริมาณโปรตีนในปัสสาวะที่สามารถอ้างว่าเป็น "มาตรฐานทองคำ" ได้อย่างเต็มที่
วิธีการเชิงปริมาณสำหรับกำหนดโปรตีนในปัสสาวะสามารถแบ่งออกเป็นความขุ่นและสี
วิธีการวัดความขุ่น
วิธีการวัดความขุ่นรวมถึง:
การหาโปรตีนด้วยกรดซัลโฟซาลิไซลิก (SSK)
การหาโปรตีนด้วยกรดไตรคลอโรอะซิติก (TCA)
การหาปริมาณโปรตีนด้วยเบนโซเนียมคลอไรด์
วิธีการวัดความขุ่นขึ้นอยู่กับความสามารถในการละลายของโปรตีนในปัสสาวะที่ลดลงเนื่องจากการก่อตัวของสารแขวนลอยของอนุภาคแขวนลอยภายใต้อิทธิพลของสารตกตะกอน ปริมาณโปรตีนในตัวอย่างทดสอบจะพิจารณาจากความเข้มของการกระเจิงของแสง ซึ่งพิจารณาจากจำนวนของอนุภาคที่กระเจิงแสง (วิธีการวิเคราะห์เนฟีโลเมตริก) หรือโดยการลดลงของฟลักซ์แสงโดยผลของการแขวนลอยที่ได้ (วิธีการวิเคราะห์ความขุ่น ).
ปริมาณการกระเจิงของแสงในวิธีการตกตะกอนเพื่อตรวจหาโปรตีนในปัสสาวะนั้นขึ้นอยู่กับหลายปัจจัย: ความเร็วของการผสมรีเอเจนต์ อุณหภูมิของส่วนผสมของปฏิกิริยา ค่า pH ของตัวกลาง การมีอยู่ของสารประกอบแปลกปลอม วิธีโฟโตเมตริก การสังเกตสภาวะของปฏิกิริยาอย่างระมัดระวังทำให้เกิดการแขวนลอยที่เสถียรด้วยขนาดอนุภาคคงที่และได้ผลลัพธ์ที่ทำซ้ำได้ค่อนข้างมาก
บาง ยาส่งผลต่อผลลัพธ์ของวิธีการวัดความขุ่นในการกำหนดโปรตีนในปัสสาวะ ซึ่งนำไปสู่ผลลัพธ์ที่เรียกว่า "ผลบวกเท็จ" หรือ "ผลลบเท็จ" ซึ่งรวมถึงยาปฏิชีวนะบางชนิด (เบนซิลเพนิซิลลิน คลอกซาซิลลิน ฯลฯ ) สารที่มีไอโอดีนกัมมันตภาพรังสี การเตรียมซัลฟานิลาไมด์
วิธีการวัดความขุ่นนั้นยากต่อการกำหนดมาตรฐานและมักจะนำไปสู่ผลลัพธ์ที่ผิดพลาด แต่ถึงกระนั้น ก็ยังมีการใช้กันอย่างแพร่หลายในห้องปฏิบัติการ เนื่องจากมีต้นทุนต่ำและความพร้อมใช้งานของรีเอเจนต์ วิธีการที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในรัสเซียคือการหาโปรตีนด้วยกรดซัลโฟซาลิไซลิก
วิธีการสี
วิธีที่มีความละเอียดอ่อนและแม่นยำที่สุดคือวิธีการวัดสีเพื่อกำหนดปริมาณโปรตีนในปัสสาวะทั้งหมด โดยพิจารณาจากปฏิกิริยาสีจำเพาะของโปรตีน
ซึ่งรวมถึง:
ปฏิกิริยาไบยูเรต,
วิธีโลว์รี่
วิธีการขึ้นอยู่กับความสามารถของสีย้อมต่างๆในการสร้างสารเชิงซ้อนที่มีโปรตีน:
พอนโซ เอส (ปอนโซ เอส),
Coomassie Brilliant Blue (คูแมสซี่ Brilliant Blue)
ไพโรกัลลอลแดง (Pyrogallol Red)
จากมุมมองของนักแสดง ในการทำงานประจำวันของห้องปฏิบัติการที่มีการวิจัยจำนวนมาก วิธีไบยูเรตนั้นไม่สะดวกเนื่องจากมีการดำเนินการจำนวนมาก ในเวลาเดียวกัน วิธีการนี้มีลักษณะเฉพาะที่มีความน่าเชื่อถือในการวิเคราะห์สูง ทำให้สามารถกำหนดโปรตีนในระดับความเข้มข้นที่หลากหลาย และตรวจหาอัลบูมิน โกลบูลิน และพาราโปรตีนที่มีความไวที่ใกล้เคียงกัน ซึ่งเป็นผลมาจากวิธีไบยูเร็ตถือเป็น อ้างอิงและแนะนำสำหรับการเปรียบเทียบวิธีการวิเคราะห์อื่นๆ ในการตรวจหาโปรตีนในปัสสาวะ ควรใช้วิธีการไบยูเรตในการกำหนดโปรตีนในปัสสาวะในห้องปฏิบัติการที่ให้บริการแผนกโรคไต และใช้ในกรณีที่สงสัยผลการตรวจวัดโดยใช้วิธีอื่น รวมทั้งเพื่อกำหนดปริมาณการสูญเสียโปรตีนรายวันในผู้ป่วยโรคไต
วิธี Lowry ซึ่งมีความไวสูงกว่าวิธี biuret รวมปฏิกิริยาของ biuret และปฏิกิริยา Folin สำหรับกรดอะมิโนไทโรซีนและทริปโตเฟนในโมเลกุลโปรตีน แม้จะมีความไวสูง แต่วิธีนี้ไม่ได้ให้ผลลัพธ์ที่เชื่อถือได้ในการกำหนดปริมาณโปรตีนในปัสสาวะเสมอไป เหตุผลนี้คือปฏิกิริยาที่ไม่เฉพาะเจาะจงของรีเอเจนต์ของ Folin กับส่วนประกอบที่ไม่ใช่โปรตีนของปัสสาวะ (ส่วนใหญ่มักเป็นกรดอะมิโน กรดยูริก คาร์โบไฮเดรต) การแยกส่วนประกอบเหล่านี้และส่วนประกอบอื่น ๆ ของทางเดินปัสสาวะโดยการฟอกไตหรือการตกตะกอนของโปรตีนทำให้วิธีนี้ใช้ได้ผลดีในการวัดปริมาณโปรตีนในปัสสาวะ ยาบางชนิด เช่น salicylates, chlorpromazine, tetracyclines อาจส่งผลต่อวิธีการนี้และบิดเบือนผลการศึกษา
ความไวที่เพียงพอ ความสามารถในการทำซ้ำได้ดี และความง่ายในการกำหนดโปรตีนโดยการผูกมัดด้วยสีย้อมทำให้วิธีการเหล่านี้มีแนวโน้มดี แต่น้ำยารีเอเจนต์ที่มีราคาสูงขัดขวางการใช้งานที่กว้างขึ้นในห้องปฏิบัติการ ปัจจุบันวิธีการที่ใช้ไพโรกัลลอลเรดกำลังแพร่หลายมากขึ้นในรัสเซีย
เมื่อตรวจสอบระดับโปรตีนในปัสสาวะ ต้องคำนึงว่าวิธีการต่างๆ ในการตรวจหาโปรตีนในปัสสาวะมีความไวและความจำเพาะที่แตกต่างกันสำหรับโปรตีนในปัสสาวะจำนวนมาก
จากข้อมูลเชิงประจักษ์ ขอแนะนำให้กำหนดโปรตีนด้วยวิธีต่างๆ สองวิธีและคำนวณค่าที่แท้จริงโดยใช้สูตรใดสูตรหนึ่งต่อไปนี้: โปรตีนในปัสสาวะ = 0.4799 B + 0.5230 L; โปรตีนในปัสสาวะ = 1.5484 B - 0.4825 S; โปรตีนในปัสสาวะ = 0.2167 S + 0.7579 L; โปรตีนในปัสสาวะ = 1.0748 P - 0.0986 B; โปรตีนในปัสสาวะ = 1.0104 P - 0.0289 S; โปรตีนในปัสสาวะ = 0.8959 P + 0.0845 L; โดยที่ B คือผลลัพธ์ของการวัดด้วย Coomassie G-250; L คือผลลัพธ์ของการวัดด้วยรีเอเจนต์ของ Lowry; P คือผลการวัดด้วย pyrogallol molybdate; S คือผลลัพธ์ของการวัดด้วยกรดซัลโฟซาลิไซลิก
โดยคำนึงถึงความผันผวนที่เด่นชัดในระดับโปรตีนในปัสสาวะในช่วงเวลาต่างๆ ของวัน รวมถึงการพึ่งพาความเข้มข้นของโปรตีนในปัสสาวะในการขับปัสสาวะ เนื้อหาที่แตกต่างกันในแต่ละส่วนของปัสสาวะ จึงเป็นธรรมเนียมที่จะต้องประเมิน ความรุนแรงของโปรตีนในปัสสาวะในพยาธิสภาพของไตโดยการสูญเสียโปรตีนในปัสสาวะทุกวันนั่นคือเพื่อตรวจสอบสิ่งที่เรียกว่าโปรตีนในชีวิตประจำวัน มันแสดงเป็นกรัม/วัน
หากไม่สามารถเก็บปัสสาวะได้ทุกวัน ขอแนะนำให้กำหนดความเข้มข้นของโปรตีนและครีเอตินีนในปัสสาวะส่วนเดียว เนื่องจากอัตราการปลดปล่อยครีเอตินีนในระหว่างวันค่อนข้างคงที่และไม่ขึ้นอยู่กับการเปลี่ยนแปลงของอัตราการถ่ายปัสสาวะ อัตราส่วนของความเข้มข้นของโปรตีนต่อความเข้มข้นของครีเอตินีนจึงคงที่ อัตราส่วนนี้สัมพันธ์กันดีกับการขับโปรตีนในแต่ละวัน ดังนั้นจึงสามารถใช้ประเมินความรุนแรงของโปรตีนในปัสสาวะได้ โดยปกติอัตราส่วนโปรตีน/ครีเอตินีนควรน้อยกว่า 0.2 โปรตีนและครีเอตินีนถูกวัดเป็นกรัม/ลิตร ข้อได้เปรียบที่สำคัญของวิธีการประเมินความรุนแรงของโปรตีนในปัสสาวะโดยอัตราส่วนระหว่างโปรตีนกับครีเอตินีนคือการกำจัดข้อผิดพลาดที่เกี่ยวข้องกับความเป็นไปไม่ได้หรือการเก็บปัสสาวะที่ไม่สมบูรณ์ในแต่ละวัน
วรรณกรรม:
O. V. Novoselova, M. B. Pyatigorskaya, Yu. E. Mikhailov, "ลักษณะทางคลินิกของการตรวจจับและการประเมินโปรตีนในปัสสาวะ", คู่มือของหัวหน้า CDL, ฉบับที่ 1, มกราคม 2550
A. V. Kozlov, "Proteinuria: วิธีการตรวจหา", การบรรยาย, เซนต์ปีเตอร์สเบิร์ก, SPbMAPO, 2000
วี.แอล.เอ็มมานูเอล” การวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการโรคไต Urinary Syndrome”, - คู่มือหัวหน้า CDL ฉบับที่ 12 ธันวาคม 2549
ในและ. พัพโควา, แอล.เอ็ม. Prasolova - วิธีการกำหนดโปรตีนในปัสสาวะ (ทบทวนข้อมูลวรรณกรรม)
คู่มือวิธีการวิจัยทางห้องปฏิบัติการทางคลินิก. เอ็ด. อี.เอ.คอสท์. มอสโก "ยา", 197